Актуальность темы исследования и степень ее разработанности. Значение служебного собаководства для человечества трудно переоценить. Сдерживающим фактором для разведения и улучшения пород собак являются инфекционные и инвазионные болезни. Они не только приносят значительный экономический ущерб, не позволяют использовать собак в различных отраслях хозяйства, спорте, армии, органах правопорядка, обмениваться животными, а также могут быть опасными для людей. К таким болезням относится дирофиляриоз – единственный гельминтоз, который в умеренно-континентальном климате нашей страны передается трансмиссивным путем через комаров [47].

Дирофиляриоз плотоядных вызывается нематодами рода Dirofilaria, относится к типу Nemathelmintes Schneider, классу Nematoda Rudolphi, подклассу Phasmida Chitwood, отряду Spirurida Chitwood, подотряду Filariata Skrjabin, семейству Onchocercidae Leiper, роду Dirofilaria Railliet et Henry. Род Dirofilaria включает следующие виды: D. immitis, D. repens и D. Ursi [90, 157]. У плотоядных наибольшее распространение получили два вида – Dirofilaria immitis [152] и Dirofilaria repens [168]. D. immitis, паразитируя в правой половине сердца и легочной артерии, способны вызывать тяжелую патологию не только этих органов, но других систем организма. Заболевание приводит к асциту и циррозу печени, в результате механической закупорки и прогрессирующего эндокардита, к эмболии кровеносных сосудов и к внезапной гибели собак [113, 118, 149, 177, 179, 185]. D. repens паразитирует в подкожной клетчатке, что сопровождается гнойным воспалением и может привести к септическому состоянию животных.

Определенную опасность дирофилярии представляют для человека, у которого не достигающие половой зрелости дирофилярии вызывают серьёзную патологию в форме подкожных и субконъюктивальных узелков и поражения глазного яблока. Случаи дирофиляриоза в настоящее время выявляются уже в 39 субъектах Российской Федерации достигающих 59º с.ш., а не только у жителей южных регионах страны [17, 35, 82]. Заболеваемость людей дирофиляриозом не изучена, так как официально не ведется регистрация этого заболевания. Поскольку медицинский персонал не знает об этой патологии, дирофиляриоз диагностируется очень редко. Поэтому эта инвазия, как редко встречающаяся и требующая повышенного внимания, с 2003 года впервые данный паразитоз включен в официальные документы Минздрава РФ (СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», МУ 3.2.1756-03 «Эпиднадзор за паразитарными болезнями» и МУ 3.2.1880-04 «Профилактика дирофиляриоза»).

В последние годы в мире ареал распространения дирофиляриоза собак значительно расширился и в нашей стране достиг Дальнего Востока [10, 12, 14, 40, 42, 44, 50, 75, 80, 82, 93, 100]. ). На Южном Урале эти гельминты ранее не были описаны («Гельминты животных, человека и растений на Южном Урале» Уфа, 1974). На территории Республики Башкортостан дирофиляриоз был установлен нами в 2003 году, при вскрытии внезапно павших собак и, в настоящее время, стал широко распространенным заболеванием, что, прежде всего, негативно сказывается на служебном собаководстве[64].

Большинство научных исследований посвящено изучению распространения D. immitis у собак в том или ином регионе [7, 14, 17, 21, 27, 30, 45, 47, 56, 69, 81, 93, 99, 102, 106, 107, 116, 118, 141, 185, 186]. Однако до сих пор недостаточно освещены вопросы прижизненной клинической и лабораторной диагностики, патоморфологии, лечения и специфической профилактики дирофиляриоза, которые крайне важны для служебного собаководства [15, 16,

19, 24, 31, 32, 40, 42, 51, 60, 89, 92].

Таким образом, дирофиляриоз собак в условиях Южного Урала изучен недостаточно. Не вызывает сомнения, что исследования посвященные распространению данного заболевания, апробации методов прижизненной диагностики, описание патоморфологических изменений и патоморфогенеза дирофиляриоза, разработка эффективных методов лечения и профилактики этой инвазии актуальны, теоретически и практически значимы.

Цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования являлось выяснение патоморфологии, патогенеза, диагностики дирофиляриоза и лечение собак при этой инвазии в условиях Республики Башкортостан.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи.

Определить распространение дирофиляриоза у служебных собак в Республике Башкортостан.
Выполнить сравнительный анализ методов прижизненной диагностики дирофиляриоза.
Выявить клинические признаки и гематологические изменения при дирофиляриозе собак.
Установить патологоанатомические и патогистологические изменения, патоморфогенез при дирофиляриозе собак в условиях Республики Башкортостан.
Провести сравнительное исследование эффективности препаратов используемых для микрофилярицидной терапии дирофиляриоза и профилактики этой инвазии служебных собак.

Научная новизна и ценность полученных результатов настоящей работы заключается в том, что впервые в условиях Республики Башкортостан проведено комплексное клинико-морфологическое и лабораторное исследование служебных собак, и изучено распространение, патоморфология, патогенез и методы диагностики нового для Южного Урала трансмиссивного инвазионного заболевания. Доказано, что наличие дирофилярий в сердце собак, даже в небольшом количестве, может привести к тяжелым патологиям эндокарда, легких (застойная гиперемия, отек, пневмонии), печени (венозная гиперемия и индурация, гепатоз), почек (гломерулонефрит). Проведено сравнительное исследование терапевтической эффективности ивермектина, мильбемакса и селамектина с целью совершенствования лечебнопрофилактических мероприятий, проводимых против дирофиляриоза служебных собак в Уфимской школе по подготовке специалистов-кинологов МВД Российской Федерации.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные расширяют имеющиеся в настоящее время сведения: о распространении дирофиляриоза собак, о клинических, патоморфологических проявлениях этого заболевания, об информативности лабораторных методов диагностики микрофилярий, о препаратах, позволяющих эффективно проводить микрофилярицидную терапию и, тем самым, профилактировать распространение дирофиляриоза трансмиссивным путем.

Результаты могут быть использованы в учебном процессе на ветеринарных факультетах, при проведении научно-исследовательской работы и написании учебников, учебных пособий и монографий.

Полученные данные свидетельствуют о широком распространении дирофиляриоза среди собак, поступающих в школу по подготовке специалистов-кинологов практически из всех регионов Российской Федерации. В Республике Башкортостан экстенсивность инвазии у служебных собак достигает 25-30%, а у собак, содержащихся в вольерах, не обработанных с профилактической целью, достигает 90%. Клинические признаки дирофиляриоза выявляются у собак старше пятилетнего возраста. Лечение таких животных осложнено, зависит от степени развития патологических процессов в сердце и других органах, и часто не эффективно. Это необходимо учитывать при разработке лечебно-профилактических мероприятий в служебном собаководстве.

При совершенствовании диагностики дирофиляриоза необходимо учитывать, что методы, основанные на обнаружении микрофилярий, достаточно эффективны и просты в выполнении, но не позволяют провести видовую дифференциацию паразита. Для этого необходимо применять более сложные методики, основанные на полимеразно-цепной реакции или иммуноферментном анализе, экспресс-тесты.

Реализация результатов исследований. Настоящее исследование является разделом комплексной научно-исследовательской работы кафедры морфологии, патологии, фармации и незаразных болезней ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ (№ госрегистрации 0120.0950308). Материалы диссертационной работы включены в рекомендации «Диагностика, лечение и профилактика дирофиляриоза собак» утвержденные Управлением ветеринарии Республики Башкортостан (2014), используются в кинологических подразделениях МВД РБ, МВД РФ, ФТС и ветеринарных клиниках г. Уфы, а также в учебной и научно-инновационной деятельности кафедр ветеринарного профиля аграрных вузов РФ.

Публикации результатов исследований. Основные положения диссертационной работы отражены в 9 научных статьях, в том числе в двух публикациях в рецензированных научных журналах «Вестник Башкирского государственного аграрного университета» и «Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины».

Методология и методы исследования. Методологической основой нашего исследования является комплексный клинико-морфологический подход изучения нового для Южного Урала заболевания – дирофиляриоза. С помощью клинических и лабораторных методов обследовано 650 служебных собак, прибывших в «Уфимскую школу по подготовке специалистов-кинологов Министерства внутренних дел Российской Федерации» из двадцати регионов России. В условиях кафедры морфологии, патологии, фармации и незаразных болезней Башкирского государственного аграрного университета вскрыто 318 трупов собак. Проведено патогистологическое исследование сердца, печени, легких и почек собак с наличием в органах и тканях D. immitis и D. repens. С целью уничтожения личинок мы проводили микрофилярицидную терапию для устранения повреждающего действия личинок на органы и ткани организма и недопущения заражения других собак [64].

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

В Республике Башкортостан зараженность дирофиляриозом служебных собак составляет 25-30%. Среди собак, содержащихся в вольерах и не подвергнутых профилактической обработке, этот показатель достигает 90%.
Традиционные методы диагностики дирофиляриоза, такие как микроскопия капли нативной крови и метод Кнотта, основанные на непосредственном обнаружении микрофилярий, достаточно эффективны и просты в выполнении. Однако они не позволяют провести дифференциацию вида паразита. Для этого необходимо применять сложные методики (ПЦР, ИФА) или использовать экспресс-тесты (иммунохроматография).
Клинические признаки дирофиляриоза выявляются у собак старше пятилетнего возраста. Лечение таких животных осложнено и зависит от степени развития осложнений в сердце и других органах.
Патоморфологические изменения выявляются в правом желудочке сердца и легочной артерии в виде дистрофических изменений трехстворчатых клапанов, вальвулярных эндокардитов и артериитов. Эти процессы приводят к образованию тромбов, эмболии кровеносных сосудов и внезапной гибели собак, в результате механической закупорки легочной артерии, венозной гиперемии и отеку легких, а в хронических случаях к циррозу печени и асциту. Наличие микрофилярий в крови сопровождается развитием гломерулонефритов. D. repens паразитирует в подкожной клетчатке, что

сопровождается гнойным воспалением и может привести к септикопиемии.

Микрофилярицидные препараты (ивермектин, мильбемицин), применяемые с интервалом 30-35 дней в теплый период года, губительно действуют на микрофилярии. Таким образом, не допускается заражение других собак, что позволяет приостановить дальнейшее распространение инвазии среди служебных собак.

Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность результатов исследования основана на том, что исходные данные получены на сертифицированном оборудовании, с помощью современных методик сбора и обработки информации. Данные достаточно полно опубликованы в доступных рецензированных источниках и апробированы на крупных специализированных научных форумах. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на следующих международных и всероссийских научных конференциях: международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ «Состояние, проблемы и перспективы развития АПК» (Уфа, 2010); II международной научнопрактической конференции «Безопасность жизнедеятельности: современные проблемы и пути их решения» (Уфа, 2011); всероссийской научнопрактической конференции «Научное обеспечение устойчивого развития АПК» (Уфа, 2011); 17-й всероссийской научно-методической конференции по

патологической анатомии «Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных» (Москва, 2011); международной научно-практической конференции в рамках ХХII международной специализированной выставки «АгроКомплекс-2012» «Инновационному развитию АПК - научное обеспечение» (Уфа, 2012); всероссийской научно-практической конференции «Современные достижения ветеринарной медицины в сельскохозяйственном производстве. Африканская чума свиней – прогноз, проблемы и пути их решения» (Уфа, 2012); всероссийской научно-практической конференции в рамках XXIII международной специализированной выставки «АгроКомплекс 2013» «Современные подходы к обеспечению здоровья животных. Инновации, опыт, проблемы и пути решения» (Уфа, 2013); всероссийской научнопрактической конференции «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии – в сельскохозяйственное производство» (Уфа, 2014).

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Общие сведения о дирофиляриозе и биологии дирофилярий

Дирофиляриоз вероятно был известен еще в 16-м веке, и первоначально называлася D. conjunctiva так как часто паразит локализовался в области глаз. В

литературе одним из первых описал дирофиляриоз у человека врач Амато Лузиато 1566 году. Итальянский врач У. Альдрованди описал схожий случай в 1602 году в трудах «De animals insectis». Анджело Пасе в Италии в 1867 году, удалил у из верхнего века ребенка круглого червя длиной 10 см. В 1880 году в Венгрии хирург Бал описал похожего гельминта, удаленного у мужчины из кисты в области желудочно-селезеночной связки. В начале 20-го века этот гельминт был назван Dirofilaria repens. Владыченский А.П. впервые в России выявил дирофиляриоз в 1915 году в городе Екатеринодар нынешний Краснодар. Академиком К.И.Скрябин подробно изучал данного паразита, изначально он идентифицировал дирофилярии как Loa extraocularis. После более детальных исследований, К.И. Скрябин в 1946 году [88] пришел к выводу, что данный паразит, принадлежит к неполовозрелым стадиям Dirofilaria repens [90] за рубежом эти паразиты были известны как F. conjunctivae, F. palpebrae и прочие.

Н.И. Петропавловский в 1904 году описал первый случай обнаружения D. repens у собаки в Харьковской области. Л.С. Гогель впервые обнаружил D. immitis в Азербайджане в 1910 году. В разное время дирофиляриоз, вызываемый D. immitis, зарегистрирован в Туркменистане [87], Абхазии [20], Азербайджане [37], Грузии [25], Армении [61], Крыму [41], Хабаровском крае [44], Узбекистане [100], Украине [73].

В последнее время дирофиляриозу собак посвящено большое количество научных работ, отечественных исследователей [7, 11, 17, 22, 30, 31, 40, 41, 46, 53, 61, 68, 80, 81, 93, 100, 104, 106, 110, 116, 129, 132, 169, 185].

Дирофиляриоз плотоядных вызывается нематодами рода Dirofilaria, М.Д.

Сонин [90] описывает систематику в следующем виде: тип Nemathelmintes

Schneider, класс Nematoda Rudolphi, подкласс Phasmida Chitwood, отряд Spirurida

Chitwood, подотряд Filariata Skrjabin, семейство Onchocercidae Leiper, род Dirofilaria. Род Dirofilaria включает следующие виды: D. immitis, D. repens и D. ursi. D. immitis и D. repens паразитирует у собак, волков, лисиц, кошек, медведей, обезьян и человека [13, 71, 105]. Dirofilaria immitis паразитирует в правом желудочке сердца и легочной артерии, D.repens локализующимися в подкожной клетчатке [168]). Собаки и кошки являются основными хозяевами для дирофилярий. Дикие животные, такие как медведи, лисы, волки и другие плотоядные могут служить резервуаром для дирофиляриоза. Дирофиляриозом также может заражаться и человек, преимущественно D.repens. Микрофилярии - личиночные формы филярий локализуются в

основном в крови собак.

При описании дирофилярий чаще всего используют описание А.М. Петрову [68], К.И. Скрябин, Н.П. Шихобалова [88], другие авторы отмечают характерные особенности взрослых дирофилярий: Т.И. Авдюхина с соавт. [2], М.Ш. Акбаев [3], И.С. Дахно [36], О. Карвовський с соавт. [43]:

D. immitis – это длинные нематоды светло-желтого цвета, слегка утончающиеся к концам. Поверхность кутикулы с продольными гребнями. Ротовое отверстие расположено терминально и ведет в цилиндрический пищевод, слегка расширяющийся в задней своей части. Длина тела самца 120 -180мм, максимальная ширина 1,124-1,286мм. Ширина тела в области конца пищевода 0,877мм, в области клоаки 0,192мм. Длина тела самки 250-300мм, максимальная ширина 0,75-1,514мм. Ширина тела в области пищевода 0,4820,913мм, в области вульвы 0,636-1,014мм, вблизи конца хвоста 0,1440,187мм. Длина пищевода 1,084-1,600мм, максимальная ширина 0,1160,140мм. Хвостовой конец закруглен. Анус открывается субтерминально. Вульва на расстоянии 1,651-2,272мм от головного конца. Длина микрофилярий 0,22-0,29мм, ширина 0,05-0,07 мм.

D. repens – половозрелые самки имеют длину тела 135-150мм, тело сужено к концам. Кутикула белая с четкой продольной и нежной поперечной исчерченностью. Рот простой, ротовая капсула рудиментарна. Длина тела 140-150мм, ширина 0,447-0,55мм. Пищевод 1,05-1,53мм, передняя мускульная часть 0,49-0,54мм. Самец D.repens. Длина тела 50-58мм, максимальная ширина 0,41мм. Ширина тела в области конца пищевода доходит до 0,38мм, а на уровне клоаки 0,36мм. Длина пищевода достигает 1,74мм. Нервное кольцо отстоит от головного конца на расстоянии 0,26мм.

Микрофилярии без чехлика, передний конец их тупой, задний заостренный, нитевидный. Длина микрофилярии H. Lent [153] 0,30-0,36мм, ширина 0,006-0,008мм. По результатам исследований C.F.Schrey и E.Trautvetter [81] длина микрофилярий D.immitis 262,1-338,2, D.repens 274,6361,9дм.

В. Grassi и G. Noe в 1900 году [137] первые описали цикл развития D. immitis, ученые указывают на то , что развитие этого паразита происходит в теле комара, непосредственно, в мальпигиевых сосудах. Развитие личинок в комарах происходит при средней температуре окружающего воздуха не ниже 14° С. В течение 10-15 дней у них проходит две линьки, из стадии L1 они развиваются до инвазионной стадии L3 и проходят в ротовой аппарат комара. Инвазионные личинки проникают в организм основного хозяина в процессе питания комара, при этом микрофилярии проникают из комара в кровь дефинитивного хозяина. Далее личинки L3 за 80-120 дней завершают соматическую миграцию в организме хозяина, проходят две линьки до стадии L5 (ювенальные черви), выходят в кровянистое русло, проникют в периферические вены, и достигают легочных артерий впо большей части в каудальных долях легких. В течении 3 месяцев личинки L5 развиваются в половозрелых червей, способных отрождать микрофилярий. По данным В.Б. Ястреб развитие D. immitis в организме собак до половозрелой стадии продолжается от 8 до 12 месяцев, а средняя продолжительность жизни половозрелых червей в окончательном хозяине до 5 лет у собак и до 2,5 лет у кошек. Микрофилярий могут находиться в крови до 2,5 лет после гибели взрослых паразитов[107].

В России развитие D. immitis в организме собак подробно изучено И.А. Архиповым и Д.Р. Архиповой [13]. Инкубационный период, по их данным, составляет от 1 месяца до 2-3 лет и зависит от локализации и скорости развития паразита.

По данным Горохова В.В. и Москвина А.С. [33] дирофилярии у собак достигают половой зрелости около 6 месяцев. Половозрелые гельминты в крови у собак могут находиться в течение 2-3 лет.

Основными переносчиками дирофиляриоза являются комары родов Culex, Anopheles, Aedes [96, 97]. Скорость развития личинок в организме комаров до инвазионной стадии зависит в основном от температуры окружающей среды и в некоторой степени от вида комаров.

Дирофиляриоз является сезонным заболеванием. Распространиние и зараженность животных тесно связана с активностью комаров, которая приходится на теплое время года. Пути и направления распространения дирофиляриоза непосредственно связаны с комарами родов Aedes, Culex и Anopheles, пораженность которых личинками микрофилярий в очагах Ростовской области составила от 2,5% до 31% [59]. По данным А.И. Шинкаренко [102] в Волгоградской области в качестве промежуточных хозяев для D. immitis зарегистрированы комары видов Culex pipiens, С. modestus, Aedes caspius и Anopheles maculipennis.

Дирофилярии живородящие гельминты. Самки отрождают личинок – микрофилярий непосредственно в кровь, которые там циркулируют. Одна самка D.immitis за сутки может продуцировать до 30 тыс. микрофилярий [129]. В организме животных взрослые паразиты живут от 4-5 месяцев до 2 лет [185].

Личинки 3-й стадии (L3) мигрируют в подкожные и жировые ткани собак, и остаются в течение 3-х месяцев. По данным J.K.Richer [174] такие личинки могут разрушать до 24% внеклеточного вещества. Затем личинки L4 перемещаются в мышечную оболочку и в течение 60 дней остаются в состоянии покоя и через 60 дней линяют еще раз и превращаются в личинок L5. Такие личинки способны разрушить до 10% внеклеточного вещества.

J.A.Manda [159] описывает также трансплацентарный способ заражения D. repens.

Заражение собак и других животных происходит в процессе последующего питания комаров, во время которого инвазионные личинки проникают из хоботка насекомого в кровь дефинитивного хозяина [ 3, 8, 23,

24, 73].

Цикл развития D. repens аналогичен D. immitis, но дирофилярий вида D.repens локализуются в подкожной клетчатке [192].

Изучая цикл развития D. immitis S. Kume и S. Itagaki [148] установили, что после заражения дирофилярии достигают сердца собак в среднем через 85-120-е суток и редко на 67-е сутки. W.A. Webber, F. Hawking [192]. провели специальные исследования и установили сроки развития D.immitis и D.repens в организме собак. Установлено, что у экспериментально зараженных собак препатентный период развития D.immitis составляет 32 недели, D.repens меньше и составляет 26 недель, a, а продолжительность жизни этих видов дирофилярий в организме собак равна для D.immitis 2 года, для D.repens 3 года. По данным T.L. Bancroft [115] и W.L.Newton [165] данный период развития у D. immitis составляет 7-9 месяцев.

По мнению большинства исследователей, человек является случайным хозяином Dirofilaria repens. До недавнего времени сообщалось о редких случаях подтверждение диагноза этого паразитоза [2, 8, 23, 24, 38, 49]. Лишь в последние годы появилось много сообщений о выявлении Dirofilaria repens у человека [52, 60, 82]. Заражение происходит при нападении комара на человека, инвазионные личинки (L3) D. repens внедряются в подкожную клетчатку. В подкожной клетчатке личинки линяют и превращаются в личинки (L4). Через 2 месяца личинки становятся молодыми, неполовозрелыми особями. Такие гельминты в течение 3-4-х месяцев мигрируют в подкожной клетчатке, линяют в личинки 5-го возраста. Через 3 месяца они превращаются во взрослых гельминтов и локализуются под кожей, часто попадая в органы зрения [1, 34] или в органы размножения [52].

Исходя, из вышеперечисленного можно сделать выводы: дирофилярии являются биогельминтами, развитие паразита в инвазионную форму происходит путем нескольких линек, половозрелые самки дирофилярий отрождают 30 тысяч личинок в сутки непосредственно в кровь. Развитие в организме собаки от микрофилярии до имаго происходит за 7-8 месяцев. Продолжительность развития дирофилярий в организме собак отличается по данным разных авторов, микрофилярии циркулируют в крови окончательного хозяина до 2-х лет и более, взрослые гельминты паразитируют от 4-5 месяцев до 2-3-х лет, вероятно, это связано с разными природноклиматическими условиями, в которых проводились исследования животных.

1.2 Распространение дирофиляриоза

Многие страны в мире эндемичны по дирофиляриозу, и это заболевание продолжает распространяться на территории где раньше дирофиляриоз не регистрировался. По мнению многих авторов, главным факторов распространения этого дирофиляриоза является миграция зараженных животных, в крови которых присутствуют микрофилярии. Повсеместное распространение комаров делает возможность передачи дирофиляриоза практически везде, где присутствуют больные собаки. Основным условим враспространения дирофиляриоза является климатические условия, обеспечивающие влажность (60% и выше) и достаточно высокую температуру (23°С и выше), необходимые для поддержания жизнеспособности комаров, а также развития личинок в организме комара до инвазионной стадии [17].

Температура, является очень важным фактором, влияющим на распространенность дирофиляриоза, т.к. от температуры зависит не только численность и активность комаров, но и развитие определенного вида личинок дирофиляриоза в их организме (D.immitis или D.repens). При изменении погодных условий сезона передачи инвазии в различные годы исследований отмечается колебание видового состава дирофилярий в организме дефинитивного хозяина. Нормальное развитие личинок D. immitis в организме комара возможно при температура выше 27°С в течение 2 недель [13]. Более низкая температура окружающей среды продлевает развитие личинок D. immitis в организме комара. При температуре ниже 15°С в течение 50 дней личинки D. Immitis, в организме комара, были найдены живыми, но мало подвижными [142, 150].

Дирофиляриоз, вызываемый D. repens, обнаружен в Бухарской [58],

Ростовской областях [1], Абхазии [20], Азербайджане [37, 48], Киргизии [77], Грузии [25], Армении [61], Узбекистане [39, 10, 11, 13,104], Кзыл-Ордынской [91, 101], Семипалатинской областях [29]. На Украине, в зоне полесья, D. repens обнаруживали у 3% исследованных собак [26, 72].

На территории Российской Федерации дирофиляриоз регистрируется в Краснодарском крае [31], Саратове [50, 93, 98], Нижнем Новгороде [70], Волгограде [2], Московской области, Приморском, Хабаровском, Краснодарском,

Ставропольском краях, Астраханской, Волгоградской, Ростовской, Липецкой, Воронежской Саратовской, Самарской и Нижегородской областях [108, 109]. Артамонова А. А. [9] проводя исследования в г. Ростов-наДону установила 30% зараженность собак дирофиляриями, по данным

Серебряковой Н. В. [81] зараженность собак в том же регионе составляет до 28,0%, в Ростовской области до 31,5% по данным Нагорного С.А. [60]. В Республике Калмыкия по данным Архипова И.А., Архиповой Д.Р. [13] инвазированность собак, содержащихся в городских условиях составила 18.5%, собак, содержащихся в сельской местности составила 23.6%. В Московской области Ястреб В.Б. [111] указывает на зараженность от 5,0% обследованного поголовья собак в 2003 году и до 2,3 % в 2007 году. Медведев А. Ю. [56] в своих исследованиях указывает на выявление зараженных собак в Краснодарском крае от 17,52% холодное время года до 42,56% в теплое время года. В Волгоградской области Шинкаренко А.Н. и Петров Ю.Ф. [103] сравнивали зараженность собак дирофиляриями в городе собаки инвазированы на 8,2%, а в области - 10,8%. В Самарской области по данным Салимова В.А. [80] интенсивность инвазии достигает 60%. По данным Управления ветеринарии Самарской области поражение дирофиляриозом собак в г. Самаре в период с 2005 по 2010 гг. составляет от 13,9 до 51,8%. Мезенцев С.В. [57] указывает на пораженность собак дирофиляриозом в г. Барнауле 2008-2012 от 5,0 до 19,2 %. Аракелян Р.С. [7] в Астраханской области установил, что инвазированность собак дирофиляриями составляет 10,9%. Распространение дирофиляриоза приводит к угрозе здоровью людей, подтверждением этому является Письмо Роспотребнадзора от 09.09.2013 № 01/10330-13-32 - «О ситуации по дирофиляриозу в Российской Федерации», по данным этого письма дирофиляриоз человека зарегистрирован в 53 субъектах РФ, из них 29 в Европейской части России. Для дирофиляриоза свойсвенна очаговость распространения. Очаги дирофиляриоза выявлены у жителей в Московской, Рязанской, Тамбовской, Тульской, Воронежской, Липецкой, Челябинской, Новосибирской, Тюменской областях, в Алтайском крае, Республиках Башкортостане, Марий-Эл и Татарстане.

В Нижегородской области при исследовании крови у 86 служебных собак центра кинологической службы Нижегородской области. Выявлено 11 собак, зараженных дирофиляриозом [70].

Дирофиляриоз, вызыванный D. immitis, выявляютт у собак в 50 штатах США. Очаги дирофиляриоза выявлены в Калифорнии и Орегоне, Вайоминг, Юта, Айдахо и Вашингтон [198].

В Италии инвазированность собак D.immitis колеблется от 2,1 до 28,9%, а зараженность D.repens составляет 0,5-8,3% [127, 131, 185].

В последние годы отмечается тенденция к распространению дирофиляриоза не только в южных районах, но и на территориях с умеренным климатом, в местах, где много водоемов - мест для развития комаров. Отмечается быстрое распространение дирофиляриоза собак, вызваемого D. repens, на Украине [36, 49, 74].

Основными факторами широкого распространения заболевания в последние годы являются: увеличение поголовья собак, миграция домашних животных, в частности собак, из одной страны в другую, приспособливаемость личиночнок гельминта к развитию при разных температурах и адаптация дирофилярии к различным промежуточным хозяевам [14].

Дирофиляриоз регистрируется у собак практически всех возрастов, исключение составляют щенки до 6 месяцев, что связано длительным периодом развития паразита в организме собак. D. immitis и D. repens являются зоонозами и на территориях эндемичных по дирофиляриозу собак и кошек, очень высокий риск развития легочных и подкожных форм дирофиляриоза у человека. Человек, в таком случае, является так называемым «биологическим тупиком» и не имеет эпидемиологического значения как источник распространения дирофиляриоза [17].

1.3 Клинические признаки и патоморфологические изменения

при дирофиляриозе у собак

Клиническое проявление заболевания связано с воздействием паразита на органы и ткани животного и во многом зависит от времени заражения дирофиляриозом. Симптомы неспецефичные, больные собаки худеют, появляется слабость, утомляемость. По мере развития болезни появляются признаки сердечной недостаточности: увеличение границ сердца, нарушение ритма сердечных сокращений, шумы в сердце, измения на ЭКГ, экстрасистолия, гепато и спленомегалия, асцит. У больных собак появляется одышка, кашель, жесткое дыхание и хрипы в легких, развиваются застойные явления в малом кругу кровообращения [8, 24, 36, 81].

А. Мазуркевич [55] выделил четыре основных синдрома проявления дирофиляриоза: интоксикационный, кожный, псевдоопухолевый и правожелудочковую недостаточность.

При тяжелых формах дирофиляриоза при наличии большого количества взрослых дирофилярий в правом предсердии и синусе полых вен, у больных животных развивается недостаточность трикуспидального клапана и артериальная гипертензия в малом круге кровообращения и наблюдается так называемый «полостной синдром». Паразиты оказывают разрушающее действие на эритроциты - появляется гемоглобинемии и гемоглобинурии. У таких собак развивается печеночная и почечная недостаточность. Исследуя дирофиляриоз у собак, многие врачи выявляли усиление первого тона, недостаточность трикуспидального клапана, ритм галопа, желтуху и асцит. Часто указывают на то, что дирофиляриоз может протекать бессимптомно, особенно при подкожной форме дирофиляриоза. Некоторые авторы сообщают о поражении центральной нервной системы у больных животных и появлении нервных расстройств, при остром течении часто отмечается летальный исход, который обусловлен острой сердечно-сосудистой недостаточностью либо острой дыхательной недостаточностью вследсвие отека легких[3, 43, 46, 57].

Пульняшенко П.Р. [76] в зависимости от тяжести клинических проявлений предложил свою классификацию больных дирофиляриозом собак:

Клинически здоровые животные – в крови обнаруживают микрофилярии, отмечается умеренная эозинофилия, биохимические показатели крови и результаты исследования мочи без изменений.
Животные с клиническими признаками дирофиляриоза – у собак отмечается быстрая утомляемость, вялость, отдышка, кашель, бледность слизистых оболочек, нарушение сердечного ритма. Возможны сопутствующие заболевания (дерматиты, конъюнктивиты, нефрит, гепатит, поражение центральной нервной системы, сердечные аритмии). При биохимическом исследовании крови наблюдается протеинемия, повышение уровня мочевины и кератинина, амилазы, общего и прямого билирубина. Морфологические показатели крови значительно изменены, отмечается выраженная эозинофилия, лейкоцитоз, нейтрофилёз, сдвиг формулы влево, моноцитоз. При ультразвуковом исследовании органов брюшной полости визуализируют увеличение размеров печени, расширение печёночных вен, увеличение селезёнки, расширение почечных лоханок.
Животные зараженные дирофиляриозом с тяжёлыми поражениями всех органов и систем у таких животных диагностируется хроническая или острая сердечно-сосудистая недостаточность, почечная недостаточность, пиелонефрит, гепатоз, панкреатит, асцит, новообразования кожи и слизистых, поражение центральной нервной системы, парезы, судороги, пневмония, плеврит.

Клинические проявления дирофиляриоза могут отсутствовать в течение нескольких лет, в то время как диагностируется микрофиляремия. Степень проявления симптомов заболевания зависит от множества факторов: количества взрослых дирофилярии, длительности заболевания, анатомической локализации гельминтов, индивидуальной восприимчивости организма животного, вторичных поражений в органах и тканях[177]. При высокой интенсивности инвазии дирофилярии, паразитируя в сердце, вызывают расстройство кровообращения в результате механической закупорки и прогрессирующего эндокардита. Наличие гельминтов вызывает нарушение работы клапанного аппарата сердца и приводит к развитию сердечной недостаточности, происходит заметное расширение и гипертрофирофия правого сердца. Наличие большого количества паразитов приводит к эмболии, тромбозу кровеносных сосудов, а в дальнейшем - к циррозу печени. При поражении животных Dirofilaria repens у животных наблюдается поражение кожи в виде папулезного дерматита [8, 23, 24, 30, 36, 57, 73, 74, 149].

C.A. Calvert [120] считает, что у собак в 10-67% случаев имеет место "скрытый дирофиляриоз". По мнению C.H. Courtney [126] у 41% зараженных дирофиляриями собак микрофилярий не выявляются.

C.A. Rawlings [172] в своих работах описал четыре типа скрытого или латенного дирофиляриоза. К первому типу латентного дирофиляриоза относится препатентная стадия заболевания, что соответствует первым 6 месяцам после заражения. Ко второму типу латентного дирофиляриоза относится однополое заражение, в таком случае при исследовании крови микрофилярий не обнаруживают, при вскрытие таких собак обнаруживают только самок или только самцов взрослых дирофилярий. При третьм типе происходит воздействие антигельминтиков на репродуктивную функцию взрослых паразитов приводящее к их стерилизации, четвертый тип обусловлен иммуномодуляторами.

Многие исследователи [73] указывают на то, что при латентном течении дирофиляриоза, часто наблюдается биохимические изменения показателей мочевины, креатинина в сыворотке крови. Субклинические формы болезни сопровождаются поражением почек в результате повреждения клубочков микрофиляриями, поражением печени, желтушностью слизистых оболочек, повышением показателей АЛТ и АСТ, а также повышения уровня билирубина, нарушения липидного обмена.

А.И. Мазуркевич указывает, что одним из диагностических признаков дирофиляриоза может служить повышение количества эозинофилов в периферической крови [55]. C.A. Rawlings, A.K. Prestwood, B.B.Beck [173], в своих опытах, не выявили влияния D.immitis на количество эозинофилов и базофилов в крови собак. У собак, зараженных D.repens, показатели крови были на уровне показателей животных, свободных от инвазии [13].

Серебрякова Н.В. [81] отмечает, что у собак с легким течением заболевания морфологические и биохимические показатели крови практически не меняются, основные изменения выявляют при тяжелом течении дирофиляриоза. По мере развития заболевания нарастает лейкоцитоз, анемия, происходит повышение покзателей креатинина и мочевины на 27 %, снижается уровень натрия в крови. При средней и тяжелой степени тяжести заболевания усобак, пораженных D. immitis, установлены значительные биохимические изменения показателей крови и мочи, повышенние в 2-8 раз по сравнению с нормой, указывающие, на тяжелое поражение почек, печени, а также сердца и легких [111].

Гематологические исследования указывают на снижение концентрации гемоглобина, увеличение скорости оседания эритроцитов и увеличение количества лимфоцитов в крови животных, зараженных D.immitis. Биохимические исследования указывают на повышение количества билирубина, глобулинов, хлоридов, фосфора и снижение содержания альбумина в сыворотке крови собак [45, 81, 179].

Дирофиляриоз, вызываемый как взрослыми гельминтами, так и микрофиляриями D. immitis, характеризуется разными клиническими симптомами [110].

По данным C.A. Calvert, C.A. Rawlings [121] дирофиляриоз начинает проявляться у собак при наличии у них не менее 25 взрослых особей. Наличие от 25 до 60 особей D.immitis приводит к затрудненной циркуляции крови. 100 и больше паразитов приводят к закупорке легочных артерий. Не установлено взаимосвязи между степенью проявления клинических симптомов дирофиляриоза и количеством циркулирующих в крови личинок [113].

D. Katamine [143] изучал прижизненное распределение личинок D.immitis в организме собак в пробах из легочных капилляров, легочной артерии и вены, сердца, аорты, полой вены, и других крупных сосудов. D. Katamine [143] установил, что максимальной концентрация микрофилярий зафиксирована в капиллярах легких в ночное время, в сердце, легочной артерии и в коже их количество значительно меньше.

По результатам исследований крови и при микроскопическом исследовании паренхиматозных органов и тканей животных, зараженных дирофиляриозом, установлены серьезные изменения [89]. В миокарде микрофилярии встречаются как в крупных сосудах, так и в просвете капилляров. Стенки таких сосудов утолщены, просветы их сужены. В большом количестве личинки обнаруживались в просветах сосудов легочной ткани, при этом наблюдали кровоизлияния размером в одну или две альвеолы. Сосудистая сеть печени сильно гиперемирована. В просвете сосудов много погибших эритроцитов [13, 156].

В зависимости от степени проявления признаков дирофиляриоза, вызванного D. immitis, R.B. Atwell, I.B. Buoro [113] разделили собак на 3 группы. В первой группе, видимые клинических симптомов не наблюдали, но диагностировали изменения при радиографии. Во второй группе были собаки со средней степенью проявления симптомов, у собак отмечали одышку, кашель, истощение и тяжелые изменения при радиографии. В третью группу вошли собак с тяжелой степенью поражения сердечно-сосудистой системы, дыхательной системы и тяжелыми изменениями при радиографии.

При большом количестве взрослых дирофилярий, паразиты мигрируют из легочной артерии в правый желудочек, а в некоторых случаях в правое предсердие и полую вену. Это приводит к развитию "синдрома полой вены", который проявляется внутрисосудистым гемолизом и шоком [181, 185].

Рентгенологическое исследование больных собак позволяюет диагностировать увеличение размеров сердца и наблюдать за динамикой его развития. В начальных стадиях дирофиляриоза у больных животных при рентгенографии в прямой и боковой проекциях отмечаются относительно небольшие увеличения размеров сердца, но уже можно выявить выбухание тени легочной артерии; расширение легочного ствола и его крупных ветвей, расширение каудальной полой вены [46].

У некоторых собак отмечается гиперчувствительность к микрофиляриям. Часто случайная миграция паразитов приводит к их эктопичной локализации, например передняя камера глаза или соматические артерии [155, 184]. Установленны данные, относящиеся к иммунопатогенезу, такие, как роль цитокинов, и клеточных компонентов иммунитета в развитии поражений, связанных с дирофиляриозом [136]. Поражения органов характерные для кардиодирофиляриоза довольно разнообразны, наиболее важным клиническим проявлением дирофиляриоза у собак является сердечная недостаточность. При этом поражения легких являются вторичными. Гибель гельминтов может привести к тромбоэмболии и тяжелым воспалительным реакциям [189].

В первые дни после инвазирования животного наблюдаются поражения, которые, характеризуются разрывами эндотелиальных клеток, спайками и эрозиями поверхности интимы. Гельминты индуцируют физическую травму, метаболическую и иммуно-опосредованную цитотоксичность [145], а также другие подобные механизмы [178]. При поражении собак сердечными паразитами, установлено, что они заметно повышают в крови уровень эндотелина-1, медиатора, вызывающего острое сужение сосудов и хронические сосудистые изменения. Это обстоятельство способствуют развитию легочной гипертензии [187]. Увеличение количества паразитов приводит к поражению более широких артерий, которые растягиваются и становятся неэластичными, усиливая легочную гипертензию. При продолжительной болезни сердечная недостаточность развивается, как результат неспособности правого желудочка создавать и поддерживать необходимое перфузионное давление, чтобы продвигать кровь через легкие. Это обстоятельство может способствует расширению правого желудочка, ухудшая систолическую и диастолическую функцию сердца [190].

Винокурова Д.П. [30] в своих исследованиях отмечает у больных дирофиляриозом животных фибринозный эндокардит, расширение правой половины сердца, зернистую дистрофию миокарда. Венозное полнокровие и отек легких, альвеолярную эмфизему, очаговую катаральную бронхопневмонию, фибринозный плеврит. Белково-жировую и токсическую дистрофию печении цирроз. В желудке и кишечнике катаральное воспаление, метеоризм, серозный лимфаденит брыжеечных и портальных лимфоузлов. В селезенке венозное полнокровие. В почках венозную гиперемию, белковожировую дистрофию и некроз эпителия канальцев.

Салимов В.А. [79] указывает на патологоанатомические изменения при хроническом течении дирофиляриоза, вальвулярные и париетальные эндокардиты, очаговый миокардиосклероз, поражение легких, печени и почек.

Ярошенко Н.В. [106] в своих работах указывает на аналогичные патологии, обнаруженные при вскрытии собак: зернистую дистрофию печени и некрозы в печени, участки обызвествления в легком, катаральный дуоденит, инфаркты в селезенке, катаральная бронхопневмония и хронический гломерулонефрит, асцит.

Таким образом, исследования отечественных и зарубежных ученых указывают на то, что в последние годы наблюдается тенденция к распространению дирофиляриозной инвазии не только в южных районах, но и на территориях с умеренным климатом, где много рек и водоемов - мест размножения промежуточного хозяина. Отмечается быстрое распространение дирофиляриоза, вызванного D. repens, среди собак на Украине [36, 49, 74].

Как показали результаты анализа литературы, данные по патогенному воздействию дирофилярий на организм собак весьма противоречивы, повидимому это объясняется видом дирофилярий поражены животные, степенью интенсивности инвазии, состоянием организма животных и другими факторами. Поэтому нами поставлена цель, выяснить влияние дирофилярий разных видов на физиологические, клинические показатели собак, а также изучить патоморфологические изменения, происходящие в организме собак зараженных дирофиляриозом.

1.4. Диагностика дирофиляриоза

Учитывая то, что клинические признаки при дирофиляриозе собак на ранних этапах заболевания являются малоспецифическими, очень важное значение при постановке диагноза имеют лабораторные исследования проводимые для выявления в крови личинок дирофилярий или специфических для паразита антигенов. Наибольшего внимания заслуживают методы прижизненной диагностики, позволяющие предупредить распространение инвазии. При этом очень важна дифференциальная диагностика микрофилярий на видовом уровне, поскольку виды Dirofilaria immitis и D. repens обладают разной степенью патогенности по отношению к собакам.

Для выявления дирофилярий у животных используются клиниколабораторные методы диагностики: биохимическое исследование крови, общий анализ крови и специфические методы: микроскопия капли нативной крови или сыворотки, метод обогащенного мазка, ИФА и ПЦР и др.[27].

Диагностика дирофиляриоза обычно заключается в обнаружении и идентификации микрофилярии в крови различными методами. Также необходимо принимать во внимание анамнез и выраженность клинических признаков дирофиляриоза [13].

По данным D. Abraham, R.B. Grieve, J.A. Oaks [112] наибольшее количество микрофилярий в крови обнаруживают вов второй половине дня. Для лабораторного анализа с целью обнаружения личинок дирофилярий образцы периферической или венозной крови необходимо брать в вечерненочное время, лучше в теплый период года [14].

Для диагностики дирофиляриоза у собак можно использовать следующие методы:

Прямое исследование крови. Метод приемлем только в случаях, когда интенсивность инвазии микрофилярии в крови достаточно высока [13]. Недостатком такого метода по мнению многих исследователей является невозможность идентифицировать микрофилярии до вида [146].
Методы концентрации:

метод Кнотта [147, 191] с используется венозная кровь и раствор уксусной кислоты; W. L. Newton, W.H. Wright [166] предложили усовершенствованный метод Кнотта: при этом 1 мл цельной крови смешивали с 10 мл 2%-ного раствора формалина и смесь центрифугировали в течение 5 минут при 1000-1500 об. /мин. Надосадочную жидкость сливают, осадок смешивали в равных частях с раствором метиленовым синим. 1 каплю окрашенного осадка помещали на предметное стекло, накрывали покровным и исследовали под микроскопом. Данный метод имеет ряд преимуществ перед другими: все микрофилярии концентрируются в небольшом объеме осадка, состоящего, в основном, из лейкоцитов и разрушенных гемолизированных эритроцитов. Это особенно важно при установлении заражения дирофиляриями при слабой инвазии.
метод с использованием 1 мл 2% раствора сапонина [119];
метод выявления микрофилярии с применением гематокрита [183]; при данном методе кровь помещают в стандартные микрогематокритные пробирки и центрифугируют в течение 5 минут при 8500 об. /мин. После центрифугирования капиллярные трубки помещают горизонтально на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Микрофилярии совершают активные волнообразные движения. При применении данного метода можно исследовать маленький объем крови, но невозможно дифференцировать микрофилярий по видам.

Метод фильтрации предложен J.P.Wylie [196]. Через миллипоровые фильтры в шприц набирают 1 мл крови, смешивают с гепарином и добавляют 10 мл лизированного раствора. Полученный лизированный кровяной раствор из шприца пропускают через миллипоровый фильтр. Затем через фильтр медленно пропускают 5-10 мл раствора толуидинового синего. Далее фильтр промывают 10 мл воды, отсоединяют от держателя и исследуют под микроскопом. Окрашенные микрофилярии можно дифференциировать. Этот метод не требует использования центрифуги.
Метод количественной диагностики [13, 154] кровь смешивают в шприце с гепарином. Делают 3 мазка, высушивают их и окрашивают красителем Гимза. При обнаружении в мазке в среднем, менее 1 микрофилярий, то считают, что в 1 мл цельной крови меньше 50 микрофилярий, данный метод позволяет не только обнаружить паразитов, но и оценить ее интенсивность инвазии. J.J. Mines [164] H.M. Gordon, H.V. Whitlock [155]. предложили использовать для подсчета микрофилярий в крови специальную камеру. При этом 0,5 мл цельной крови лизируют добавлением 7 мл 0,04%-ного раствора гидрооксида аммония. Специальную камеру заполняют кровью и исследуют под микроскопом, производят подсчет микрофилярий. Количество подсчитанных микрофилярий умножают на 100 и получают число микрофилярий в 1 мл крови.

Перспективным методом является клонирование фрагментов генома дирофилярий, данный метод является высокочувствительным и специфичным методом диагностики может применяться для идентификации взрослых особей гельминтов, а также микрофилярий в крови окончательных хозяев и личинок в переносчиках. Человека, болеющего дирофиляриозом, в крови отмечается высокий уровень Ig G [128, 188].

Поскольку виды дирофилярий обладают разной степенью патогенности по отношению к собакам, очень важна дифференциальная диагностика микрофилярий на видовом уровне.

При изучении морфологию микрофилярий с использованием специального окрашивания и ультрафиолетового микроскопирования A.E.R. Taylor [186] и установила следующие различия характерные для D. immitis и D. repens в мкм соответственно: длина - 260±5 и 290±10; ширина - 4,5 и 6,0; расстояние от головного конца тела до: нервного кольца - 20 и 23; экскреторной поры - 30 и 30; вэкскреторной клетки - 40 и 33; анальной поры - 74 и 70.

Микрофилярии разных видов имеют разные места окрашивания энзимных клеток в результате нафтол AS-TR-фосфатной реакции. Активность кислой фосфатазы у двух видов филярий различна: у микрофилярий D. immitis четко окрашиваются энзимные клетки в области экскреторной и анальной пор, тогда как у микрофилярий D. repens четко окрашиваются энзимные клетки только в области анальной поры. L. Chalifoux и R.D. Hunt [124] использовали дааный метод для дифференциации микрофилярий.

М.А. Peribanez [170] одним из первых предложил использовать для дифференциации микрофилярий D. immitis и D. repens коммерческий тест «Leucognost-SP».

Многие авторы, такие как G. Favia [130], Ю.Г. Бескровная, C.A. Нагорный [18] предлагают дифференцировать D. immitis и D. repens, используя полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Наиболее часто диагноз дирофиляриоза у собак устанавливают лабораторными методами по наличию микрофилярий в крови. Серьезным препятствием для постановки такого диагноза является «скрытое или латентное» течение заболевания, т.е. без циркулирующих в крови микрофилярий, по данным разных исследователей, у 25 - 35% собак, возможно, такое течение дирофиляриоза. «Латентная» инвазия может быть связана с препатентной стадией паразита, гельминтами одного пола, крайне низкой микрофиляриемией, проводимой микрофилярицидной терапией и др. причинами [108, 172]. В таких случаях дирофиляриоз, возможно, выявить только иммунологическими методами.

Иммунологическую тест-систему, позволяющую выявлять антитела, вырабатываемые в организме собаки в ответ на заражение дирофиляриями, предложил К.Н. Kato [144]. Этот метод основан на определении антител к паразиту, он позволяет диагностировать заболевание, как в явной, так и в латентной форме. Однако низкие титры антител к дирофиляриям, наблюдающиеся во многих случаях «латентной» инвазии, ограничивают диагностические возможности этого метода [180]. Кроме этого, выявлены перекрестные реакции с антителами других видов нематод (токсокар, трихоцефал и др.), паразитирующих у собак, это повышает количество ложноположительных результатов [134, 197].

G.J. Weil [193] указал на возможность диагностики дирофиляриоза вызываемого D. immitis по присутствию специфических антигенов этого паразита в циркулирующей крови. G.J. Weil разработал и запатентовал иммунологическуютест-система [194], которая выпускается под коммерческим названием MALLINCKRODT Inc., Нью-Йорк.

В настоящее время для диагностики дирофиляриоза собак в основном используют тесты, которые позволяют определять циркулирующие в крови антигены, выделяемые взрослыми самками гельминтов, но заболевание выявляется непостоянно только в тех случаях, когда в организме животных обитает от трех и более самок, возраст которых старше 7 месяцев. Наборы, основанные на определении антигенов с помощью тестов иммунохроматографии, ELISA, гемагглютинации, применяют для диагностики дтрофиляриоза. Сравнение эффективности всех трех вышеперичисленных диагностических тестов с использованием 108 положительных и 100 отрицательных исследований на D. immitis проб сывороток собак показало, что чувствительность и специфичность данных наборов были очень высокими, а статистические различия между тестами отсутствовали [161].

Для диагностики часто необходимы инструментальные методы исследования (электрокардиография, эхокардиография, рентгенография грудной клетки), данные методы позволяют косвенно диагностировать заболевание по изменениям внутренних органов [182, 195]. При использовании этих методов

оценивают изменения в легочных артериях (расширение) легких (инфильтрация), сердце (кардиомегалия, расширение правого желудочка и предсердия), наблюдают плевральный выпот или асцит [46, 76, 181].

Диагноз дирофиляриоз иногда устанавливают на операционном столе, когда живой гельминт обнаруживается в операционной ране или выделяется хирургом из пораженного узла, гранулемы, новообразования вскрытии полости.

Извлеченный гельминт часто локализуется в соединительнотканной капсуле. Гистологическое строение стенки такой капсулы характерно для хронического воспалительного процесса [95]. В некоторых случаях капсула не образуется и паразит свободно располагается в полости [94].

J.P.Wylie [196] провел сравнение эффективности четырех диагностических тестов, прямого влажного мазка, модифицированного метода Кнотта, метода концентрации и капиллярной седиментации, установлена наибольшая точность модифицированного метода Кнотта и метода фильтрации. На исследование 1 пробы крови при использовании метода концентрации затрачивалось 6 минут, метода фильтрации меньше 1 минуты.

A.D. Watson, F.L.Testoni, W.L.Porges [191] сравненили микрофилярий, выявленных методом Кнотта и методом фильтрации. По результатам опытом авторами установлено, что при использовании для дигностики метода фильтрации микрофилярий становятся значительно короче.

При исследовании методом мембранной фильтрации выявляемость зараженных дирофиляриозом собак возрастает в 1,5-3 раза по сравнению с результатами обследования методом толстой капли, такие данные получили в своих исследованиях R.S. Desowitz, B.A. Southgate [139].

По данным J.D. Kelly [146], после изучения эффективности разных методов диагностики дирофиляриоза собак, что наиболее успешными являются усовершенствованный метод Кнотта и метод фильтрации.

E.T. Carlos, L.L. Magaway, F.T.Calalay [123] сравнили эффективность метода Ohishi и модифицированного метода Кнотта при исследовании 600 собак. Важным преимуществом метода Ohishi является вязкая структура седимента, не позволяющая ему растекаться по предметному стеклу, и более темная окраска микрофилярий.

Для медицинской практики В.Г. Супряга и А.И. Андреенков [92] предложили методику, с помощью которой микрофилярий обнаруживают на окрашенных ультрафильтрах, через которые пропускают под вакуумом гемолизированную кровь.

D.J. Lahitte, B. Davoust, P. Dorchies [151] рекомендуют при диагностике дирофиляриоза использовать методы центрифугирования и фильтрации. Данные авторы провели сравнительное изучение 5 методов обнаружения микрофилярий в крови собак: с помощью фиксированного мазка, толстой капли, раздавленной капли, центрифугированием крови и ее фильтрацией. В 33, 49, 49, 75 и 75 случаях соответственно находили микрофилярий.

С.В. Величко [28] считает наиболее результативными методами диагностики дирофиляриоза модифицированный метод Кнотта и метод обогащенного мазка.

Анализ литературы показал, что для диагностики дирофиляриоза собак предложен много эффективных методов, основанных, в основном, на исследовании проб периферической крови. В связи с этим возникла необходимость изучить и освоить эти методы для эффективной диагностики дирофиляриоза.

1.5 Профилактика и лечение дирофиляриоза

Профилактика дирофиляриоза собак, проводится с учетом биологии паразитов и эпизоотологических особенностей гельминтозов с использованием препаратов, действующих как на взрослые так и на личиночные стадии гельминтов, с целью разрыва цикла развития паразита.

J.N. Aubrey [114] против развивающихся стадий дирофилярий применял диэтилкарбамазин в дозе 20 мг на 1 кг массы тела собак 3 дня подряд каждые 2 месяца и добился положительных результатов. Через 6 месяцев после проведенного лечения в крови собак микрофилярий D.immitis не обнаружили.

Диэтилкарбамазин рекомендует применять S. Kume [149] в дозе 2,5 мг/кг ежедневно в течение 60 днейт для профилактической обработки собак против развивающихся стадий D.immitis с июня по март, используя

диэтилкарбамазина цитрат.

J.W. McCall и H.H. Crouthamel [162] на экспериментально зараженных собаках, инвазионные личиноки D.immitis вводили собакам подкожного, применяли мебендазол в дозе 40 или 80 мг/кг в день в течение 30 дней и в своих опытах получили 100%-ный эффект против микрофилярий.

Фентион в форме 20%-ного раствора в дозе 30 мг/кг наносили на кожу собакам, зараженным D.immitis. T. Sakamoto и др. [175] и установили его микрофилярицидное действие. Через 3, 6 и 9 дней после применения препарата количество микрофилярий в крови леченых собак снизилось соответственно до 42,2; 31,9 и 23,7%.

Эффективность препаратов авермектина против личинок D.immitis у собак впервые установили W.C. Campbell, L.S. Blair [122].

L.S. Blair, P.F. Malatesta, D.V. Ewanciw [117] на спонтанно зараженных D.immitis собаках испытали ивермектин в разных дозах. После введения ивермектина в дозе 0,2; 0,05 и 0,0125 мг/кг., не обнаруживали микрофилярий в крови собак через 21 день. Кроме этого ивермектин в дозе 0,006 мг/кг показал эффективность против неполовозрелых дирофилярий через 1,5-2 мес. после экспериментального заражения собак [169].

По исследованиям I. Ohishi [167] для того, чтобы недопустить развитие

дирофилярий в организме собак инвазионные личинки необходимо уничтожить до того момента, как они мигрируют в сердце. Ивермектин в дозе 6 мкг/кг был малоэффективен против инвазионных личинок D.immitis при введении сразу после экспериментального заражения и эффективен против ранних и поздних личинок 4 и 5-й стадий (до 2-х мес.). Также установлена различная чувствительность личинок дирофилярий к действию ивермектина. Чувствительность инвазионных личинок (L3) сразу после экспериментального заражения, личинок поздней L4 и ранней L5 стадии (60 дней после заражения) и личинок 4-й стадии (30 дней после заражения) к действию ивермектина можно оценить, как соответственно слабую, высокую и очень высокую. Исследования показали, что ивермектин более эффективен против развивающихся самок дирофилярий, чем самцов.

Применение препаратов ивермектина в дозе 6 мкг/кг 4 –х кратно с интервалом один месяц собакам за 17 и 7 дней до и на 5 день после экспериментального заражения собак дирофиляриями, установлена 100%-ная эффективность против развивающихся стадий D.immitis [67].

Многие отечественные ученые проводили изучение методов профилактики дирофиляриоза собак с применением ивермека на животных разного возраста, свободных от дирофилярий по результатам предварительных исследований проб крови. Продолжительность действия ивермектина составляет 1-1,5 месяца, была испытана схема применения ивермектина в весеннее-осенний период с интервалом в 1,5 месяца. Первый раз ивермек вводили 20 собакам, свободным от дирофиляриоза, подкожно в дозе 6 мкг/кг перед началом активности комаров - промежуточных хозяев дирофилярий. Далее ивермектин применяли в этой же дозе в течение всего периода активности комаров с интервалом 1,5 месяца, и последний раз вводили препарат через месяц после окончания лёта комаров.

Контрольная группа -20 собак препарат не получали. Кровь собак обеих групп исследовали на наличие микрофилярии через 8 месяцев после окончания лета комаров [13, 14]. Результаты опыта свидетельствовали об отсутствии зараженных собак в подопытной группе, получавшей препарат. В контрольной группе в мае последующего года в крови двух из 20 собак обнаружили микрофилярии, что указывает на их заражение в летний период предыдущего года. Таким образом, ивермектин оказался эффективным средством для профилактики дирофиляриоза собак, применение ивермектина в период активности комаров, позволило предотвратить заражение собак и дальнейшее распространение дирофиляриоза. Применение ивермектина эффективно перед началом периода активности комаров, затем с интервалом в 1,5 месяца до окончания периода лёта комаров и последний раз спустя 1-1,5 месяца [14].

Ястреб В.Б. [111] рекомендует для макрофилярицидной терапии

дирофиляриоза абиктин 1 раз в месяц в дозе 0,05 мг/кг в течение года.

Применение меларсомина, по его мнению, вызывает сильную интоксикацию, что требует неотложной и реанимационной помощи и интенсивной терапии в стационарных условиях клиники.

Ярошенко Н.В. [106] предлагает для лечения дирофиляриоза сочетание левамизола с иммунопаразитаном. Серябрякова Н.В. [81] для лечения дирофиляриоза использовала ивермектин 0,2 мкг/кг веса животного 1 раз в неделю, фраксипарин 500 ЕД/кг веса животного один раз в день и каптоприл в дозе 25 мг/кг массы тела 3 раза в день.

Профилактическая эффективность мильбемицина против личинок D.immitis установлена T. Sakamoto [176]. Мильбемицин, заданный собакам в дозе 5 мг/кг, 20 раз с 15-дневным интервалом полностью защищал собак от заражения D.immitis.

Применение мильбемицина оксима в дозе 0,5 мг/кг с интервалом в 1 месяц, начиная с 60 дня после экспериментального заражения D.immitis, в течении продолжительного периода, полностью предотвращало развитие дирофилярий в организме собак [138].

C. Genchi [139] предложил с целью профилактики дирофиляриоза, вызванного D. repens, применять селамектин в дозе 6 мг/кг один раз в мес. У собак, обработанных селамектином, не обнаружили развитие дирофиляриоза.

Селамектин накожно в виде капель на холку, примененный в дозе 3 и 6 мг/кг на 30 или 60-й дни после экспериментального заражения собак D. immitis, губительно действовал на развивающиеся стадии дирофилярий. При вскрытии животных через 140-199 дней после экспериментального заражения взрослых дирофилярий у собак не обнаруживали. У контрольных животных, не обработанных селамектином находили, в среднем, по 18,7 экз. D.immitis [163]. Аналогичные результаты получены D.E. Jacobs [140].

R.G. Clemence, P. Sarasola, C. Genchi [125] применяли селамектин и ивермектин на различных группах собак в дозах соответственно 6 мг/кг накожно и 6 мкг/кг перорально с месячным интервалом в период с мая по ноябрь. Через 180 и 300 дней после первой дачи препаратов микрофилярий в крови и взрослых дирофилярий в сердце при вскрытии не находили.

Моксидектин в форме раствора при подкожном введении в дозах 0,17 и 0,5 мг/кг предохранял собак от заражения дирофиляриями при их эксперементальном заражении D.immitis в течение 180 дней после применения препарата [158].

При однократном подкожном применении моксидектина в дозе 0,17 мг/кг собакам, спонтанно инвазированным D.immitis, в течение 11-12 месяцев в крови этих собак микрофилярий D.immitis не обнаруживали [133].

Для лечения взрослых форм дирофиляриоза в Японии разработан и успешно применяется метод механического удаления паразита с применением гибких щипцов.

В настоящее время существует два препарата против взрослых форм дирофиляриоза. Оба препарата — соединения мышьяка: тиацетарсамид натрия (капорсолат «Мериал») и меларсомина дигидрохлорид (иммитицид «Мериал»).

Испытания тиацетарсамида и меларсомина при дирофиляриозе собак проводил J.P. Raynaud [171]. Данные препараты испытывали при разной степени зараженности собак. В предварительном опыте на экспериментально зараженных собаках меларсомин испытан в дозе 2,5 мг/кг двукратно через 24 часа при внутримышечном введении. Меларсомин эффективен как против взрослых, так и личинок 5-й стадии. Тиацетарсамид оказывает губительное действие только на взрослые дирофилярий, начиная с 7 месяцев. Применение меларсомина целесообразно проводить в дозе 2,2 мг/кг дважды с интервалом 3 часа

2 раза в год в середине августа и январе для предотвращения дирофиляриоза.

J.W. McCall, M.T. Dzimianski, T.L. McTier [160] предложили программы применения меларсомина гидрохлорида при дирофиляриозе собак. Стратегическая программа предусматривает применение меларсомина 3 раза в год с интервалом 4 месяца независимо от сезона активности комаров. Тактическая программа применения меларсомина включает 2 обработки с интервалом 4 месяца. Первый раз меларсомин применяют в середине периода активности комаров, т.е. в августе, второй - в конце периода активности промежуточных хозяев, т.е. в декабре. При этом меларсомин вводится внутримышечно в поясничную мышцу в дозе 2,2 мг/кг 2-х кратно с интервалом 3 часа. Применение меларсомина по первой (стратегической) программе показало 99-процентную эффективность. При вскрытии 15 леченых собак только у одной обнаружили одну самку D.immitis. 13 из 14 собак (93%) контрольной группы заразились дирофиляриями с интенсивностью инвазии 6,8; 5,4 и 25,2 экз. соответственно в штатах Джорджия, Флорида и Луизиана. Вторая (тактическая) схема применения меларсомина показала 100-процентную эффективность.

Терапию с использованием в качестве микрофилярицида дорамектина и макрофилярицида меларсомина против D.repens у собак предложили G. Baneth [116]. Через 90 дней после терапии микрофилярий D.repens в крови не находили. При вскрытии обработанных собак взрослых дирофилярий не обнаруживали.

Таким образом, профилактика дирофиляриоза собак основана на применении различных микрофилярицидных препаратов в теплый период года с различным интервалом. В условиях нашей республики специальных работ по профилактике дирофиляриоза собак не проводилось. В связи с этим нами предпринята попытка разработать оптимальную схему профилактики этого заболевания в условиях республики Башкортостан, а именно на базе Уфимской школы по подготовке специалистов-кинологов МВД Российской

Федерации.

2СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1Материал и методы исследования

Работа проводилась на кафедре морфологии, патологии, фармации и незаразных болезней федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный аграрный университет» и в федеральном государственном казенном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования «Уфимская школа по подготовке специалистов-кинологов Министерства внутренних дел Российской Федерации» в 2003-2013 годах. Дирофиляриоз - заболевание, вызываемое паразитированием нематод из рода Dirofilaria в организме животных и человека. В нашей работе мы с помощью клинических, инструментальных и лабораторных методов исследовали и лечили служебных собак поступавших в Уфимскую ШПСК МВД России.

Нами было обследовано 650 служебных собак, прибывших в школу для обучения из двадцати регионов России. При поступлении собак в кинологическую школу проводили тщательно клиническое исследование животных. При этом особое внимание обращали на возраст, породу, условия содержания, регион из которого прибыла собака, длительность пребывания по постоянному месту службы, перемещения собак в другие регионы, наличие клинических признаков, результаты проведенных ранее исследований на дирофиляриоз.

Особенностью нашей работы, в отличие от других исследований, выполненных на базе ветеринарных клиник, когда диагноз «дирофиляриоз» устанавливался только при появлении клинической симптоматики у домашних собак, заключалась в том, что мы обследовали всех собак, независимо от наличия или отсутствия симптомов дирофиляриоза, что позволило выявлять бессимптомное носительство дирофилярий в популяции собак.

Для лабораторной диагностики дирофиляриоза использовали следующие методы: метод обогащения по Кнотту, метод фильтрации, в нативной сыворотке, мазок крови.

Метод обогащения по Кнотту выполняли следующим образом: 1-2 мл венозной крови смешивали в пробирке с 10 мл 2% раствора формалина, центрифугировали 5 минут при 1 тысяч об/мин. Надосадочную жидкость сливали, небольшую каплю ресуспендированного осадка помещали на предметное стекло, накрывали покровным стеклом и микроскопировали при малом увеличении микроскопа в 40-100 раз при опущенном конденсоре. Результат: микрофилярии погибшие, прямолинейно вытянуты, с хорошо различимыми внутренней структурой, головным и хвостовым концами, ширина примерно равна диаметру лейкоцита (рисунок 1).

Рисунок 1 Метод обогащения Кнотта. Видны погибшие овально вытянутые в длину микрофилярии. Ширина их примерно равна диаметру лейкоцитов, расположенных рядом. Увеличение в 400 раз (ок.10*объект. 40)

Метод обнаружения микрофилярий в нативной сыворотке выполняли следующим образом: несколько миллилитров венозной крови помещали в чистую пробирку или пробирку с активатором свертывания, центрифугировали 5-10 минут при 1,5-2,7 тысяч об/мин. Пипеткой аспирировали несколько капель сыворотки на границе со сгустком с захватом верхнего слоя эритроцитов, помещали на предметное стекло, накрывали покровным стеклом, микроскопировали при малом увеличении в 40-100 раз при опущенном конденсоре. Результат: живые микрофилярии, хорошо заметны по активному движению (рисунок 2).

Рисунок 2 Микрофилярия в нативной сыворотке. Увеличение в 100 раз

(окуляр 10*объектив 10)

Метод фильтрации требует применения специальных миллипоровых фильтров. В шприце 1 мл крови смешивали с гепарином и добавляли 10 мл лизированного раствора. Полученный раствор с помощью шприца пропускали через миллипоровый фильтр. Затем через фильтр пропускали 510 мл раствора метиленового синего. Далее фильтр промывали, отсоединяли от держателя и исследовали под микроскопом. Окрашенные микрофилярии можно дифференцировать. Преимущество данного метода в том, что он не требует использования центрифуги.

Для приготовления мазков крови на предметной стекло пипеткой или гематокритным капилляром наносили небольшую каплю крови, затем шлифовальным стеклом или специальным шпателем делали мазок. Фиксацию и окрашивание мазков проводилось с использованием наборов для быстрого окрашивания мазков крови «Лейкодиф 200», который содержит фиксирующий раствор – метанол, первый окрашивающий раствор - эозин, второй окрашивающий раствор - азур и буферный раствор. Окрашенные мазки высушивали и подвергали микроскопии при большом иммерсионном увеличении (рисунок 3).

Для видовой дифференциации обнаруженных микрофилярий D. immitis от D. repens, использовали следующие методы: окраску на кислую фосфатазу; иммунохроматографию (экспресс-тесты); окраску по Романовскому-Гимзе. При отсутствии микрофилярий (что не исключает наличия микрофилярий в небольшом количестве или наличия имаго, не определяемых обычными методами) использовали иммунохроматографию (экспресс-тесты).

Для дифференциации D. immitis от D. repens использовали метод окрашивания на кислую фосфотазу, для этого используется набор для цитохимического окрашивания препаратов красного костного мозга на кислую фосфатазу «ДиахимЦитоСтейн-КФ».

Рисунок 3 Микрофилярия в о крашенном мазке крови. Увеличение в 1000 раз (ок. 10*объектив 100)

Для этого в пробирку с 10 мл дистиллированной воды добавить несколько капель сыворотки, перемешать, центрифугировать 5 мин. при 1-1,5 тысяч об/мин, надосадочную жидкость слить, ресуспендированный осадок поместить на предметное стекло, высушить (или микроскопировать), зафиксировать в парах формалина 30 сек, окрасить, следуя инструкции к набору для окрашивания. Результат: тело личинки окрашивается в желтый или слегка розоватый цвет, скопления фермента окрашиваются в ярко оранжево-красный цвет у личинок D. immitis в области анальной и экскреторной пор, у личинок D. repens только в области анальной поры, у личинок D. reconditum оранжевое окрашивание диффузно распределено каудальнее экскреторной поры. Следует отметить, что локализация кислой фосфатазы наиболее стабильна в личинках, выделенных из комаров. У личинок, циркулирующих в крови окончательных хозяев, его распределение зависит от степени зрелости паразита (рисунки 4, 5).

Рисунок 4 Микрофилярия D. immitis, окрашенная на кислую фосфатазу. Скопления фермента окрашиваются в ярко оранжево-красный цвет в области анальной и экскреторной пор. Увеличение в 200раз (окуляр10*объектив 20).

Рисунок 5 Микрофилярия D. repens окрашенная на кислую фосфатазу. Скопления фермента окрашиваются в ярко оранжевый цвет только в области анальной поры. Ув. 200.

При окрашивании на кислую фосфатазу - тело личинки окрашивается в желтый или слегка розоватый цвет, скопления фермента окрашиваются в ярко оранжево-красный цвет у личинок D. immitis в области анальной и экскреторной пор, у личинок D. repens только в области анальной поры, у личинок Dipetalonema reconditum оранжевое окрашивание диффузно распределено каудальнее экскреторной поры, в наших исследованиях D. reconditum обнаружены не были.

Во всех случаях для дифференциации D. immitis от D. repens использовали одношаговый экспресс-тест для выявления сердечных гельминтов дирофилярий (Dirofilaria immitis) методом иммунохроматографии (рисунок 6).

В наших исследованиях мы использовали бесприборные экспресстесты для диагностики зараженности собак Dirofilaria immitis производства Dignostica Fennica (Финляндия) и VetExpert-BioNote Inc. (Южная Корея).

Данный метод является наиболее быстрым и точным для выявления

Dirofilaria immitis, специфичность и точность составляет 100%.

Принцип действия иммунохроматографических тестов основан на иммунной реакции «антиген-антитело». Для исследования использовалась сыворотка исследуемых собак, в соответствии с инструкцией сыворотка в количестве 2-х капель вносилась в лунку теста, оценка результата проводилась через 5-10 минут. Появление на мембране (в окне результатов двух окрашенных полосок указывало на положительный результат, т.е. обнаружение в сыворотке антигена Dirofilaria immitis.

Гематологические исследования проводились с помощью общепринятых методов: подсчет лейкоцитарной формулы проводили по окрашенному мазку крови, подсчитывали не менее 200 клеток; подсчет эритроцитов и лейкоцитов проводили в камере Горяева, гематокрит измеряли с помощью гематокритного капилляра после центрифугирования.

Рисунок 6 Результаты проведения иммунохроматографии (экспресс-тесты) для дифференциации личинок D. immitis и D. repens.

Биохимические исследования крови собак проводились с использованием полуавтоматических анализаторов «ROKI» и «Mindray» и реактивов для биохимических исследований производства «Ольвекс диагностикум».

Видовая принадлежность микрофилярий определялась по морфологическим признакам: головной конец микрофилярий без чехлика, передний конец их тупой, задний заостренный, нитевидный, длина микрофилярий 0,16 - 0,29 мм, ширина 0,005 - 0,007 мм (примерно равна диаметру лейкоцита), взрослых гельминтов: D. immitis - длинные нематоды светло-желтого цвета, слегка утончающиеся к концам. Длина тела самца 120 180мм, максимальная ширина 1,1-1,3мм. Длина тела самки 250-300мм, максимальная ширина 0,75-1,5мм. хвостовой конец закруглен. D.repens - самки имеют длину тела 135-150мм, тело сужено к концам, длина тела самец 50-58мм, максимальная ширина 0,4мм.

С целью патоморфологического исследования проводили вскрытие 118 трупов собак поступающих из школы кинологов, а также собак, павших от разных причин и поступавших в «Консультационно-диагностический центр ветеринарной медицины» Башкирского ГАУ. При этом учитывали не только наличие дирофилярий, их количество, величину, локализацию в сердце, но и изучали патологию других органов и тканей животных. В необходимых случаях проводили патогистологическое исследование. Гистологическую обработку материала проводили по общепринятым методам согласно методическому руководству «Морфологические исследования в ветеринарных лабораториях» (МСХ РФ, Москва, 2003). Кусочки толщиной не более 0,5 мм фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина, жидкости Карнуа. Затем кусочки обезвоживали и заливали в парафин. С помощью роторного микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм и после депарафинации окрашивали их гематоксилином и эозином. Срезы, полученные на замораживающем микротоме окрашивали гематоксилином и эозином, а для выявления нейтральных жиров окрашивали суданом III.

Данная терапия не проводилась.

Для уничтожения личинок проводилась микрофилярицидная терапия – уничтожение личинок проводится с целью устранения повреждающего действия микрофилярий на органы и ткани организма и недопущения заражения других собак.

Микрофилярицидное действие препаратов изучали на собаках, спонтанно зараженных дирофиляриозом условно распределенных на 3 группы по 20 животных в каждой. В первой группе применяли препараты ивермектина (отодектин, ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного. Ивермектин применяли в форме 1%-го раствора для собак крупных пород («Ивермек») и в форме 0,1%-го раствора («Отодектин») для собак мелких и средних пород, подкожно область холки с соблюдением правил асептики и антисептики. Ивермектин, входящий в состав этих препаратов, обладает выраженным противопаразитарным действием на личиночные и половозрелые фазы развития нематод желудочно-кишечного тракта и легких, личинки подкожных, носоглоточных, желудочных оводов, вшей, кровососок и саркоптоидных клещей, усиливает выработку нейромедиатора торможения – гамма-аминомаслянной кислоты, что приводит к нарушению передачи нервных импульсов, параличу и гибели паразита. После парентерального введения препарата ивермектин быстро всасывается из места инъекции и распределяется в органах и тканях животного, обеспечивая паразитоцидное действие в течение 10-14 дней. Выводится из организма с мочой и желчью, у лактирующих животных также с молоком. По степени воздействия на организм, согласно ГОСТ 12.1.007-76, Ивермек относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности), действующее вещество (ивермектин) — относится к чрезвычайно опасным веществам (1 класс опасности). В рекомендуемых дозах препарат не оказывает эмбриотоксического, тератогенного и мутагенного действия. Во внешней среде быстро разрушается.

Во второй группе применяли препараты мильбемицина

(«Мильбемакс») в дозе 2,0 мг/кг орально. Мильбемицин применяли орально в виде таблеток мильбемакса содержащих 16 мг мильбемицина оксима и 40 мг празиквантела. Мильбемицина оксим, входящий в состав препарата, относится к группе макроциклических лактонов, выделяемых в результате ферментативной деятельности Streptomyces hygroscopkus var. aureolacrimosus, активен в отношении личинок и имаго нематод, паразитирующих в желудочно-кишечном тракте собак, а также личинок нематоды Dirofilaria immitis. Механизм действия мильбемицина обусловлен повышением проницаемости клеточных мембран для ионов хлора (CI), что приводит к сверхполяризации мембран клеток нервной и мышечной ткани, параличу и гибели паразита. Максимальная концентрация мильбемицина оксима в плазме крови собак достигается в течение 2-4 часа, биодоступность составляет около 80 %. Из организма соединение выводится в основном в неизмененном виде. Празиквантел является ацилированным производным пиразин-изохинолина, обладает выраженным действием против цестод и нематод. Повышая проницаемость клеточных мембран паразита для ионов кальция (Са2+), вызывает деполяризацию мембран, сокращение мускулатуры и разрушение тегумента, что приводит к гибели паразита и способствует его выведению из организма животного. Максимальная концентрация празиквантела в плазме крови собак достигается через 1-4 часа. Соединение подвергается быстрой и практически полной биотрансформации в печени. Выводится из организма в течение 2 суток в основном с мочой. Мильбемакс таблетки для собак по степени воздействия на организм относятся к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76), в рекомендуемых дозах не оказывают сенсибилизирующего, эмбриотоксического и тератогенного действия, токсичны для рыб и других гидробионтов.

В третьей группе применяли препараты селамектина («Стронгхолд») дозе 6,0 мг/кг наружно в виде капель на холку. Селамектин применяли в виде раствора для наружного применения с содержанием 6% или 12 % селамектина (капли на холку). Противопаразитарный препарат широкого спектра действия. Селамектин обладает широким спектром системного нематодоцидного, инсектицидного и акарицидного действия, активен в отношении нематод, насекомых и саркоптоидных клещей, паразитирующих на собаках и кошках. Обладает ларвицидными и овоцидными свойствами. Фармакокинетические свойства Стронгхолда обеспечивают хорошее всасывание селамектина с места нанесения, длительное сохранение в терапевтических концентрациях в органах и тканях животного, что обеспечивает уничтожение паразитов и защиту животных от реинвазии в течение месяца. Механизм действия лекарственного средства заключается в способности селамектина, связываться с рецепторами клеток (мышечной и нервной ткани) паразитов, увеличивать проницаемость мембран для ионов хлора, что приводит к блокаде проводимости нервных и мышечных клеток нематод и членистоногих, их параличу и гибели.

В рекомендуемых дозах Стронгхолд безопасен для собак и кошек благодаря тому, что у млекопитающих эти рецепторы локализованы только в ЦНС, а селамектин не проникает через ГЭБ. Хорошо переносится кошками и собаками разных пород (включая колли и их помеси). Стронгхолд по степени воздействия на организм относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76): ЛД₅₀селамектина для мышей при введении в желудок составляет 1600 мг/кг, в рекомендуемых и 10-кратных терапевтических дозах не обладает местно-раздражающим, резорбтивнотоксическим и сенсибилизирующим действием. Учет эффективности препаратов проводили путем исследования проб крови до применения препарата и через 24 часа и 48 часов, далее через 7, 14, 21, 28 суток после применения препарата. Кровь исследовали методом обогащения по Кнотту.

Полученные количественные показатели подвергали статистической обработке в соответствие с ГОСТ 11.004-74. Рассчитывали среднюю арифметическую изученных нами показателей, среднее квадратичное отклонение средней арифметической. Достоверность наблюдаемых различий определяли по критерию Стьюдента. Микрофотографирование проводили с помощью микроскопа и цифровой фотокамеры Nicon Cool Pix 4500.

2.2Результаты собственных исследований

2.2.1Распространение дирофиляриоза у собак

За период 2009-2011 г.г. нами было обследовано (выявление микрофилярий методом Кнотта) 650 служебных собак прибывших в школу для обучения из 20-ти регионов России. Результаты представлены в таблице 1.

Среди них выявлено 106 собак зараженных дирофиляриозом (16,3 %).

При обследовании животных учитывался возраст, наличие клинических признаков заболеваний сердечно-сосудистой, дыхательной и других систем, результаты ранее проведенных исследований на дирофиляриоз, регион из которого прибыла собака, длительность пребывания по постоянному месту службы, перемещения собак в регионы в которых дирофиляриоз собак регистрируется очень часто (Ростовская область, Краснодарский край, Республики Кавказа).

Таблица 1 Инвазированность собак дирофиляриозом

Годы	Всего обследовано, животных	Выявлено инвазированных, животных	Экстенсивность инвазии (%)
2009	257	44	17,1
2010	226	35	15,5
2011	167	27	16,2
Всего	650	106	16,3

Результаты лабораторных исследований крови собак, представленные в таблице 1, свидетельствуют о том, что в первый год обследования инвазированность собак дирофиляриозом достигала 17,1%. В последующие годы выявлено снижение количества выявленных зараженных собак. Снижение заболеваемости можно объяснить тем, что это заболевание стали диагностировать, лечить и профилактировать. В комплектующие органы МВД были направлены сведения о зараженных собаках и конкретные рекомендации по организации профилактических мероприятий. С этого времени в подразделениях министерства внутренних дел стали проводиться целенаправленные ветеринарные мероприятия по борьбе с этим опасным заболеванием. В дальнейшем экстенсивность инвазии стабилизировалась, но осталась на достаточно высоком уровне. Практически каждая шестая служебная собака структур Министерства внутренних дел инвазирована.

По результатам наших наблюдений экстенсивность инвазии служебных собак по породам распределяется относительно равномерно (таблица 2). Несколько большее количество инвазированных собак выявляется среди немецких овчарок, что связано с преобладанием данной породы среди служебных собак.

Таблица 2 Инвазированность служебных собак разных пород

Порода	Количество обследованных животных	Выявлено зараженных животных	Экстенсивность инвазии %
Немецкая овчарка	450	70	15,6
Лабрадор-ретривер	70	14	20,0
Восточноевропейская овчарка	52	9	17,3
Русский спаниель	40	7	17,5
Ротвейлер	20	3	15,0
Бельгийская овчарка	12	2	16,7
Другие породы	6	1	16,7
Всего	650	106	16,3

В связи с тем, что возраст почти всех обследованных собак от 1 года до 3 лет, не проводились исследования по выявлению инвазированности в зависимости от возраста, также не проводились исследования в зависимости от пола.

Для видовой дифференциальной диагностики использовали антигенный тест, с помощью которого выявляли D. immitis. Результаты видовой дифференциации инвазированных микрофиляриями собак представлены в таблице 3.

Таблица 3 Инвазированность собак D. Immitis

Годы	Выявлено инвазированных собак (микрофиляремия)	Подтверждено заражение D. immitis собак (антигенный тест)	Экстенсивнос ть инвазии D. immitis, (%)
2009	44	8	18,1
2010	35	12	34,3
2011	27	11	40,7
Всего	106	31	29,2

Из ста шести собак, у которых по методу Кнотта обнаружены микрофилярии, положительную реакцию на D. immitis дали тридцать одна собака, что составляет 29 %. Всех поступавших собак исследовали с помощью экспресс-тестов и по методу Кнотта. При этом у пяти собак выявлена амикрофилярицидная форма паразитирования D. immitis (положительный антигенный тест при отсутствии микрофилярий в крови). У трех собак выявлена совместная инвазия D. immitis и D. repens при исследовании методом окрашивания на кислую фосфатазу или при вскрытии абсцессов.

Таким образом, проведенные исследования распространения дирофиляриоза среди служебных собак структур министерства внутренних дел свидетельствуют о широком распространении этого опасного заболевания в подразделениях МВД практически всех регионов России. В Республике Башкортостан зараженность среди служебных собак достигает 25-30%. А среди собак, содержащихся в вольерах, где не проводятся лечебно-профилактические мероприятия, распространение дирофиляриоза достигает 90%.

2.2.2Клинические проявления дирофиляриоза у собак

Все прибывающие в школу служебные собаки регистрировались. На каждую собаку составлялась «анкета» в которой указывались параметры анамнеза в т.ч.: регион, откуда прибыла собака, особенности кормления и содержания, перенесенные или имеющиеся хронические заболевания, непереносимость лекарственных препаратов, исследования на дирофиляриоз и проводимые профилактические мероприятия (дегельминтизация, вакцинация). После сбора анамнеза проводилось тщательное клиническое обследование собаки: вес, упитанность, качество шерстного покрова, ректальная температура тела, истечения из глаз, цвет конъюнктивы, истечения из носа, трахеальный рефлекс, осмотр наружного слухового прохода, зубов, пальпация лимфатических узлов, состояние суставов (тазобедренных, коленных, локтевых). В обязательном порядке проводили аускультацию сердца и легких. У всех собак производилось взятие крови из подкожной вены предплечья или подкожной вены голени для исследования на дирофиляриоз лабораторными методами.

Основные проблемы, выявляемые при обследовании служебных собак были следующие: у 25-30% собак констатировалась неудовлетворительная упитанность, дирофиляриоз (микрофиляремия) у 25-30% животных, бактериальный или грибковый отит у 3-5%. Кроме того, у некоторых собак диагностировали баланопостит, артрозы (чаще тазобедренных суставов), дерматиты, в том числе вызванные блошиной инвазией, кератиты, завороты век, новообразования, гингивиты вызванные зубным камнем и т.д.

При выявлении у собаки пороков и недостатков исключающих дальнейшее использование собаки в служебной деятельности, данная собака откомандировывалась в распоряжение комплектующего органа для принятия решения о выбраковке или лечении.

Служебные собаки, зараженные дирофиляриями, тщательно комплексно обследовались для выявления наличия или отсутствия признаков дирофиляриоза. В комплекс обследования обязательно входили следующие мероприятия: клиническое обследование в состоянии покоя, клиническое обследование после физических нагрузок (пробежка в течении 15-20 минут), рентгенография грудной клетки, гематологическое и биохимическое исследование крови, повторные исследования крови на наличие микрофилярий после проведения терапевтических мероприятий и в течение всего периода обучения.

Биохимическое исследование крови проводилось с использованием полуавтоматических анализаторов ROKI-4 и Mindray BA-88A и реактивов производства "Ольвекс Диагностикум". Для проведения рентгенологического обследования собаки, использовался переносной рентгенаппарат (модель DIG 360), ток рентгеновской трубки 10-16 мА, режим экспозиции 50- 60 мАс.

Рисунок 7 Проведение рентгенологического обследования собаки, используется переносной рентгенаппарат (модель DIG 360)

В качестве иллюстрации представляем описание некоторых клинических случаев дирофиляриоза, диагностируемых и наблюдаемых нами.

Случай 1. В августе 2010 года в школу из Нижегородской области прибыла собака породы бордер-колли, возраст 3 года, содержание вольерное.

При обследовании крови с помощью метода обогащения Кнотта была выявлена микрофиляремия. При исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз дирофиляриоз вызванный D. immitis. При гематологическом и биохимическом исследовании крови выявлена незначительная эозинофилия - 11% и гиперпротеинемия - 112 г/л. При клиническом обследовании выявлена незначительная одышка после физических нагрузок, положительный трахеальный рефлекс, быстрая утомляемость, редкий кашель. При рентгенологическом обследовании патологий не выявлено (рисунок 8).

Рисунок 8 Рентгенограмма собаки породы бордер-колли, возраст 3 года. Отклонений от нормы не выявлено.

Собаки породы бордер-колли особо чувствительны к препаратам ивермектина, в связи с этим для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты мильбемицина (мильбемакс) в дозе 2,0 мг/кг орально и препараты селамектина дозе 6,0 мг/кг наружно в виде капель на холку («Стронгхолд»).

Данная собака дальнейшую службу проходила на территории Республики Башкортостан. Она регулярно подвергалась профилактическим обработкам препаратом мильбемакс, кроме этого собаку периодически обследовали на наличие в крови микрофилярий. Обследования показывали наличие микрофилярий в крови собаки вплоть до сентября 2011 года. Последующие исследования не выявили микрофиляремии. В апреле 2012 года проведено иммунохроматографическое исследование (экспресс-тест) – результат отрицательный. В октябре 2012 года проведено контрольное исследование крови. Микрофилярии не обнаружены. Выполнено иммунохроматографическое исследование (экспресс-тест) – результат отрицательный.

Случай 2. В январе 2011 года в школу из Ульяновской области прибыла собака породы немецкая овчарка, возраст 3 года, содержание вольерное. При обследовании крови методом обогащения Кнотта выявлена микрофиляремия. При исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз дирофиляриоз вызванный D. immitis.

При клиническом обследовании выявлена бледность слизистых оболочек, одышка после физических нагрузок, положительный трахеальный рефлекс, быстрая утомляемость. При рентгенологическом обследовании констатировали увеличение правых отделов сердца (рисунок 9).

При гематологическом и биохимическом исследовании крови выявлен низкий гематокрит - 33 % и повышение уровня АЛТ - 110 ед/л, АСТ - 115 ед/л и ЩФ - 260 ед/л.

Для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного 1 раз в месяц. В период обучения, т.е. до июня 2011 года микрофилярии в крови собаки не выявлялись. В дальнейшем рекомендовано применение микрофилярицидных препаратов и регулярное исследование крови на дирофиляриоз.

Рисунок 9 Рентгенограмма собаки породы немецкая овчарка, возраст 3 года, увеличение правых отделов сердца

Случай 3. В феврале 2011 года в школу из Республики Башкортостан прибыла собака породы немецкая овчарка, возраст 2 года 5 месяцев, содержание вольерное. При обследовании крови методом обогащения Кнотта выявлена микрофиляремия. При исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз дирофиляриоз вызванный D. immitis. При гематологическом и биохимическом исследовании крови отклонений не выявлено. При клиническом обследовании в состоянии покоя и после физических нагрузок, а также при рентгенологическом обследовании патологий не выявлено (рисунок 10).

Для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного 1 раз в месяц. В период обучения, т.е. до июня 2011 года, микрофилярии в крови собаки не выявлялись. В дальнейшем рекомендовано применение микрофилярицидных препаратов и регулярное исследование крови на дирофиляриоз.

Рисунок 10 Рентгенограмма собаки породы немецкая овчарка, возраст 2 года

5 месяцев. Патологии не выявлены

Случай 4. В феврале 2011 года в школу из Пермского края поступила собака породы русский спаниель, возраст 5 лет, содержание вольерное. При обследовании крови методом обогащения Кнотта выявлена микрофиляремия. При исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз - дирофиляриоз вызванный D. immitis. При гематологическом и биохимическом исследовании крови обнаружили снижение гематокрита- 28 %, гипопротеинемию - 110 г/л., гипоальбуминемию - 25 г/л., увеличение показателей АЛТ - 210 ед/л, АСТ 238 ед/л , ГГТ – 10,7 ед/л, ЩФ - 354 ед/л.

При клиническом обследовании установили следующие изменения: трахеальный рефлекс сильно выражен, сильная одышка и кашель после физических нагрузок. При рентгенологическом обследовании выявлено увеличение правых отделов сердца, застойные явления в легких, гепатомегалия (рисунок 11).

Для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (отодектин) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного. Также назначено лечение хронической сердечной недостаточности и симптоматическое лечение.

Собака откомандирована в распоряжение комплектующего органа для принятия решения о выбраковке или лечении собаки.

Рисунок 11 Рентгенограмма собаки породы русский спаниель, возраст 5 лет. Установлена кардиомегалия, гепатомегалия.

Случай 5. В июле 2011 года в школу из Республики Удмуртия прибыла собака породы лабрадор-ретривер, возраст 4,5 года, содержание вольерное. При обследовании крови методом обогащения Кнотта выявлена микрофиляремия. При исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз - дирофиляриоз вызванный D. immitis. При гематологическом и биохимическом исследовании крови отклонений не выявлено. При рентгенологическом обследовании выявлено увеличение правых отделов сердца (рисунок 12). При клиническом обследовании установили: трахеальный рефлекс выражен, одышка после небольших физических нагрузок, в области шеи и в области холки выявлены ограниченные припухлости диаметром около 1,5 см.

Для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного 1 раз в месяц. После проведения микрофилярицидной терапии количество припухлостей увеличилось. Всего выявлено 4 припухлости диаметром до 2 см, две припухлости имели признаки воспалительного процесса (покраснение, болезненность). При хирургическом вскрытии этих образований извлечены живые гельминты размером 5 и 7 см идентифицированные как D. repens. Остальные образования не потребовали хирургического вмешательства. В период дальнейшего обучения, т.е. до декабря 2011 года микрофилярии в крови собаки не выявлялись. В дальнейшем рекомендовано применение микрофилярицидных препаратов и регулярное исследование крови на дирофиляриоз.

Случай 6. В марте 2011 года, при плановом обследовании служебных собак принадлежащих школе, выявлена зараженная дирофиляриозом собака породы немецкая овчарка, возраст 8 лет. Собака прибыла в школу из Республики Башкортостан в 2007 году, содержание вольерное.

При обследовании крови методом обогащения Кнотта выявлена микрофиляремия, при исследовании методом иммунохроматографии (экспресс-тест) подтвержден диагноз дирофиляриоз вызванный D. immitis. При гематологическом и биохимическом исследовании крови установили: лейкоцитоз - 18,5 тыс/мкл, гипоальбуминемию - 25 г/л., увеличение показателей АЛТ - 177 ед/л, АСТ - 138 ед/л , ГГТ - 15,8 ед/л, ЩФ - 302 ед/л.

При рентгенологическом обследовании выявлено незначительное увеличение правых отделов сердца (рисунок 13).

Рисунок 12 Рентгенограмма собаки породы лабрадор-ретривер,

возраст 4,5 года, увеличение правых отделов сердца

При клиническом обследовании: трахеальный рефлекс выражен, одышка после небольших физических нагрузок. Кроме этого у собаки обнаружена ограниченная припухлость в области каудального пакета молочных диаметром около 5 см (опухоль молочной железы).

Для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного.

При повторном обследовании собаки в апреле 2011 года выявлено увеличение размеров новообразования до 8 см в диаметре, при исследовании крови микрофилярий не обнаружено. Установлен выраженный лейкоцитоз, повышение показателей АЛТ, АСТ, ГГТ, ЩФ. Собаке проведена региональная мастэктомия. Во время операции в операционной ране обнаружен живой подвижный паразит идентифицированные как D. repens. Послеоперационное заживление раны протекало хорошо, снятие швов произвели на 14-е сутки после операции.

В дальнейшем для проведения микрофилярицидной терапии применялись препараты ивермектина (ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного 1 раз в месяц.

Рисунок 13 Собака породы немецкая овчарка, возраст 8 лет.

Незначительное увеличение правых отделов сердца.

В ноябре 2011 года, при плановом обследовании, у этой собаки выявлены множественные мелкие новообразования диаметром от 0,5 до 1,5 см во всех молочных пакетах. На рентгенограмме легких выявлены множественные очаги метастазирования. В связи с нецелесообразностью дальнейшего лечения данной собаки принято решение о выбраковке и эвтаназии собаки. При вскрытии собаки в правом желудочке сердца обнаружены взрослые дирофилярии (D. immitis) в количестве 5 особей длинной от 10 до 20 см (рисунок 14).

Таким образом, клинически инвазия D. immitis проявляется следующим образом: 1) бессимптомное течение; 2) филяриозная пневмония;

запущенная стадия дирофиляриоза проявляющаяся «легочным сердцем»;
синдром полой вены.

Рисунок 14 D. immitis извлеченные из сердца собаки после вскрытия, порода немецкая овчарка, возраст 8 лет.

При бессимптомном течении могут наблюдаться неспецифические признаки, например болезненное состояние неопределенного характера, отсутствие физической выносливости, потерю веса, одышка и кашель.

Далее появляются симптомы правосторонней застойной недостаточности с заметным асцитом и внезапной гибели. Дилатация правого желудочка диагностируется при электрокардиографии в случае запущенного дирофиляриоза, что свидетельствует о развитой гипертонии малого круга.

При аускультации можно обнаружить заметный, длящийся долю секунды тон, обусловленный задержкой смыкания клапана легочной артерии, может также прослушиваться шум, создаваемый регуртигацией из трехстворчатого клапана.

Синдром полой вены проявляется развитыми симптомами правосторонней сердечной недостаточности вследствие нарушения изгоняющей функции сердца и правосторонней недостаточности сердца в результате нарушения венозного притока, с сопутствующей желтухой и незначительной гемоглобинурией.

Рентгенография это один из наиболее эффективных методов оценки тяжести болезни и полезны для определения прогноза. У трех собак с помощь этого метода мы наблюдали правостороннее расширение сердца.

У обследованных собак также выявлено одновременное паразитирование D. immitis и D. repens. Дирофиляриоз подкожной клетчатки чаще всего протекает бессимптомно. D. repens у собак редко выявляются в виде опухолевидных ограниченных припухлостей с маловыраженными воспалительными явлениями, при вскрытии таких припухлостей обнаруживаются живые гельминты, иногда при проведении оперативных вмешательств, гельминты случайно обнаруживаются в подкожно клетчатке. В нескольких случаях после применения микрофилярицидных препаратов на местах диагностировали появление множественных припухлостей под кожей, при хирургическом вскрытии которых обнаруживались живые малоподвижные D. repens.

Присутствие микрофилярий в периферической крови является диагностическим симптомом подтверждающим подозрения при выявлении описанных клинических признаков. При этом важно дифференцировать от инвазии непотогенного гельминта Dipetalonema reconditum. Для выделения микрофилярий из крови можно использовать метод Кнотта или капельную реакцию.

Использованные микрофилярицидные препараты эффективны для профилактики дирофиляриоза в указанных дозировках и предотвращают повторное инвазирования животного. Взрослые гельминты, живущие по разным данным от 4-5 месяцев до 2-3-х лет погибают, что приводит к постепенному освобождению животного от гельминтов.

2.2.3Гематологические показатели при дирофиляриозе

Известно, что гельминты могут оказывать влияние на состав периферической крови и на биохимические показатели этой ткани. Токсические вещества вызывают гемолиз эритроцитов, поэтому число их уменьшается. Анемия часто сопровождается анизоцитозом, пойкилоцитозом, появлением в крови ядерных эритроцитов. В зависимости от характера течения процесса отмечаются лейкопения, лимфоцитоз, эозинофилия, нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом ядра влево до миелоцитов. Ускоренная СОЭ, нейтрофилия со сдвигом ядра влево до миелоцитов, снижение эозинофилов обуславливают неблагоприятный прогноз.

Дирофилярии, паразитируя в полостях сердца, оказывают вредное воздействие как токсическими веществами, выделяемыми в процессе своей жизнедеятельности, так и механическим воздействием, травмирую эндокард, прежде всего клапаны сердца. Микрофилярии, не смотря на относительно небольшую величину, циркулируя в крови, оказывают существенное воздействие на капиллярную сеть, что может приводить к воспалительным процессам, чаще всего в органах, где сосуды образуют хорошо развитую капиллярную сеть, на пример в почках. Это также приводит к изменению гематологических показателей.

Нами было проведены исследования крови от шестидесяти собак больных различными формами дирофиляриоза. Полученные данные мы сравнили с клиническими и биохимическими показателями крови собак свободных от дирофилярий. Для удобства анализа в таблицах представлены статистически обработанные показатели в виде доверительного интервала рассчитанного при Р<5% (таблицы 4, 5, 6).

Практически в 100% случаев при клинической форме болезни выявлено достоверное (при Р<5%) снижение количества эритроцитов и соответственно показателей гематокрита. При субклинической форме количество эритроцитов практически не изменяется.

При субклинической и клинической формах болезни повышается количество лейкоцитов, но достоверное увеличение отмечается только у собак с клиническими признаками дирофиляриоза.

Таблица 4 Гематологические показатели у собак при дирофиляриозе

Показатели Собаки, зараженные дирофиляриозом Норма

Субклиническая Клиническая

форма болезни форма болезни

Гематокрит (%) 40-45 28-35 35-55

Эритроциты (млн/мкл) 5,5-7,5 4,9-5,5 5,4-7,8

Гемоглобин (г/л) 140-170 130-150 130-190

Лейкоциты (тыс/мкл) 9,5-12,5 11,5-18,5 8,5-10,5

Таблица 5 Лейкоцитарная формула у собак при дирофиляриозе

Показатели	Собаки, зараженные дирофиляриозом		Норма
Показатели	Субклиническая форма болезни	Клиническая форма болезни	Норма
Миелоциты (М)	-	-	-
Метамиелоциты(Ю)	0-2	0-2	0-1
Палочкоядерные	1-9	2-12	1-6
Сегментоядерные	33-70	40-80	34-72
Базофилы	0-3	0-3	0-1
Эозинофилы	5-8	8-13	2-10
Моноциты	2-4	2-4	1-5
Лимфоциты	20-35	22-30	21-40

У всех больных собак выявлена эозинофилия. Другие показатели крови либо не отличались от аналогичных показателей крови здоровых собак, либо имели недостоверные отклонения.

Данные биохимического анализа крови собак больных дирофиляриозом представлены в таблице 6.

Таблица 6 Биохимические показатели крови собак при дирофиляриозе

Показатели	Собаки, зараженные дирофиляриозом		Норма
Показатели	Субклиническая форма болезни	Клиническая форма болезни	Норма
Общий белок (г/л)	65-78	80-120	55-77
Альбумин (г/л)	30-35	20-26	25-40
Креатинин (мкмоль/л)	60-75	110-130	50-120
Мочевина (ммоль/л)	3.5-6.5	8.5-10,0	2.5-8.6
Глюкоза (ммоль/л)	5.5-6.5	6.0-6.5	4.4-6.5
Общий билирубин (мкмоль/л)	0.5-6.0	2.5-7.0	0.5-10.0
АЛТ (ед/л)	40.0-65.0	110.0-250.0	До 70
АСТ (ед/л)	42.0-62.0	100.0-265.0	До 75
γ –ГТ (ед/л)	1.5-5.0	5.5-15.0	До 6.9
Щелочная фосфатаза (ед/л)	110.0-180.0	190.0-380.0	До 160
α –амилаза (ед/л)	450.0-900.0	700.0-1600.0	До 1800

У всех собак с клинической формой болезни констатировали достоверно высокий уровень общего белка (гиперпротеинемия). У собак с субклинической формой инвазии количества общего белка тоже повышено, но не достоверно. Количество общего белка повышается за счет глобулиновых фракций. Поэтому можно сделать вывод, что это связано с дистрофическими изменениями в органах и тканях, прежде всего в печени.

При этом отмечается гипоальбуминемия.

При наличии клинических признаков заболевания констатировали недостоверное повышение креатинина, мочевины, что свидетельствует о нарушении функции почек.

У собак с субклинической формой инвазии и, особенно с клиническими проявлениями болезни существенно повышается уровень ферментов крови: АЛТ, АСТ и щелочной фосфатазы, что свидетельствует об альтеративных процессах в печени и миокарде. АЛТ

(аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза) - это специальные белки (ферменты), которые содержатся внутри клеток организма и участвуют в обмене аминокислот (веществ, из которых состоят белки). АЛТ и АСТ содержатся в клетках различных органов и попадают в кровь при повреждении клеток. Повышенный уровень АЛТ и АСТ указывает на наличие заболевания того или иного органа (чаще всего гепатит, панкреатит, инфаркт). Содержание АЛТ и АСТ в различных органах неодинаково, поэтому, повышение одного из этих ферментов может указывать на заболевание определенного органа.

АЛТ (АЛаТ, аланинаминотрансфераза) – это фермент, который содержится главным образом в клетках печени, почек, мышц, сердца и поджелудочной железы. При повреждении этих органов большое количество АЛТ выходит из разрушенных клеток, что приводит к повышению уровня АЛТ в крови. АСТ (АСаТ, аспартатаминотрансфераза) – это фермент, который также содержится в в миокарде, печени, мышцах, нервных тканях, и в меньшей степени в легких, почках, поджелудочной железе. Повреждения вышеперечисленных органов приводят в повышению уровня АСТ в крови.

Таким образом, исследование клинических и биохимических показателей крови целесообразно проводить только как дополнительные методы диагностики, для установления тяжести протекаемого патологического процесса. У собак с субклиническим течением дирофиляриоза морфологические и биохимические показатели крови меняются незначительно. По мере развития заболевания развивается анемия, лейкоцитоз, и усиливаются признаки дистрофических изменений тканей и органов, происходит повышение креатинина и мочевины.

2.2.4Патанатомические изменения у собак при дирофиляриозе

В Республике Башкортостан дирофиляриоз был впервые обнаружен нами в 2003 году при вскрытии двух собак в Зональном центре кинологической службы по Республике Башкортостан. На тот момент это считалось случайной находкой – единичным случаем, который вызвал только исследовательский казуистический интерес. В настоящее время это заболевание стало частой находкой при вскрытии не только служебных собак, но и собак, преимущественно крупных пород, содержащихся у частных владельцев, и обнаруживается при вскрытии у 80% собак павших от различных причин, иногда не связанных с дирофиляриозом.

При детальном патологоанатомическом исследовании собак обнаруживали патологические процессы не только в месте локализации дирофилярий – в правом желудочке сердца, но и во внутренних органах и подкожной клетчатке. Собаки не подвергались обработкам против дирофиляриоза с лечебной или профилактической целью, вскрытие проводилось с целью установления причины смерти. Смерть иногда была внезапной или в результате эвтаназии, проводимой при неэффективности лечения.

Всего за период исследования мы вскрыли 318 собак и половозрелых гельминтов обнаружили у 23 собак. Возраст собак, у которых обнаружены дирофилярии, варьировал от двух до шестнадцати лет, в среднем возраст больных собак составлял 8 лет. Количество дирофилярий, обнаруженных в сердце, положительно коррелирует с возрастом (коэффициент корреляции

0,3).

Мы не выявили преимущественной заболеваемости кобелей или сук, этот показатель распределен приблизительно одинаково. Также не выявили связи между полом и количеством дирофилярий обнаруженных в сердце, что было подтверждено с помощью дисперсионного анализа.

В отношении породного состава установили, что чаще дирофилярии в сердце обнаруживали у немецких овчарок (48%), реже у среднеазиатских, восточно-европейских, кавказских овчарок и ротвейлеров (35%), редко у других пород (17%). Это можно объяснить преобладанием овчарок среди служебных собак в нашем регионе.

Количество обнаруженных в сердце дирофилярий было существенным фактором для развития органопатологии у животных. Находили от одного до тридцати девяти гельминтов (в среднем 13). У 22% собак мы обнаружили от одной до трех экземпляров D. immitis в правом желудочке сердца. У 39% собак регистрировали от четырех до десяти экземпляров D. immitis в правом желудочке сердца. У 22% собак регистрировали от одиннадцати до тридцати экземпляров D. immitis в правом желудочке сердца, причем часть дирофилярий располагались в легочной артерии и её ветвях доходящих до легких. У 17% собак подсчитывали более тридцати гельминтов в правом желудочке сердца. Максимальное количество дирофилярий достигало 39 гельминтов. У 20 % собак обнаруживали в подкожной клетчатке D. repens, причем все эти животные относились к группе, у которой в сердце и сосудах ведущих к легким находили более десяти экземпляров D. immitis.

Приведем выписки из протоколов вскрытия собак, у которых при вскрытии были обнаружены дирофилярии в сердце и в подкожной клетчатке. Они распределены в зависимости от количества экземпляров дирофилярий обнаруженных в сердце по мере возрастания. По нашим наблюдениям именно этот фактор и определяет появление различных патологий в сердце и осложнений во внутренних органах.

Немецкая овчарка, кобель, восьмилетнего возраста. Проведена эвтаназия вследствие неэффективности лечения.

В правом желудочке обнаружена одна дирофилярия длиной 17 см. Сердце округлой формы, соотношение толщины правого и левого желудочков 1:4, в полостях сердца рыхлые сгустки крови темно-красного цвета. Острый катаральный колит. Дилатация правого желудочка сердца.

Застойная гиперемия и отек легких.

Причина смерти эвтаназия. На эндокарде не обнаружили патанатомических изменений связанных с наличием одного экземпляра паразита в правом желудочке (рисунки 15, 16). Патология внутренних органов не связана с носительством паразита.

Среднеазиатская овчарка, сука, массой 42,5 кг, 6 летнего возраста. Животное содержалось в вольере. На момент поступления собаки в клинику у животного наблюдалось отсутствие аппетита, вялость, сонливость, слабость. Животное постоянно лежало. Клинический диагноз не был установлен. Было проведено симптоматическое лечение. Состояние не улучшилось, и животное было подвергнуто эвтаназии.

Обнаружили три дирофилярии в правом желудочке сердца. Полулунные и створчатые клапаны эластичные, гладкие, полупрозрачные. Соотношение правого и левого желудочка 1:6. Расширение правого желудочка сердца. Непроходимость в области пилорического сфинктера. Обширная гематома под капсулой селезенки и разрыв селезенки рядом с гематомой с кровотечением в брюшную полость (рисунок 17). Новообразование первой пары молочного пакета с правой стороны. Острый катаральный гастрит. Острый диффузный нефрит. Венозный застой и отек легких.

Тяжелое клиническое состояние собаки связано с непроходимостью желудка и развитием, вследствие этого крупной гематомы селезенки с последующим разрывом органа, кровотечением в брюшную полость. Дирофиляриоз можно рассматривать как фоновое заболевание, которое не вызвало смерть животного.

Вскрытие трупа кобеля черной масти с белыми лапами, 6-летнего возраста, породы – среднеазиатская овчарка, массой около 60 кг. Животное содержалось на улице и пало внезапно.

При вскрытии обнаружены следующие патологоанатомические изменения. Заворот правой половины желудка на левую сторону на ¾ оборота. Желудок вздут, шаровидной формы, темно-красного цвета, с геморрагической инфильтрацией стенки и содержимого (рисунок 18). Стронгуляционная борозда в пилорической части желудка. Непроходимость в области начала двенадцатиперстной кишки вследствие развития анемического инфаркта. Увеличение и деформация селезенки вследствие ее чрезмерного кровенаполнения. Острая венозная гиперемия и отек легких. Темно-вишневая несвернувшаяся кровь. Общая острая венозная гиперемия. Расширение правого желудочка сердца. В полостях сердца плохо свернувшаяся кровь. Обнаружили три круглых червя - дирофилярий, длинной 32 мм, в правом желудочке.

Непосредственными причинами смерти собаки были остановка сердца и асфиксия вследствие венозной гиперемии и отека легких. Это состояние развилось по причине заворота и острого расширения желудка, острой непроходимости кишечника. Наличие дирофилярий в правом желудочке сердца можно рассматривать как гельминтоносительство, т.к. патологоанатомических изменений в месте локализации круглых червей не обнаружили.

Шпиц, сука, шестилетнего возраста. У собаки наблюдались признаки одышки, отека гортани. Не смотря на интенсивное симптоматическое лечение, у животного наступила смерть.

При вскрытии установили: гематомы по ходу трахеи и пищевода, сгустки крови и жидкую кровь в грудной полости, участки ателектаза легких, анемию видимых слизистых оболочек, серозно-геморрагические отеки в области шеи, расширение правого желудочка сердца. В правом желудочке обнаружены три дирофилярии. Причина смерти артериальное кровотечение из правой общей сонной артерии. Наличие трех экземпляров паразита в сердце не связано с развитием заболевания и смертью животного.

Рисунок 15 Створка трехстворчатого клапана собаки – норма

Рисунок 16 Полулунные клапаны легочной артерии собаки – норма

Рисунок 17 Гематома селезенки с разрывом органа и кровотечением в брюшную полость

Рисунок 18 Острое расширение желудка у собаки

Немецкая овчарка серой масти, 8 летнего возраста, сука, массой 28 кг. Животное содержалось на улице. Клинические признаки у животного появились в семилетнем возрасте: одышка, синюшность слизистых оболочек, вялость, апатичность. Клинический диагноз: перитонит, гепатит.

При вскрытии обнаружены следующие патологоанатомические изменения. В правом желудочке сердца обнаружили шесть экземпляров дирофилярий. Поверхность эндокарда и парус клапана гладкий блестящий без видимых изменений. Крупозная плевропневмония, с участками венозной гиперемии и отека, альвеолярной эмфиземы. Хронический гепатит (рисунок 19). Острый диффузный нефрит. Подострый катаральный энтерит. На основании результатов проведения вскрытия трупа следует заключить, что смерть произошла в результате остановки дыхания, развившегося на фоне крупозной пневмонии. Дирофиляриоз можно рассматривать как фоновое заболевание, не вызвавшее изменения в сердце и других органах.

Ротвейлер, кобель, массой 29 кг, шестилетнего возраста. Предположительный диагноз - отравление. При вскрытии обнаружены семь дирофилярий длинной до 30 см в правом желудочке в массе несвернувшейся крови (рисунок 20). Расширение правой половины сердца. Острое расширение желудка и разрыв его в области пилоруса. Наличие кормовых масс в брюшной полости и перитонит. Серозно-геморрагический лимфаденит висцеральных лимфоузлов. Компрессионная анемия печени и селезенки. Кровенаполнение и отек подкожной клетчатки правой стороны тела. Синюшность слизистых оболочек головы. Отсутствие содержимого в толстом отделе кишечника. Катаральный тифлит, колит, проктит. Застойное полнокровие и отек легких. Смерть собаки наступила от остановки дыхания вследствие острого переполнения и расширения желудка с последующим разрывом его и перитонитом. Дирофиляриоз можно рассматривать как фоновое заболевание, не вызвавшее патологических процессов в сердце и других внутренних органах.

Рисунок 19 Цирроз печени собаки

Рисунок 20 Дирофилярии расположенные в виде пучка в массе посмертных сгустков крови

Немецкая овчарка, сука, массой 32 кг, восьмилетнего возраста.

Собака пала внезапно.

В правом желудочке обнаружены восемь дирофилярий (рисунок 21). В сосудах легких дирофилярии не обнаружены. Расширение правого желудочка сердца. Гнойная абсцедирующая пневмония с участками альвеолярной эмфиземы. Катаральный гастрит. Гранулемы в селезенке.

Причиной смерти животного была гнойная пневмония. Можно предполагать, что причиной гнойной пневмонии были дирофилярии. Хотя самих паразитов в легких не обнаружено, к пневмонии могли привести: нарушения динамики крови, продукты обмена и тромбоэмболы, возникшие вследствие паразитирования в правом желудочке.

Восточно-европейская овчарка. Кобель, возраст 5 лет, масса 35 кг. Клинически наблюдали нервные явления: судороги, возбуждение сменялось депрессией. Животное было подвергнуто эвтаназии.

При вскрытии установили следующие патологоанатомические изменения. Обнаружили восемь экземпляров дирофилярий в правом желудочке сердца и легочной артерии, трехстворчатый клапан с наличием бородавчатого эндокардита (рисунок 22). Острый катаральный гастрит. Острый панкреатит. Хронический интерстициальный нефрит и уроцистит. Общая венозная гиперемия. Венозная гиперемия и отек легких. Расширение правого желудочка сердца.

При вскрытии диагностировался дирофиляриоз, осложненный формирующимся бородавчатым эндокардитом трехстворчатого клапана. Основным заболеванием у собаки были острый гастрит и панкреатит. Осложнением дирофиляриоза были хроническая патология почек и мочевого пузыря.

Рисунок 21 Дирофилярии, расположенные в виде пучка в правом предсердии и легочной артерии

Рисунок 22 Бородавчатый эндокардит створок клапана сердца собаки при дирофиляриозе

Колли, сука, массой 18,7 кг, возраст семь лет. Собака подвергнута эвтаназии после неэффективного лечения.

Обнаружены следующие патанатомические изменения. В правом желудочке сердца обнаружены восемь дирофилярий длинной до 27 см, находились в рыхлых сгустках крови. Толщина правого желудочка 4 мм, левого 12 мм. Пристеночный эндокард и клапаны гладкие, поверхность блестящая, без видимых изменений. Расширение сердца с переполнением всех четырех полостей. Синюшность слизистых оболочек головы. Катаральный гастроэнтероколит. Общие венозный застой крови. Застойное полнокровие головного мозга. Атрофия мускулатуры и отсутствие жира.

Застойное полнокровие и отек легких.

Смерть животного наступила в результате проведенной эвтаназии. Признаки сердечной недостаточности связаны не только с танатогенезом, но и с наличием дирофилярий в правом желудочке, а также с развитием острого катарального гастроэнтероколита, имеющего вероятно инфекционную этиологию.

Собака породы немецкая овчарка. Возраст 2 года, сука. У собаки обнаруживалось вздутие живота, рвота. На следующий день проведено симптоматическое лечение. Вечером собака пала.

Девять дирофилярий свободно располагались в правом желудочке сердца. При вскрытии обнаружили пищевые массы и свернувшуюся кровь в брюшной полости. Острый перитонит. Заворот двенадцатиперстной кишки. Острое расширение и разрыв желудка. Увеличение селезенки за счет повышенного кровенаполнения и гиперплазии.

Смерть собаки наступила вследствие острого расширения и разрыва желудка. Дирофиляриоз был фоновым заболеванием не сопровождающийся патологией эндокарда, нарушениями кровообращения и патологией других органов.

Кавказская овчарка. Возраст 4 года, кобель. Из анамнеза известно,

что собака была обнаружена мертвой. До смерти животного признаков заболевания не обнаруживали.

При вскрытии обнаружены следующие патологоанатомические изменения. В правом желудочке в виде перепутанного клубка расположены девять дирофилярий длиной до 28 см. Концы паразитов проникали в правое предсердие и легочную аорту (рисунок 23), что препятствовало нормальному функционированию клапанов правого сердца и вызвало изменения вальвулярного эндокарда в виде утолщений (рисунок 24). Диагностировали фиброзный эндокардит трехстворчатого и полулунного клапанов правого сердца. Расширение правого желудочка сердца. Обнаружена крупная опухоль селезёнки, выступающая над поверхностью органа в виде шарообразного образования диаметром 13 см и массой около 1 кг (рисунок 25). Разрыв капсулы селезёнки над опухолью и обширное кровотечение в брюшную полость. Гиперплазия селезёнки и лимфатических узлов. Метаплазия костного мозга. Акцидентальная инволюция тимуса. Атрофия мозгового вещества надпочечников. Анемия видимых слизистых оболочек. Острый диффузный нефрит (рисунок 26). Папиллома на коже. Общая застойная гиперемия. Киста левой доли предстательной железы. Венозная гиперемия и отек легких с участками эмфиземы, множественные инкапсулированные паразитарные узелки диаметром до 2 мм в паренхиме легких. Темновишневая не свернувшаяся кровь.

На основании результатов вскрытия можно сделать вывод, внезапная смерть собаки произошла вследствие кровотечения из места разрыва селезёнки в месте прикрепления к органу крупной опухоли. Предположительный диагноз гемангиосаркома. Дирофиляриоз был сопутствующим заболеванием и сопровождался вальвулярным фиброзным эндокардитом правого сердца, нарушениями кровообращения.

Рисунок 23 Между легкими и перикардом видны дирофилярии, расположенные в легочной артерии

Рисунок 24 Фиброзный эндокардит створок клапана сердца собаки при дирофиляриозе

Рисунок 25 Опухоль селезенки

Рисунок 26 Хронический гломерулонефрит при дирофиляриозе

Немецкая овчарка, масса 32,5 кг, сука, возраст семь лет. Собака подвергнута эвтаназии вследствие тяжелого клинического состояния и неэффективности лечения.

При вскрытии обнаружили следующие патологоанатомические диагнозы. Наличие десяти дирофилярий в правом желудочке сердца с выходом паразитов в сосуды легких с развитием гнойной дисциркуляторной пневмонии в этих участках. Асцит, гидроторакс, гидроперикард. Дилатация правого желудочка сердца. Фиброзный эндокардит трехстворчатого клапана (рисунок 27). Лимфосаркома селезенки диаметром 15 см (рисунок 28). Острый гепатит. Общая венозная гиперемия. Лимфандулит бронхиальных узлов. Темно-вишневая не свернувшаяся кровь. Венозная гиперемия и отек легких.

У собаки наблюдалась тяжелая сочетанная патология сердца, легких, селезенки и печени. Дирофилярии локализовались не только в правом желудочке сердца, но и в предсердии, вызывая структурные изменения трехстворчатого и полулунного клапанов. Проникнув глубоко в сосудистое русло легких, они вызывали сердечно-сосудистую и легочную недостаточность, приведшие к развитию гнойной пневмонии.

Немецкая овчарка, кобель семилетнего возраста. Клинически на основании проведения УЗИ и R-графии были поставлены следующие диагнозы: острый панкреатит, кистозное образование в печени, нефрит, холецистит, выпадение межпозвоночного диска в области поясницы, кахексия.

При вскрытии установили следующие патологоанатомические диагнозы. Наличие десяти дирофилярий в правом желудочке сердца (рисунок 29). Бородавчатый эндокардит двух- и трехстворчатого клапанов сердца. Крупная опухоль (14,5*10 см) опухоль селезенки. Гипертрофический цирроз печени. Интерстициальный нефрит. Острый катаральный гастрит, колит, панкреатит. Асцит. Пролежни на коже. Акцидентальная инволюция

Рисунок 27 Фиброзный эндокардит створок и хорд клапана сердца собаки при дирофиляриозе

Рисунок 28 Опухоль и гематома селезенки у собаки

тимуса и атрофия мозгового вещества надпочечников. Метаплазия костного мозга. Расширение правого желудочка сердца. Темно-вишневая не свернувшаяся кровь. Венозная гиперемия и отек легких.

Непосредственной причиной смерти была остановка дыхания, развившаяся на фоне крупной опухоли селезенки, цирроза печени, нефрита и дирофиляриоза. В данном случае дирофиляриоз, стал причиной развития сердечной недостаточности и бородавчатого эндокардита, вероятно, мог быть причиной цирроза печени, патологии почек и асцита.

Кобель, немецкая овчарка массой 29,5 кг, 15-ти летнего возраста.

Собака подвергнута эвтаназии.

Сердце двухвершинное (рисунок 30). Под эпикардом «тигроидность». В правом желудочке сердца обнаружено десять дирофилярий. Белковожировая дистрофия миокарда, печени, почек. Общая застойная гиперемия (рисунок 31). Катаральный гастрит и дуоденит. Острый панкреатит. Возрастная инволюция тимуса и атрофия селезенки. Паразитарные узелки в легких. Застойная гиперемия и отек легких.

Наличие десяти дирофилярий не привело к развитию эндокардита, но это заболевание могло быть одной из причин развития дистрофии паренхиматозных органов.

Труп кобеля черной масти, породы черный терьер, массой около 50 кг. Собака содержалась в вольере. Животное пало внезапно.

При вскрытии обнаружены следующие патологоанатомические изменения. Расширение правого сердца. В полостях сердца плохо свернувшаяся кровь. Обнаружили одиннадцать круглых червей – дирофилярий в полости правого желудочка и предсердия. Гельминты, свернувшиеся в клубок, закупоривали отверстие в области полулунных клапанов легочной артерии и частично проникали в этот сосуд. Темновишневая несвернувшаяся кровь. Общая венозная гиперемия (рисунок 32).

Острая венозная гиперемия и отек легких. Острый нефрит (рисунок 33).

Рисунок 29 Дирофилярии, извлеченные из правого желудочка сердца

Рисунок 30 Острое расширение сердца при дирофиляриозе. Пучок дирофилярий, извлеченных из правого желудочка

Рисунок 31 Застойное полнокровие (мускатная печень) печени при дирофиляриозе

Рисунок 32 Острое застойное полнокровие печени при дирофиляриозе На основании результатов вскрытия трупа следует заключить, что непосредственной причиной смерти собаки была остановка дыхания вследствие закупорки просвета легочной артерии комком гельминтов.

Кавказская овчарка, кобель, пятнадцатилетнего возраста, массой 48 кг. Животное пало после длительной болезни.

Форма сердца округлая. Сосуды эпикарда расширены, на правом предсердии кровоизлияния. Правый желудочек дряблый. Внутри его рыхло свернувшаяся кровь содержащая двенадцать дирофилярий. На трехстворчатом клапане небольшие бородавки. Толщина стенки правого желудочка 8 мм. Толщина левого желудочка 22 мм. Фиброзный перикардит с образованием спайки с диафрагмой. Гастроэнтероколит. Белково-жировая дистрофия печени, почек, миокарда. Хронический холецистит. Подострый катаральный уроцистит. Возрастная инволюция тимуса и мозгового вещества надпочечников. Общая застойная гиперемия. Темно-вишневая не свернувшаяся кровь.

У собаки наблюдалась сочетанная патология многих внутренних органов и дирофиляриоз, сопровождающийся бородавчатым эндокардитом трехстворчатого клапана.

Немецкая овчарка, шестилетнего возраста, сука массой 25,8 кг. Утром собака была здорова, в обед обнаружена мертвой. Наличие тридцати гельминтов D. immitis длиной до 33 см в полостях сердца и крупных сосудах. Сердце увеличено, форма двухвершинная, межжелудочковая борозда сглажена. Правый желудочек сердца заполнен густой не свернувшейся кровью темно-красного цвета. Большое количество гельминтов располагается в легочной артерии. Гиперпластический спленит (рисунок 34). Лимфаденит подчелюстных, шейных, средостенных, мезентериальных узлов. Множественные (более десяти) абсцессы в подкожной клетчатке, с наличием в них гельминтов D. repens (рисунок 35). Катаральный гастроэнтерит. Общая венозная гиперемия. Белково-жировая дистрофия печени, миокарда.

Рисунок 33 Острый диффузный нефрит при дирофиляриозе

Рисунок 34 Гиперплазия селезенки при септикопиемии у собаки с

D. repens

Хронический нефрит. Интерстициальная пневмония. Синюшность слизистых оболочек головы. Смерть собаки наступила от остановки дыхания развившейся в связи с наличием дирофилярий в легочной артерии. Дирофиляриоз можно рассматривать как основное заболевание. Осложнением была септикопиемия, развившаяся в связи с локализацией дирофилярий в подкожной клетчатке.

Бульдог, кобель, шестнадцатилетнего возраста, массой 33,3 кг. Подвергнут эвтаназии. В правом желудочке обнаружены четырнадцать дирофилярий. Расширение правых полостей сердца с истончением стенки правого желудочка. Ожирение. Гастроэнтерит. Опухоль селезенки. В области нижней части брюшной стенки обнаружены три гельминта D. repens длиной 5, 7 и 11 см с признаками гнойного воспаления вокруг них (рисунок 36). Лимфаденит паховых узлов. Венозная гиперемия и отек легких. Наличие четырнадцати D. immitis могло быть причиной миогенного расширения сердца, а признаки септикопиемии связаны с наличием D. repens.
Немецкая овчарка, 6-летнего возраста, кобель, массой 25,8 кг. Утром собака была здорова, бегала, лаяла, в обед кинолог обнаружил, что собака лежала на земле, без движений и не дышала. При вскрытии обнаружили следующие патологоанатомические диагнозы. Восемнадцать дирофилярий (D. immitis) в правых полостях сердца и крупных сосудах. Септическая селезенка. Хронический простатит. Хроническая интерстициальная пневмония. Множественные абсцессы и гнойнички в подкожной клетчатке с наличием в некоторых из них, в общей сложности тринадцати гельминтов D. repens. Острый катарально-геморрагический гастроэнтерит. Общая застойная гиперемия. На основании результатов вскрытия следует заключить, что смерть животного наступила в результате инвазирования организма собаки D. immitis, с локализацией последних в сердечных полостях и развитием нарушений кровообращения. В подкожной клетчатке обнаружены D. repens, с развитием гнойного воспаления и септикопиемии.

Рисунок 35 Гнойный дерматит в месте паразитирования D. repens

Рисунок 36 Расчес и дерматит у собаки в месте локализации D. repens

Немецкая овчарка, кобель коричнево-белой масти, шестилетнего возраста, массой 35 кг. Животное содержалось на улице в вольере, кормление 3-х разовое. Клинические признаки: вялость, апатичность, отказ от еды. Клинический диагноз: отек легких, подострый катаральный гастрит, перитонит.

При вскрытии обнаружено тридцать два экземпляра D. immitis в правом желудочке сердца, в легочной артерии и в предсердии. Гельминты были собраны в виде тяжа и располагались на всю длину от правого желудочка до легкого. Венозная гиперемия и отек легких. Фибринозный перитонит. Гемолитическая желтуха. Абсцесс селезенки. Подострый катаральный гастрит.

На основании результатов проведения вскрытия трупа собаки, следует заключить, что смерть произошла от остановки дыхания в результате закупорки легочной артерии дирофиляриями.

Ротвейлер семилетнего возраста, сука, массой 30 кг. Животное содержалось в вольере. Внезапно наступила смерть. Подозрение на отравление.

Наличие тридцати шести гельминтов - D. immitis в правом желудочке сердца и легочной артерии. Расширение правого желудочка сердца. Фиброзный эндокардит трехстворчатого и полулунного клапанов. Катаральный гастроэнтероколит. Лимфаденит мезентериальных узлов. Застойное полнокровие печени. Хронический интерстициальный нефрит. Застойное полнокровие и отек легких. Дилатация правого желудочка сердца с истончением стенки органа.

Смерть животного наступила от асфиксии, обусловленной дирофиляриозом.

Немецкая овчарка, сука. Возраст 14 лет. Клинически у собаки выражены признаки системного артрита. Животное было подвергнуто эвтаназии.

При вскрытии обнаружили следующие патологоанатомические изменения. Правое предсердие увеличено в размерах. Коронарные сосуды кровенаполнены. Правый желудочек заполнен посмертным сгустком бурокоричневого цвета и переполнен большим количеством дирофилярий (тридцать восемь), располагающиеся частично в правом предсердии и легочной артерии. Парус трехстворчатого клапана в виде тонких полупрозрачных пластинок, без видимых изменений. Соотношение толщины правого и левого желудочка 1:3 (3:9 мм). Митральный клапан без видимых изменений. Острый катаральный гастрит с наличием в желудке посторонних предметов (губка). Атрофия селезенки. Киста яичников. Атрофия скелетной мускулатуры и отсутствие жира. Серозно-фибринозный артрит. Венозная гиперемия и отек легких.

Не смотря на большое количество дирофилярий в правых полостях сердца, признаки сердечной и легочной недостаточности не наблюдались.

Видимо они сглаживались признаками кахексии и артрита.

Восточно-европейская овчарка, кобель, шестилетнего возраста, массой 41 кг. Собака подвергнута эвтаназии.

Форма сердца округлая. В правом желудочке обнаружены тридцать девять дирофилярий, частично внедряющиеся в предсердие и легочную артерию. Один экземпляр дирофилярии обнаружили в левом желудочке сердца. Створки трехстворчатого клапана неровные с бородавчатыми утолщениями. Острый катаральный гастроэнтероколит. Хронический гепатит. Хронический нефрит. Анемия видимых слизистых оболочек. Метаплазия костного мозга. Темно-вишневая не свернувшаяся кровь. Застойная гиперемия и отек легких.

Основными заболеваниями у собаки были дирофиляриоз и острый катаральный гастроэнтерит. С дирофиляриозом связано развитие бородавчатого эндокардита, хронического гепатита и нефрита.

Таким образом, патоморфологические изменения мы регистрировали у всех больных собак в виде переплетения нитей гельминтов в полостях правого желудочка с проникновением некоторых экземпляров в предсердие и легочную артерию. Их количество достигало от одного до тридцати девяти. Гельминты, шириной 1-1,5 мм, в длину – от 120 до 330 мм, находились в крови свободно. Редкие единичные экземпляры гельминта располагались в полости левого желудочка сердца.

Патоморфологические изменения существенно зависели от количества и локализации дирофилярий. Одну-три дирофилярии обнаружили у 10% собак. У этих животных не обнаруживали патологоанатомических изменений в эндокарде, миокарде, подкожной клетчатке, внутренних органах. Дирофилярии были случайной находкой и их наличие можно рассматривать как носительство, а не нозологическую форму – дирофиляриоз. Только у одного животного обнаружили острый диффузный нефрит. Смерть этих животных была связана с эвтаназией или в результате острого расширения желудка.

У 50% вскрытых собак находили от шести до десяти дирофилярий в правом желудочке сердца. У трети этих животных дирофилярии проникали в правое предсердие и в легочную артерию. У 60% этих собак диагностировали патологию сердца в виде вальвулярного эндокардита (40%) или расширения правого желудочка сердца (20%), сопровождающимся эксцентричной атрофией миокарда и, как следствие этого – нарушениями кровообращения с малом круге.

У собак этой группы обнаруживали очаговые склеротические изменения эндокарда. При этом эндокард белесый, на поперечных разрезах заметно его утолщение. Поверхность такого участка блестящая, без наложений фибрина, что свидетельствует об отсутствии воспаления.

В некоторых участках пристеночного эндокарда и на обоих парусах трехстворчатого клапана имели место кровоизлияния, у некоторых животных – утолщения или изъязвления в краевых участках. При этом заметно удлинение и утолщение сосочковых мышц. Эти изменения могут колебаться от некоторого утолщения, отека створок и нежных наложений фибрина по краям клапана, до мелких серовато-красных бородавочек размером до 1-3 мм.

Последние располагаются по линии смыкания клапанных створок

(бородавчатый эндокардит). В таких случаях мы проводили изучение мазковотпечатков из подобных образований на клапанах. При этом микрофлора не выявлялась, что свидетельствовало об асептическом характере развития эндокардит. При развитии септического состояния обнаруживали разрушения клапанов с образованием язв и крупных дефектов створок.

Утолщения пристеночного и клапанного эндокарда правой половины сердца, характерного для дирофиляриоза, сопровождается стенозом отверстий. Все это ведет к гипертрофии правого желудочка с последующим расширением его полости и развитием недостаточности кровообращения в малом круге. Миокард дрябловатой консистенции, волокнистое строение сглажено. У собак старше пятилетнего возраста миокард имел буроватый оттенок. Приведенные изменения в сердце сопровождались нарушением кровообращением во всех других органах в виде венозного полнокровия, цианоза.

Все это свидетельствует о длительном нахождении дирофилярий в правом желудочке, что и приводит к хроническим изменениям пристеночного эндокарда и клапанов. В этом плане интересен вопрос о висцеральной органопатологии у таких животных.

Изменения во внутренних органах, связанные с наличием дирофилярий в правом желудочке сердца, обнаруживали у половины собак имеющих до десяти дирофилярий в правом желудочке сердца. Практически у всех наблюдали признаки сердечной недостаточности в виде асцита, гидроторакса, гидроперикарда. Диагностировали нарушения кровообращения в печени и других внутренних органах. В печени отмечали застойное полнокровие и белково-жировую дистрофию. При этом орган был уплотнен (индурация), что свидетельствует о хроническом характере гиперемии. Иногда эти изменения приводили к циррозу печени. У половины собак этой группы диагностировали острый диффузный нефрит.

У 30% собак этой группы обнаруживали выраженные изменения в легких, которые и являлись причиной смерти собак. При наличии шести дирофилярий обнаружили крупозную плевропневмонию. Эта патология была острой и возникла на фоне патологического воздействия микрофилярий и гиперергической реакции организма.

Диагностировали гнойную пневмонию. Эти изменения в органах дыхания развивались при наличии восьми - десяти дирофилярий в правом желудочке сердца. При этом самих паразитов в легких не обнаруживали. Но по нашему мнению к пневмонии могли привести нарушения динамики крови в легких, поступление продуктов обмена дирофилярий, приводящих к иммунной реакции организма, а также и тромбоэмболы, возникшие вследствие паразитирования в правом желудочке. Серозная или серознофибринозная пневмония, вероятно, осложнялись вторичной микрофлорой, и на этом фоне развивался гнойный процесс в легких. Это также косвенно свидетельствует о хроническом характере процессов развивающихся в легких.

Практически у всех животных находили патологию желудочнокишечного тракта. Диагностировали гастрит, энтерит, колит или катаральный гастроэнтерит, панкреатит, острое расширение желудка. У некоторых собак на фоне патологии желудка и кишечника наблюдалась кахексия, акцидентальная инволюция тимуса, метаплазия красного костного мозга, атрофия мозгового вещества надпочечников, анемия.

У 40% собак обнаружили от десяти до тридцати девяти дирофилярий в правом желудочке сердца. Наличие такого большого количества крупных паразитов (величина некоторых экземпляров превышала 30 см) приводила к тому, что часть из них локализовалась в правом предсердии и легочной артерии. Миграция между сердечными клапанами приводила к развитию бородавчатого эндокардита трехстворчатого, реже полулунных клапанов. Пребывание отдельных экземпляров возбудителей в легочной артерии сочеталось с состоянием застойного полнокровия или отека легких. У двух внезапно павших собак обнаружили плотно сплетенный пучок гельминтов направленный в устье легочной артерии и закупоривающий её просвет.

Но практически у всех собак этой группы диагностировали расширение правого желудочка сердца, или всей правой половины сердца, реже диагностировали диффузное расширение правого и левого желудочка. Сердца находили в состоянии диастолы. Правые полости сердца расширенны, содержали не свернувшуюся кровь или рыхлые сгустки крови густой консистенции темно-красного или красновато-черного цвета с синюшным оттенком, что свидетельствовало об отсутствии агонального характера смерти и быстром умирании. Жидкая кровь, иногда с небольшим количеством красных сгустков, характерна для очень быстрой, моментальной смерти в результате остановки сердца, смерти от асфиксии.

Расширение можно рассматривать как застойное миогенное, связанное с накоплением массы крови и наличием большого количества паразитов в полости желудочка и, как следствие недостаточное систолическое опорожнение. При этом полости сердца были увеличены в поперечном направлении, папиллярные мышцы и трабекулы были уплощены и сглажены. В сердечной мышце появлялись дистрофические и воспалительные изменения.

У всех собак этой группы диагностировали висцеральную органопатологию связанную с наличием значительного числа дирофилярий в сердце. В печени, селезенке обнаруживали венозный застой. Характерно, что он не сопровождался индурацией этих органов, что свидетельствовало об остром характере процесса. В почках диагностировали хронический нефрит.

Для этой группы собак характерны острые формы патологии легких. Так у одного животного обнаружили интерстициальную пневмонию. Второй разновидностью патологии легких была острая венозная гиперемия и отек легких вследствие полной или частичной закупорки легочной артерии.

Практически у всех животных обнаруживали болезни желудка и кишечника.

У трех собак сердечная форма дирофиляриоза сочеталась с подкожной, проявляющейся в виде образования узелков и бугорков в местах локализации D. repens. Узелки локализовались в участках с редким волосяным покровом, В этих местах обнаруживали аллопецию и расчесы кожи. Во всех случаях такие паразитарные узелки были осложнены гнойным воспалением и развитием хронического сепсиса (септикопиемии), признаками которого были гиперплазия селезенки, системный лимфаденит.

Таким образом, кардиопатология и изменения в других органах и тканях тесно коррелирует с количеством дирофилярий, обнаруженных в правом желудочке сердца. При наличии единичных паразитов, которые располагались в правом желудочке, макроскопически выраженных изменений париетального и клапанного эндокарда, миокарда и висцеральной патологии не обнаруживали. Такое состояние можно рассматривать не как заболевание, а как носительство паразитов. Такие животные, не имеющие клинических признаков заболевания, могут представлять опасность, как источник инвазии для других собак. Это подтверждает наше предложение о необходимости лабораторного исследования всех собак, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков.

Наличие в сердце умеренного количества дирофилярий (до десяти экземпляров) приводит к хронической патологии эндокарда и миокарда в виде вальвулярного бородавчатого эндокардита, асептического характера, очаговых склеротических изменений пристеночного эндокарда. Это ведет к стенозу отверстий. Все это ведет к первичной гипертрофии правого желудочка с последующим эксцентричным расширением его полости, атрофии миокарда и развитием недостаточности кровообращения в малом круге, а также застойного полнокровия в паренхиматозных органах. У 30% животных этой группы диагностировали пневмонии, развитие которых связано с наличием дирофилярий в правом желудочке сердца.

Локализация большого количества дирофилярий в правом желудочке сердца (до тридцати девяти) приводила к тому, что часть из них локализовалась в правом предсердии и легочной артерии и, как следствие, к развитию бородавчатого эндокардита трехстворчатого, реже полулунного клапанов. Пребывание паразитов, часто в виде сплетенных пучков, в легочной артерии сочеталось с застойным полнокровием или отеком легких. Сердечная и висцеральная патология при этом характеризовалась острой формой.

Сопутствующими заболеваниями при дирофиляриозе собак были: катаральный гастрит, энтерит и колит, панкреатит, острое расширение желудка. При этом, у некоторых собак наблюдалась кахексия, акцидентальная инволюция тимуса, метаплазия красного костного мозга, атрофия мозгового вещества надпочечников, анемия. D. repens паразитирует в подкожной клетчатке, что сопровождается гнойным воспалением и приводит к септикопиемии.

Характерно, что у 43,5% вскрытых собак обнаруживали нефрит, т.е. в несколько раз больше, чем у животных не инвазированных дирофиляриями.. Это явление можно объяснить циркуляцией микрофилярий в крови и закупоркой этими эмболами капиллярных клубочков в почечных тельцах. Известно, что в развитии нефритов большое значение имеют факторы, нарушающие барьерную функцию эндотелия в сосудистом аппарате почек. Это действие способствует задержке и повреждению клубочков почек. К таким повреждающим факторам можно отнести микрофилярии. Наличие нефрита не коррелирует с количеством гельминтов в сердце. При остром нефтире развивается гипертония,а вследствии этого нарушения кровообращения и гипертрофия сердца.

2.2.5Патогистологические изменения тканей и органов при

дирофиляриозе собак

Гистологическому исследованию подвергали ткани и структуры сердца, непосредственно контактирующие с дирофиляриями, а также органы, в которых при вскрытии обнаруживали макроскопические изменения, с целью дифференциальной диагностики патологических процессов, развивающихся в них.

В контрольной группе у клинически здоровых собак обнаруживали следующую структуру эндокарда. Оба предсердно-желудочковых клапана, двустворчатый (митральный) в левой половине сердца и трехстворчатый (трикуспидальный) в правой, представляют собой покрытые эндотелием тонкие пластинки плотной волокнистой соединительной ткани. Оба клапана имеют сходную слоистую структуру, в которой со стороны желудочков преобладает плотная коллагеновая основа, а со стороны предсердий – рыхлая соединительная ткань (рисунок 37). Оба слоя имеют примерно одинаковую толщину. Кровеносных сосудов в створках клапанов нет, они имеются только в их основании там, где соединительнотканная структура переходит в мышечную ткань. Предсердная поверхность створок гладкая, а желудочковая снабжена выростами, из которых начинаются сухожильные нити (хорды), идущие к сосочковым мышцам. Согласованное действие этих четырех структур (створок, хордальных нитей, сосочковых мышц и связанных с ними зон желудочкового миокарда) и определяет нормальную функцию обоих атриовентрикулярных клапанов.

Клапаны аорты и легочного ствола состоят из 3 карманообразных, полулунных и полупрозрачных заслонок, по гистологическому строению похожих на предсердно-желудочковые клапаны. Заслонки полулунных клапанов в центре свободного края имеют мелкие соединительнотканные узелки (Арантиуса-Морганьи). Они непостоянны и имеются только у каждой третьей собаки. От узелков отходят складочки, образующие на клапане продольные углубления, или луночки, обеспечивающие более плотное смыкание створок клапана при обратном токе крови после расслабления мышечной стенки желудочков.

При патогистологическом исследовании наиболее ранние изменения при дирофиляриозе собак обнаруживали в эндокарде правой половины сердца. На поверхности клапанов выявляли слущивание клеток эндотелия и участки некробиоза (рисунок 38). Кроме альтерации и некроза, нередко отмечали выраженную пролиферацию. В отдельных случаях разрастание эндотелия принимает такие существенные размеры, что вместе с гистиоцитами стромы он образует небольшие выросты. Следовательно, бородавки иногда формируются не только за счет организации тромба, а в иногда результате гистиоцитарно-клеточной реакции эндокарда.

У собак, с наличием нескольких экземпляров дирофилярий в правом желудочке, при гистологическом исследовании установили признаки поверхностной дезорганизации соединительной ткани трехстворчатых клапанов. При окраске гематоксилином и эозином основное вещество соединительной ткани становится базофильным. При этом обнаруживали накопление в соединительной ткани клапанов хромотропных веществ, дающих реакцию метахромазии. Эти изменения развивались в виде микроскопических очагов, которые отличались от окружающей ткани базофилией (рисунок 39). Это позволило нам определить эти начальные изменения соединительной ткани как мукоидное набухание. В дальнейшем происходит набухание основного вещества и коллагеновых волокон соединительной ткани. Коллагеновые волокна становились неровными, с неравномерно выраженным увеличением объема отдельных участков, размытостью контуров и структуры, иногда разволокнением. Изменение межуточного вещества сопровождалось скоплением лимфоцитов и гистиоцитов (рисунок 40).

Рисунок 37 Пластинка трехстворчатого клапана здоровой собаки. Плотная волокнистая соединительная ткань, покрытая эндотелием. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 38 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. На поверхности клапанов выявляли слущивание клеток эндотелия, участки некробиоза и отложение фибрина. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 39 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Мукоидное набухание соединительной ткани. Окраска по РомановскомуГимзе. Увеличение 400.

Рисунок 40 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Скопление лимфоцитов и гистиоцитов в зоне скопления базофильных веществ. Окраска по Романовскому-Гимзе. Увеличение 400.

У части собак эти обратимые изменения усиливаются и в очагах развиваются фибриноидное набухание. При этом отмечали распад основного вещества, набухание и частичный распад волокон соединительной ткани. Эти участки обладают эозинофильными свойствами, метахромазия не выражена. Гистологически самые начальные стадии процесса характеризуются изменением соединительнотканных волокон. Они набухают, приобретая гомогенный вид, вследствие чего исчезает фибриллярное строение соединительной ткани. Набухают и округляются также клетки стромы эндокарда. Между измененными волокнами и клетками появляются нити фибрина. Эти участки жадно воспринимают кислые красители (эозин, пикрофуксин) (рисунок 41).

В исходе фибриноидного набухания иногда развивается фибриноидный некроз, характеризующийся полной деструкцией соединительной ткани. В этих участки ткань приобретает вид зернисто-глыбчатой или аморфной массы, над ними эндотелий слущивается. Таким образом, изменения покровных клеток эндокарда (эндотелия) и дезорганизация соединительнотканных волокон, вызываемые механическим и иммунологическим воздействием дирофилярий на эндокард, тесно взаимосвязаны и предшествуют очаговому разрушению соединительной ткани этих структур, патогистологическая картина которых в целом соответствует фибриноидному некрозу, за которым следует слущивание эндотелия и тромбообразование, с развитием бородавчатого эндокардита.

У собак с большим количеством дирофилярий макроскопически диагностировали бородавчатый эндокардит (рисунок 42). При этом на поверхности клапана обнаруживали сероватые или серо-красные, округлые наложения, напоминающие бородавки, иногда едва заметные на поверхности эндокарда (рисунок 43). Бородавки, как правило, локализовались по краям замыкания клапана и со стороны локализации гельминтов, т.е. поверхности

Рисунок 41 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Фибриноидное набухание соединительной ткани. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 42 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Развитие бородавчатого эндокардита. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

противоположной току крови. Бородавки построены из элементов входящих в состав тромба: фибрина, кровяных пластинок и лейкоцитов (рисунок 44). У некоторых животных бородавки приобретали плотную консистенцию, цвет их становился серо-белым, что объясняется организацией тромботических наложений на клапанах. Процесс организации начинается от эндокарда, откуда и берет начало грануляционная ткань, вместе с сосудами. Организованные бородавки ножом не соскабливаются, так как они крепко спаяны с тканью клапана.

У одной собаки диагностировали фиброзный эндокардит. Он характеризовался диффузными фибропластическими процессами в клапанах, приводящими к огрубению и утолщению их за счет новообразования пучков коллагеновых волокон и гиалиноза их (рисунок 45). Макроскопически при этом клапаны были матовыми, кожистыми, тугоподвижными, но не теряли своей общей формы. По данным литературы в дальнейшем, однако, всегда наступает сморщивание клапана, приводящее к тем или иным степеням порока. Главная масса клапанных пороков сердца развивается в исходе именно фиброзного эндокардита. В связи с этим прогноз при этой форма эндокардита неблагоприятный.

Пороки трехстворчатых клапанов представляют большей частью комбинированные формы стеноза с недостаточностью. В клиникоанатомическом отношении они характеризуются симптомами резкого нарушения кровообращения в венозной системе большого круга. К этим симптомам относятся: расширение правого предсердия и полых вен, мускатная печень, водянка полостей и отеки клетчатки. Неблагоприятное течение пороков трехстворчатых клапанов объясняется слабым развитием мускулатуры правого желудочка, который не в состоянии компенсировать пороки трехстворчатого клапана. Стеноз, или недостаточность пульмональных клапанов, осложняется расширением и гипертрофией правого желудочка. При недостаточной компенсации этого порока

Рисунок 43 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Развитие бородавчатого эндокардита. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 44 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Развитие бородавчатого эндокардита. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 45 Пластинка трехстворчатого клапана собаки при дирофиляриозе. Диффузный фибропластический процесс. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

развивается застой крови в малом круге кровообращения.

Дирофилярии вызывали также пристеночный (париетальный) эндокардит. Трехстворчатый клапан и полулунные клапаны поражались со стороны правого желудочка, где преимущественно локализовались дирофилярии. Последние проникали в полость легочной артерии или локализовались между желудочком и предсердием. Картина эндокардита выражалась в альтеративных изменениях эндотелия и самой ткани эндокарда, размножением местных клеточных элементов, тромбообразованием на поверхности внутренней оболочки сердца.

Со стороны трехстворчатого клапана наблюдались изменения хордального аппарата в виде утолщения, укорочения, спаяния хорд. Все это еще может ограничивать подвижность створок. По нашему мнению, склеротические изменения хорд возникают без предшествующего тромбообразования, в порядке прогрессирующего их склероза и утолщения, так же как это наблюдается в клапанах при фиброзном эндокардите. При микроскопическом исследовании оказывается, что утолщение хорд идет за счет разрастания субэндотелиальной, т. е. эндокардиальной, ткани хорды, фиброзная же ось последней остается без особых изменений. Спаяние хорд происходит не в результате их прямого слипания, например, с помощью межхордальных тромбов и последующей организации этих тромбов, а таким образом, что гиперпластический и склеротический процессы переходят субэндотелиально с края клапана на прикрепляющиеся к нему хорды, постепенно сглаживая (суживая) межхордальные пространства. Склерозы нередко распространяются и на концы папиллярных мышц. Эндокардиты сопровождались кровоизлияниями в вещество клапана.

Пороки клапанов своим следствием имеют расстройства кровообращения. Видимо, они наступают не сразу, а им предшествует длительный период компенсированного порока за счет гипертрофии сердечной мышцы и, в первую очередь, правого желудочка. Со временем фаза компенсированного порока переходит в фазу декомпенсации, при которой наступает расширение сердца, обусловленное атрофическими изменениями мышечных волокон.

Шаровидное с закругленной верхушкой и расширенными полостями сердце, дряблая пестроватая на разрезе и неравномерного кровенаполнения мышца сердца – признаки текущего тяжелого миокардита. Но эта картина у собак редкая и мы при дирофиляриозе её не наблюдали. По внешнему виду миокардит трудно отличить от миокардозов. В связи с этим проводили гистологическое исследование миокарда. При белково-жировой дистрофии обнаруживали следующие гистологические изменения. Мышечные волокна увеличиваются, набухают, цитоплазма становится мутной, богатой белковыми гранулами, поперечнополосатая исчерченность миофибрилл исчезает, ядра миоцитов темные (рисунок 46).

Рисунок 46 Миокард собаки при дирофиляриозе. Белково-жировая дистрофия. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Почти все патологические процессы в организме сопровождаются различными морфологическими изменениями в легких. Эти изменения часто незаметны невооруженным взглядом, а во многих случаях настолько стандартны и неспецифичны, что этиологическую и патогенетическую дифференциальную диагностику провести очень трудно. Тем не менее, предположительный диагноз можно установить при вскрытии. Это необходимо делать на основании комплекса изменений, обнаруженных в легких и других органах и системах организма. Предположение подкрепляется дальнейшими исследованиями с привлечением гистологических и других методов.

У части собак, имевших большое количество дирофилярий не только в правом желудочке, но и в правом предсердии, непосредственной причиной смерти была остановка дыхания и макроскопические признаки венозной гиперемии и отека легких. При этом серозная жидкость из просветов альвеол и бронхиол поступает в бронхи и трахею, и тогда при разрезе последних в них выступает молочного или соломенного цвета пенистая жидкость. Легкие с поверхности красноватые, иногда с синюшным оттенком, крепитируют, а с поверхности разреза их стекает кровянисто-пенистая жидкость (транссудат, смешанный с воздухом и окрашенный кровью, вытекающей из перерезанных кровеносных сосудов).

Гистологически при застойной гиперемии и отеке легких обнаруживали расширенные и переполненные капилляры межальвеолярных перегородок и вен междольковой соединительной ткани. При этом уже под малым увеличением микроскопа можно видеть, что строение легкого сильно изменено. Просветы альвеол и бронхиол частично или целиком заполнены розоватой или серо-розоватой пленкой, а вены и респираторные капилляры сильно налиты кровью (рисунок 47).

Рисунок 47 Легкие собаки при дирофиляриозе. Застойная гиперемия и отек.

Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

При большем увеличении видны неравномерно расширенные капилляры, которые местами четкообразно вдаются в просвет альвеол и придают альвеолярным перегородкам утолщенный вид. В легком отечная жидкость в значительном количестве обнаруживается в альвеолах. Белок транссудата заметен в альвеолах в виде гомогенной бледно-розовой пленочки или в виде мельчайшей зернистости, выполняющей просветы альвеол целиком или частично. В последнем случае пленочка транссудата содержит воздух в виде неокрашенных, различной величины ячеек. Некоторые альвеолы почти целиком заполнены воздухом, а транссудат только узкой полоской располагается около альвеолярных перегородок. Клеточных элементов в транссудате мало, обычно в нем находят немного эритроцитов, единичные лимфоциты, нейтрофильные лейкоциты и слущенные клетки альвеолярного эпителия. Одновременно с этим отекает и соединительная ткань около кровеносных сосудов, бронхов и между дольками, что вызывает там набухание и утолщение коллагеновых волокон.

При крупозной пневмонии в участках легкого темно-красного цвета установили, что сосуды легкого, особенно капилляры легочных перегородок, сильно расширены и заполнены кровью. Растянутые капилляры извилисты и резко очерчивают границы отдельных альвеол, местами они почковидно, или в виде узлов, вдаются в полость альвеол, сужая их просвет (рисунок 48). Просветы альвеол, альвеолярных ходов и мелких бронхов заполнены экссудатом. При большом увеличении экссудат в виде войлокообразной, сетчатой или нитчатой массы (фибрин), окрашенный в розовый цвет. В экссудате много эритроцитов с примесью полиморфно-ядерных лейкоцитов и слущенных клеток альвеолярного эпителия, находящихся в состоянии дистрофии (рисунок 49). Последние определяются по бледно окрашенным пузырьковидным ядрам и слабо выступающим контурам цитоплазмы округлой и овальной пластинчатой формы. Количество выпавшего фибрина в альвеолах неодинаково.

Рисунок 48 Легкие собаки при дирофиляриозе. Крупозная пневмония. Стадия прилива. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 49 Легкие собаки при дирофиляриозе. Крупозная пневмония. Стадия прилива. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

В одних альвеолах он образует сплошную сетку, в других – различают лишь отдельные переплетающиеся волоконца. В тех альвеолах, которые сплошь заполнены эритроцитами, фибрин не обнаруживается. Встречаются альвеолы, содержащие серозный экссудат. В просветах альвеолярных ходов и мелких бронхов фибринозный экссудат в таком же виде, как и в альвеолах (рисунок 50). В интерстициальной соединительной ткани видна сильная инфильтрация серозно-клеточным и фибринозно-клеточным экссудатом, вследствие чего границы коллагеновых пучков очень расширены и разволокнены. Лимфатические сосуды и щели, заложенные в интерстициальной, периваскулярной и перибронхиальной соединительной ткани, сильно расширены и переполнены фибринозным экссудатом.

Отмечается картина фибринозного плеврита.

В участках легких серого цвета и плотной консистенции (серая гепатизация) воспалительная гиперемия не выражена. Капилляры альвеолярных перегородок сдавлены, запустевшие (рисунок 51). Сами альвеолярные перегородки утончены, анемичны. Просветы альвеол растянуты скопившимся в них экссудатом, богаты лейкоцитами. В участках, где альвеолы переполнены экссудатом, содержащим особенно много лейкоцитов, границы альвеол неясно выражены вследствие интенсивной окраски гематоксилином содержимого и сдавливания капилляров альвеолярных перегородок. При большом увеличении видны волокна фибрина, заполняющего просветы альвеол, тянущиеся из одной альвеолы в другую через коновские поры. В экссудате наряду с многочисленными лейкоцитами обнаруживают в том или ином количестве клетки альвеолярного эпителия, эритроцитов не видно (рисунок 52).

Гнойная пневмония у собак с дирофиляриозом характеризуется инфильтрацией гнойным экссудатом стенок бронхов, перибронхиальной соединительной ткани, с гнойным расплавлением пораженных участков паренхимы легкого.

Рисунок 50 Легкие собаки при дирофиляриозе. Крупозная пневмония. Стадия красной гепатизации. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 51 Легкие собаки при дирофиляриозе. Крупозная пневмония. Стадия серой гепатизации. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Под малым увеличением микроскопа сильно выражены воспалительная гиперемия. Просветы бронхов и альвеол заполнены гнойным экссудатом (рисунок 53). В участках, где альвеолы заполнены экссудатом, структура ткани легкого не различается (рисунок 54). При большом увеличении экссудат, содержащийся в просветах бронхов, состоит преимущественно из полиморфноядерных лейкоцитов (рисунок 55).

Слизистая оболочка бронхов утолщена, инфильтрирована полиморфноядерными лейкоцитами, покровный эпителий местами полностью десквамирован. Перибронхиальная соединительная ткань также инфильтрирована лейкоцитами. Альвеолы в пораженных участках заполнены гнойным экссудатом. Экссудат в альвеолах, располагающихся вокруг пораженных участков, серозный. Стенки альвеол утолщены вследствие сильного расширения проходящих в них капилляров, в просветах которых среди эритроцитов много полиморфных лейкоцитов (рисунок 56).

Рисунок 52 Легкие собаки при дирофиляриозе. Крупозная пневмония. Стадия серой гепатизации. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 53 Легкие собаки при дирофиляриозе. Гнойная пневмония. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 54 Легкие собаки при дирофиляриозе. Гнойная пневмония. Участок некроза. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 55 Легкие собаки при дирофиляриозе. Гнойно-катаральная пневмония. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 56 Легкие собаки при дирофиляриозе. Гнойно-катаральная пневмония. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

У одной собаки установили интерстициальную пневмонию, характеризующуюся развитием воспаления в межальвеолярной легочной интерстиции (пневмонит). Подобные процессы закономерно развиваются на фоне гипертонии малого круга кровообращения, гипертрофии правого сердца и сердечно-легочной недостаточности. При этом диагностировали инфильтрацию интерстиция альвеол, альвеолярных ходов, стенок респираторных и терминальных бронхиол нейтрофилами, лимфоцитами, макрофагами, плазматическими клетками (рисунок 57). Все это ведет к утолщению альвеолярного интерстиция и сдавливанию капилляров. В некоторых участках, с более выраженной инфильтрацией альвеолярного интерстиция, обнаруживали повреждения альвеолярных структур – разрушение эндотелия и эпителия, эластических волокон (рисунок 58). В этих участках поражаются крупные сосуды и периваскулярная ткань. В интерстиции альвеол усиливается образование коллагеновых волокон, развивается диффузный пневмофиброз.

Печень – главная химическая фабрика, вырабатывающая многие необходимые для жизнедеятельности организма вещества: белки, в том числе участвующие в иммунных процессах, в сложной системе свертывания крови, желчь, необходимую для нормального пищеварения. Одни заболевания оставляют характерные следы в печени, которые обнаруживаются микроскопически. Но в большинстве случаев, патологические процессы можно дифференцировать лишь с учетом результатов микроскопического исследования.

У части собак обнаруживали острое полнокровие печени, что характерно для эмболии легочной артерии гельминтами. При этом печень на разрезе влажная, темно-красно-коричневая, с поверхности разреза стекало немного крови. Заметны полнокровные центры долек. Капсула напряжена, край закруглен. Однако увеличение печени при остром полнокровии незначительно.

Рисунок 57 Легкие собаки при дирофиляриозе. Интерстициальная пневмония. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 58 Легкие собаки при дирофиляриозе. Интерстициальная пневмония. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

При острой венозной гиперемии центральные вены и впадающие в них внутридольковые капилляры сильно расширены и заполнены кровью. На периферии долек, ближе к междольковой соединительной ткани, гиперемия выражена слабо или отсутствует (рисунок 59). Балки в центре долек более или менее истончены и раздвинуты друг от друга, а в отдельных дольках как бы распались на группы клеток. Границы печеночных клеток неотчетливы, а их ядра в основной массе уменьшены, темной окраски, и часть их имеет неровные, зубчатые контуры – состояние пикноза. В печеночных клетках иногда можно обнаружить желто-коричневые или бурые зернышки пигмента липофусцина, что объясняется длительным нарушением в них обмена веществ. Цитоплазма печеночных клеток средней и периферической части долек часто содержат неокрашенные ячейки, соответствующие каплям жира (рисунок 60).

При хроническом венозном застое, связанном преимущественно с сердечной недостаточностью, при пассивной гиперемии печень либо нормальной величины, либо слегка увеличена. Поверхность ее чуть шероховата. А на разрезе ткань имеет типичный вид мускатной печени, т.к. рисунком похож на срез мускатного ореха. Полнокровные темно-красные центры долек, иногда значительно расширенные, частью сливающиеся между собой, окружены светло-коричневой или желтой каемкой.

При очень длительном и выраженном застое развивается фиброз паренхимы, утолщение капсулы, но истинный цирроз не развивается, т.к. смерть наступает раньше. Макроскопически печень в этой стадии до некоторой степени сохраняет мускатный рисунок; в то же время она более плотной консистенции и может быть несколько уменьшена в объеме - застойный цирроз печени. Уплотнение печени обусловлено разрастанием в ней соединительной ткани. Степень уплотнения является показателем давности процесса.

Рисунок 59 Печень собаки при дирофиляриозе. Острая застойная гиперемия. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 60 Печень собаки при дирофиляриозе. Острая застойная гиперемия. Липофанероз гепатоцитов. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Гистологически при хроническом застое устанавливали, что в центре долек кровь почти отсутствует. Периферия же долек, наоборот, полнокровна, и здесь можно видеть остатки сохранившихся печеночных балок (рисунок 61). Отмечает утолщение стенок центральных и сублобулярных вен и разрастание вокруг них волокнистой соединительной ткани. Просветы этих вен несколько спавшиеся. В одних из них содержится еще немного крови, а другие запустевшие. Между дольками вокруг триад повышенное количество волокнистой соединительной ткани (рисунок 62). Коллагеновые волокна постепенно стягивают внутридольковые капилляры и центральные вены, приводят их к запустению, отчего гиперемия заметна в основном только на периферии долек (рисунок 63). Разращение соединительной ткани отмечают также вокруг долек, главным образом по ходу суб- и интралобулярных вен. Сохранившиеся на периферии долек печеночные клетки и эндотелий сосудов содержат пылевидные, коричневатого цвета зернышки пигмента гемосидерина, образование которого явилось следствием гемолиза (рис. 64).

У некоторых собак с хроническими заболеваниями диагностировали бурую атрофию печени. При этом находили, что общая структура печеночной ткани сохранена. Хорошо различаются границы долек и балочное расположение печеночных клеток. Сами же дольки уменьшены, и количество их в одном поле зрения больше, чем в норме. Обращает на себя внимание уменьшение в объеме печеночных клеток, преимущественно в центрах долек, в окружности центральной вены. Печеночные балки здесь истончены, радиальное расположение их нарушено. Печеночные клетки не полигональной, как обычно, а неправильно округлой или овальной формы. Ядра печеночных клеток также уменьшены и красятся темнее. В цитоплазме атрофированных клеток обнаружили много (особенно в центре долек) мелких желтовато-бурых зерен пигмента липофусцина. Липофусцин в виде мельчайших зернышек располагается в цитоплазме печеночных клеток вокруг ядра (рисунок 65).

Рисунок 61 Печень собаки при дирофиляриозе. Хроническая застойная гиперемия. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 62 Печень собаки при дирофиляриозе. Хроническая застойная гиперемия. Фибропластические процессы. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 63 Печень собаки при дирофиляриозе. Хроническая застойная гиперемия. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 64 Печень собаки при дирофиляриозе. Хроническая застойная гиперемия. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 65 Печень собаки при дирофиляриозе. Хроническая застойная гиперемия. Липофусцин в цитоплазме гепатоцитов. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

У одной собаки диагностировали увеличение печени в объеме. Поверхность её была гладкая, консистенция плотная, поверхность разреза слегка зернистая, дольчатость сглажена, окраска красновато-серая. При малом увеличении микроскопа отмечали, что балочное строение долек печени отсутствует, и только отдельные клетки паренхимы или группы их разбросаны беспорядочно среди вновь образованной ткани (рисунок 66). Дольчатость печени нарушена (рисунок 67), за исключением тех участков, где внутренняя часть долек изменена гораздо меньше. При большом увеличении видно, что клеточный состав вновь образованной соединительной ткани представлен лимфоидными, эпителиоидными клетками и гистиоцитами (рисунок 68). Клетки паренхимы имели самую разнообразную форму и величину (рисунок 69). Многие из них содержат одно очень крупное интенсивно окрашенное ядро, а некоторые клетки 2-3 и более ядер.

Рисунок 66 Печень собаки при дирофиляриозе. Гипертрофический цирроз. Грубоволокнистая соединительная ткань. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 67 Печень собаки при дирофиляриозе. Гипертрофический цирроз. Дискомплектация органа. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 200.

Рисунок 68 Печень собаки при дирофиляриозе. Гипертрофический цирроз.

Лимфоидные, эпителиоидные клетки и гистиоциты в соединительной ткани. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 69 Печень собаки при дирофиляриозе. Гипертрофический цирроз. Гипертрофия гепатоцитов. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Таким образом, характерным является разрастание тонко-волокнистой соединительной ткани между дольками и внутри их, что приводит к сильному увеличению органа в объеме, что можно рассматривать как гипертрофический цирроз.

У 43,5% при патоморфологическом исследовании обнаруживали гломерулонефрит. Это в несколько раз чаще, чем у не инвазированных собак. Известно, что в развитии этой патологии большое значение имеют факторы, повреждающие эндотелий и нарушающие кровообращение в сосудистом аппарате почек, прежде всего в клубочках. Таким фактором являются микрофилярии циркулирующие в кровеносных сосудах и являющиеся микроэмболами. Хорошо известно, что особенности микроциркуляторной системы почек способствуют задержке этих эмболов и развитию гломерулонефрита.

При патологоанатомическом вскрытии обнаруживали следующие признаки патологии почек, которую конкретизировали при гистологическом исследовании. У некоторых собак почки увеличены, тестоватой консистенции, капсула легко снимается, поверхность разреза повышенно влажная. Граница коркового и мозгового вещества стертая. Корковый слой расширен, в нем видны полупрозрачные клубочки, до 1 мм в диаметре. Иногда почки по объему близки к норме или даже уменьшены. Капсула снимается с трудом. Поверхность почки тусклая, несколько сморщенная. На разрезе корковый слой уменьшен в размере и бледнее окрашен. Могут быть видны серо-белые тяжи соединительной ткани.

При гистологическом исследовании установили острый серозный гломерулонефрит (рисунок 70). При этом сосуды органа переполнены кровью. В полости канальцев и капсулы Шумлянского-Боумена содержится серозный экссудат в виде гомогенной массы бледно-розового цвета. Полость капсулы растянута, а сосудистые клубочки уменьшены в объеме. Эпителий канальцев в состоянии зернистой дистрофии и некроза. В последних участках ядра в состоянии кариолизиса. Вокруг клубочков и между канальцами видны юные клетки соединительной ткани (полибласты, фибробласты). Признаки разрастания соединительной ткани отсутствуют. При подостром гломерулонефрите появляются признаки разрастания соединительной ткани и снижение экссудативного компонента воспалительной реакции (рисунок 71).

При хронической форме гломерулонефрита отмечали слабовыраженную сосудистую реакцию, преобладание альтеративных и пролиферативных изменений. Эпителий канальцев с зернистой цитоплазмой (зернистая дистрофия) или с пикнотичными ядрами (некроз). Вокруг раздвинутых клубочков и канальцев грубоволокнистая соединительная ткань.

У некоторых животных разрастание грубоволокнистой соединительной ткани преобладает, в результате чего клубочки и канальцы находятся на значительных расстояниях – раздвинуты соединительнотканными тяжами (рисунок 72). Просвет канальцев разного размера: в отдельных участках несколько расширен, в других - сужен. Эпителий канальцев в состоянии белково-жировой дистрофии. Капсула органа утолщена, особенно в участках разрастания соединительной ткани. Наряду с лимфоидными клетками имеются фибробласты. Тонковолокнистая соединительная ткань переходит в утолщенные коллагеновые волокна, что характерно для интерстициального нефрита (рисунок 73).

Рисунок 70 Почка собаки при дирофиляриозе. Острый серозный гломерулонефрит. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 71 Почка собаки при дирофиляриозе. Подострый интракапиллярный гломерулонефрит. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

Рисунок 72 Почка собаки при дирофиляриозе. Хронический гломерулонефрит. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 100.

Рисунок 73 Почка собаки при дирофиляриозе. Хронический гломерулонефрит. Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение 400.

2.2.6Оценка терапевтической эффективности микрофилярицидных

препаратов при дирофиляриозе собак

В связи с тем, что терапия, направленная на уничтожение половозрелых паразитов имеет ряд серьезных недостатков (высокая токсичность препаратов, аллергическая реакции, эмболия сосудов мертвыми паразитами), данная терапия не проводилась. Для уничтожения личинок проводилась микрофилярицидная терапия – уничтожение личинок проводится с целью устранения повреждающего действия микрофилярий на органы и ткани организма и недопущения заражения других собак.

Микрофилярицидное действие препаратов изучали на собаках, спонтанно зараженных дирофиляриозом условно распределенных на 3 группы животных. В первой группе применяли препараты ивермектина («Отодектин», «Ивермек») подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного. Ивермектин применяли в форме 1%-го раствора для крупных собак («Ивермек») и в форме 0,1%-го раствора («Отодектин») для мелких и средних собак, подкожно область холки с соблюдением правил асептики и антисептики.

Ивермектин, входящий в состав этих препаратов, обладает выраженным противопаразитарным действием на личиночные и половозрелые фазы развития нематод желудочно-кишечного тракта и легких, личинки подкожных, носоглоточных, желудочных оводов, вшей, кровососок и саркоптоидных клещей, усиливает выработку нейромедиатора торможения – гамма-аминомаслянной кислоты, что приводит к параличу и гибели паразита. После парентерального введения препарата ивермектин быстро всасывается из места инъекции и распределяется в органах и тканях животного, обеспечивая паразитоцидное действие в течение 10-14 дней. Выводится из организма с мочой и желчью. По степени воздействия на организм, согласно ГОСТ 12.1.007-76, «Ивермек» относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности), действующее вещество (ивермектин) — относится к чрезвычайно опасным веществам (1 класс опасности). В рекомендуемых дозах препарат не оказывает эмбриотоксического, тератогенного и мутагенного действия. Во внешней среде быстро разрушается.

Во второй группе применяли препараты мильбемицина

(«Мильбемакс») в дозе 2,0 мг/кг орально. Мильбемицин применяли орально в виде таблеток «Мильбемакс» содержащих 16 мг мильбемицина оксима и 40 мг празиквантела.

Мильбемицина оксим, входящий в состав препарата, относится к группе макроциклических лактонов, выделяемых в результате ферментативной деятельности Streptomyces hygroscopkus var. aureolacrimosus, активен в отношении личинок и имаго нематод, паразитирующих в желудочно-кишечном тракте собак, а также личинок нематоды Dirofilaria immitis. Механизм действия мильбемицина обусловлен повышением проницаемости клеточных мембран для ионов хлора (Cl), что приводит к сверхполяризации мембран клеток нервной и мышечной ткани, параличу и гибели паразита. Максимальная концентрация мильбемицина оксима в плазме крови собак достигается в течение 2-4 часа, биодоступность составляет около 80 %. Из организма соединение выводится в основном в неизмененном виде. «Мильбемакс» таблетки для собак по степени воздействия на организм относятся к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76), в рекомендуемых дозах не оказывают сенсибилизирующего, эмбриотоксического и тератогенного действия, токсичны для рыб и других гидробионтов.

В третьей группе применяли препараты селамектина («Стронгхолд») дозе 6,0 мг/кг наружно в виде капель на холку. Селамектин применяли в виде раствора для наружного применения с содержанием 6% или 12 % селамектина (капли на холку). Противопаразитарный препарат широкого спектра действия. Селамектин обладает широким спектром системного нематодоцидного, инсектицидного и акарицидного действия, активен в отношении нематод, насекомых и саркоптоидных клещей, паразитирующих на собаках и кошках. Обладает ларвицидными и овоцидными свойствами. Фармакокинетические свойства «Стронгхолда» обеспечивают хорошее всасывание селамектина с места нанесения, длительное сохранение в терапевтических концентрациях в органах и тканях животного, что обеспечивает уничтожение паразитов и защиту животных от реинвазии в течение месяца. Механизм действия лекарственного средства заключается в способности селамектина, связываться с рецепторами клеток (мышечной и нервной ткани) паразитов, увеличивать проницаемость мембран для ионов хлора, что приводит к блокаде проводимости нервных и мышечных клеток нематод и членистоногих, их параличу и гибели.

В рекомендуемых дозах «Стронгхолд» безопасен для собак и кошек благодаря тому, что у млекопитающих эти рецепторы локализованы только в ЦНС, а селамектин не проникает через ГЭБ. Хорошо переносится кошками и собаками разных пород (включая колли и их помеси). «Стронгхолд» по степени воздействия на организм относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76): ЛД₅₀ селамектина для мышей при введении в желудок составляет 1600 мг/кг, в рекомендуемых и 10-кратных терапевтических дозах не обладает местно-раздражающим, резорбтивнотоксическим и сенсибилизирующим действием.

В группах использовали собак разного возраста и пород, спонтанно зараженных микрофиляриями. Каждая группа собак состояла из 20 животных. Подбор животных в группы проводили по наличию микрофилярий в поле зрения микроскопа, число которых было от 3 и более. Предварительных мероприятий перед проведением микрофилярицидной терапии (антигистаминные препараты, антикоагулянты и др.), рекомендуемые многими ветеринарными специалистами, не проводилось. В день проведения терапии собаки освобождались от физических нагрузок и находились под наблюдением ветеринарного врача на протяжении 5-8 часов. Учет эффективности препаратов проводили путем исследования проб крови до применения препарата и через 1, 2, 7, 14, 21, 28 суток после применения препарата. Кровь исследовали методом обогащения по Кнотту. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью непараметрического критерия знаков-z. Этот критерий относится к группе ранговых критериев, его применяют для проверки нулевой гипотезы при сравнении друг с другом выборок выражающимися не числами, а знаками. Большое число однозначных разностей служит в качестве фактически найденной величины z-критерия знаков. Результаты представлены в таблице 7.

Таблица 7 Эффективность микрофилярицидных препаратов при дирофиляриозе

Группа собак	Промежуток препарата, сутки.		исследования,		после	применения
Группа собак	1	2	7	14	21	28	35
1 (ивермектин)	-*	0	0	0	0	0*	+
2 (мильбемакс)	-*	0	0	0	0	0*	+
3 (селамектин)	-	-*	+	+	+	+	+

Результаты выражали следующим образом: (-) – снижение количества микрофилярий в поле зрения микроскопа; (0) – отсутствие микрофилярий в крови; (+) – выявление микрофилярий.

* – достоверная разница с последующей выборкой.

Таким образом, видно, что ивермектин и мильбемицин обладает пролонгированным действием на микрофилярии. Длительное применение данных препаратов с интервалом 30-35 дней губительно действует на микрофилярии, не допускает заражение других собак и предотвращает распространение инвазии.

Все собаки после проведенного лечения чувствовали себя хорошо, никаких отклонений не выявлено. У одной собаки образовались множественные ограниченные припухлости, при вскрытии которых обнаруживались живые гельминты.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Значение служебного собаководства для человечества трудно переоценить. Сдерживающим фактором развития собаководства являются болезни собак, приносящие значительный экономический ущерб. Некоторые их этих заболеваний являются опасными для человека. К таким болезням относится дирофиляриоз. У плотоядных встречаются и описаны несколько видов дирофилярий, среди которых наибольшее распространение получили два –

Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens.

В настоящее время многие регионы Российской Федерации эндемичны по дирофиляриозу и это заболевание продолжает распространяться на территории где раньше дирофиляриоз не регистрировался. По мнению Бескровной Ю.Г. [17] главным факторов распространения этого дирофиляриоза является миграция зараженных животных, в крови которых присутствуют микрофилярии. Повсеместное распространение комаров делает возможность передачи дирофиляриоза практически везде, где присутствуют больные собаки. Артамонова А. А. [9] проводя исследования в г. Ростов-на-Дону установила 30% зараженность собак дирофиляриями, по данным Серебряковой Н. В. [81] зараженность собак в том же регионе составляет до 28,0%, в Ростовской области до 31,5% по данным Нагорного С.А. [60]. В Республике Калмыкия по данным Архиповой Д.Р. [14] инвазированность собак, содержащихся в городских условиях составила 18.5%, собак, содержащихся в сельской местности составила 23.6%. В Московской области Ястреб В.Б. [111] указывает на зараженность от 5,0% обследованного поголовья собак в 2003 году и до 2,3 % в 2007 году. Медведев А. Ю. [56] в своих исследованиях указывает на выявление зараженных собак в Краснодарском крае от 17,52% холодное время года до 42,56% в теплое время года. В Волгоградской области Шинкаренко А.Н. и Петров Ю.Ф. [103] сравнивали зараженность собак дирофиляриями, в городе собаки инвазированы на 8,2%, а в области - 10,8%. В Самарской области по данным Салимова В.А. [80] интенсивность инвазии достигает 60%. По данным Управления ветеринарии Самарской области поражение дирофиляриозом собак в г. Самаре в период с 2005 по 2010 гг. составляет от 13,9 до 51,8%. Мезенцев С.В. [57] указывает на пораженность собак дирофиляриозом в г. Барнауле 2008-2012 от 5,0 до 19,2 %. Аракелян Р.С. [7] в Астраханской области установил, что инвазированность собак дирофиляриями составляет 10,9%. Распространение дирофиляриоза приводит к угрозе здоровью людей, подтверждением этому является Письмо Роспотребнадзора от 09.09.2013 № 01/10330-13-32 - «О ситуации по дирофиляриозу в Российской Федерации», по данным этого письма дирофиляриоз человека зарегистрирован в 53 субъектах РФ, из них 29 в Европейской части России. Для дирофиляриоза характерна очаговость распространения. Очаги дирофиляриоза выявлены у жителей в Московской, Рязанской, Тамбовской, Тульской, Воронежской, Липецкой, Челябинской, Новосибирской, Тюменской областях, в Алтайском крае, Республиках Башкортостане, Марий-Эл и Татарстане.

Нами впервые в период с 2009 по 2011 годы проведены комплексные исследования по выявлению дирофиляриоза собак на территории Республики Башкортостан, а также проведены исследования собак, прибывающих в Уфимскую школу по подготовке специалистов-кинологов МВД России из разных регионов Российской Федерации. Полученные данные свидетельствуют о широком распространении дирофиляриоза в Республике Башкортостан, а также практически во всех регионах Российской Федерации. Установлен дирофиляриоз у собак, прибывших из регионов в которых ранее данное заболевание не регистрировалось, к примеру, Пензенская область, Республика Марий Эл, Саратовская область, ХМАО, Пермский край,

Челябинская область, Республика Адыгея, Республика Саха-Якутия, Свердловская область, Иркутская область, Орловская область, Курская область, Республика Хакасия. Зараженность среди собак достигает 25-30%, а среди собак, содержащихся в вольерах, без проведения профилактических мероприятий достигает 90%. Таким образом, наши данные не только подтверждают высокую степень инвазии в Республике Башкортостан, но и указывают на широкую распространенность дирофиляриоза на территории Российской Федерации.

В последнее время появляются сообщения о регистрации дирофиляриоза во многих регионах Российской Федерации. В Рязанской области Андреянов О.Н. [6], в республике Якутия Андреева М.В. (2013) [5], в Алтайском крае С.В. Мезенцев (2013) [57], в Волгоградской области Романова М.В. и соавторы (2013) [78], в Амурской области Александрович Е.В и соавторы (2012) [4]. Публикации данных авторов еще раз подтверждают наши исследования о широкой распространенности дирофиляриоза во многих регионах России.

Методы диагностики, использованные нами в диссертационной работе, апробированы разными исследователями в своих научных работах. Архипова Д.Р., Архипов И.А. [14] применяли в своих исследованиях прямое исследование крови. По мнению данных авторов, данный метод приемлем только в случаях, когда интенсивность инвазии микрофилярии в крови достаточно высока.

Метод Кнотта [147] предложенный Knott J.X. в 1939 году с использованием свежей крови и раствора уксусной кислоты и усовершенствованный метод Кнотта который предложили W.L. Newton, W.H. Wright [166], с использованием 2%-ного раствора формалина используется многими специалистами в своих исследованиях Ярошенко Н.В. [106], Ястреб В.Б. [108], Винокурова Д.П. [30], Архипова Д.Р. [13]. Усовершенствованный метод Кнотта самый надежный, быстрый и дешевый метод для выявления микрофиляремии у собак по нашему мнению является самым оптимальным. Недостатком этого метода является отсутствие возможности дифференциации паразита.

В некоторых случаях нами дополнительно использовали метод обнаружения микрофилярий в нативной сыворотке. Для этого несколько миллилитров венозной крови помещали в чистую пробирку центрифугировали 5-10 мин при 1,5-2,7 тысяч об/мин, пипеткой аспирировали несколько капель сыворотки на предметное стекло, микроскопия при малом увеличении в 40-100 раз при опущенном конденсоре. Результат: живые микрофилярии, хорошо заметны по активному движению. Преимуществом данного метода является сохранение подвижности микрофилярий в сыворотке крови при комнатной температуре до трех суток. Данный метод редко используется в практике, в наших исследованиях он использовался с целью выделения и фиксации микрофилярий для дальнейшей окраски и дифференциации.

Для дифференциации D. immitis от D. repens нами использовался метод окрашивания на кислую фосфотазу, для этого используется набор для цитохимического окрашивания препаратов красного костного мозга на кислую фосфатазу «ДиахимЦитоСтейн-КФ». Данный метод позволяет довольно точно дифференцировать микрофилярий до вида, на это указывают в своих работах Петренко О.Ф. [67], Величко С.В. [28] и соавторы. Недостатком данного метода является его большая трудоемкость и высокая стоимость реактивов.

Во всех случаях для дифференциации D. immitis от D. repens мы использовали одношаговый экспресс-тест для выявления сердечных гельминтов – дирофилярий (Dirofilaria immitis) методом иммунохроматографии. Этот метод очень широко используется для диагностики инвази Dirofilaria immitis у собак разными исследователями Коллодий И.В. [46], Бойко В.П. [22] и др.

В наших исследованиях мы использовали бесприборные экспресс - тесты для диагностики зараженности собак Dirofilaria immitis производства Dignostica Fennica (Финляндия) и VetExpert - BioNote Inc. (Южная Корея).

Данный метод является наиболее быстрым и точным для выявления Dirofilaria immitis, специфичность и точность составляет 100%.

Методы диагностики дирофиляриоза, основанные на обнаружении микрофилярий, достаточно эффективны и просты в выполнении, но не позволяют провести дифференциацию вида паразита. Для этого необходимо применять более сложные методики, основанные на иммуноферментном анализе, полимеразно-цепной реакции или использовать выпускаемые для этого экспресс-тесты.

Клинические признаки дирофиляриоза выявляются у собак старше пятилетнего возраста. Лечение таких животных осложнено, зависит от степени развития патологических процессов в сердце и других органах, и часто не эффективно. Степень проявления симптомов дирофиляриоза зависит от нескольких факторов: количества дирофилярий, продолжительности заболевания, локализации гельминтов, вторичных изменений в органах А. И. Мазуркевич [55] выделил 4 основных течения дирофиляриоза: интоксикационный, кожный, псевдоопухолевый и правожелудочковую недостаточность.

Ястреб В.Б. [111] предлагает условное разделение животных на группы в зависимости от клинических проявлений заболевания:

1.Субклиническая форма болезни.

2.Средняя степень тяжести заболевания (кардиопульмонарная болезнь с почечной недостаточностью)

3.Тяжелая форма болезни (кардиопульмонарная болезнь с тромбоэмболическими осложнениями, почечной и печеночной недостаточностью).

В нашей работе мы использовали предложенную Пульняшенко П.Р. [76] классификацию больных дирофиляриозом собак в зависимости от тяжести клинических проявлений:

Клинически здоровые животные – в крови обнаруживают микрофилярии, отмечается умеренная эозинофилия, биохимические показатели крови и результаты исследования мочи без изменений.
Животные с клиническими признаками дирофиляриоза – у собак отмечается быстрая утомляемость, вялость, отдышка, кашель, бледность слизистых оболочек, нарушение сердечного ритма. Возможны сопутствующие заболевания (дерматиты, конъюнктивиты, нефрит, гепатит, поражение центральной нервной системы, сердечные аритмии). При биохимическом исследовании крови наблюдается протеинемия, повышение уровня мочевины и кератинина, амилазы, общего и прямого билирубина. Морфологические показатели крови значительно изменены, отмечается выраженная эозинофилия, лейкоцитоз, нейтрофилёз, сдвиг формулы влево, редко – моноцитоз. При ультразвуковом исследовании органов брюшной полости визуализируют увеличение размеров печени, расширение печёночных вен, увеличение селезёнки, расширение почечных лоханок.
Животные зараженные дирофиляриозом с тяжёлыми поражениями всех органов и систем у таких животных диагностируется хроническая или острая сердечно-сосудистая недостаточность, почечная недостаточность, пиелонефрит, гепатоз, панкреатит, асцит, новообразования кожи и слизистых, поражение центральной нервной системы, парезы, судороги, пневмония, плеврит. Рентгенологические исследования позволяют диагностировать хроническое легочное сердце и наблюдать за динамикой его развития. В начальных стадиях легочного сердца у больных животных при рентгенографии в прямой и боковой проекциях отмечаются относительно небольшие размеры сердца, но уже можно выявить признаки гипертрофии путей оттока от правого желудочка: выбухание тени легочной артерии; расширение легочного ствола и его крупных ветвей, которое часто сочетается с сужением более мелких разветвлений и обеднением периферического сосудистого рисунка легких; расширение каудальной полой вены [46].

В наших исследованиях чаще всего наблюдали животных первой группы, на рентгенограмме отмечаются относительно небольшие увеличение тени сердца и незначительные признаки застойных явлений в легких.

Клинические показатели крови являются неспецифическими для данного заболевания, наша исследования выявили некоторые отклонения биохимических и клинических показателей от нормы у собак.

Нами было проведено 60 исследований крови собак, зараженных дирофиляриозом, для сравнения клинических и биохимических показателей крови с показателями собак свободных от дирофилярий. Практически в 100% случаев выявлено снижение количества эритроцитов и соответственно показателей гематокрита, эозинофилия выявлена у всех зараженных собак, количество лейкоцитов увеличено не более чем на 10-15% от нормы. Другие показатели крови либо не отличались от аналогичных показателей крови здоровых собак, либо имели очень незначительные отклонения.

Результаты патологоанатомического исследования собак свидетельствуют о том, что кардиопатология и изменения в других органах и тканях тесно коррелирует с количеством дирофилярий, обнаруженных в правом желудочке сердца. Установили, что при наличии единичных паразитов макроскопически выраженных изменений париетального и клапанного эндокарда правого желудочка, миокарда и висцеральной патологии не обнаруживали. Это состояние можно рассматривать не как заболевание, а как носительство паразитов. Такие животные, не имеют клинических признаков заболевания и могут представлять опасность, как источник инвазии для других собак. Это подтверждает наше предложение о необходимости лабораторного исследования всех собак, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков.

Наличие в сердце умеренного количества дирофилярий (до десяти экземпляров) приводит к хронической патологии эндокарда и миокарда в виде вальвулярного бородавчатого эндокардита асептического характера, очаговых склеротических изменений пристеночного эндокарда. Это ведет к первичной гипертрофии правого желудочка, с последующим эксцентричным расширением его полости, атрофии миокарда и развитием недостаточности кровообращения в малом круге, а также застойного полнокровия в паренхиматозных органах, а в дальнейшем может привести к привести к стенозу атриовентрикулярного и пульмонального отверстий. У 30% животных этой группы диагностировали пневмонии, развитие которых связано с наличием дирофилярий в правом желудочке сердца.

Салимов В.А. [79] также указывает на патологоанатомические изменения при хроническом течении дирофиляриоза, вальвулярные и периетальные эндокардиты, очаговый миокардиосклероз, поражение легких, печени и почек.

Винокурова Д.П. [30] в своих исследованиях отмечает у больных дирофиляриозом животных фибринозный эндокардит, расширение правой половины сердца, зернистую дистрофию миокарда. Венозное полнокровие и отек легких, альвеолярную эмфизему, очаговую катаральную бронхопневмонию, фибринозный плеврит. Белково-жировую и токсическую дистрофию печени и цирроз. В желудке и кишечнике катаральное воспаление, метеоризм, серозный лимфаденит брыжеечных и портальных лимфоузлов. В селезенке венозное полнокровие. В почках венозную гиперемию, белково-жировую дистрофию и некроз эпителия канальцев.

По нашим исследованиям сопутствующими заболеваниями при дирофиляриозе собак были: катаральный гастрит, энтерит и колит, панкреатит, острое расширение желудка. При этом, у некоторых собак наблюдалась кахексия, акцидентальная инволюция тимуса, метаплазия красного костного мозга, атрофия мозгового вещества надпочечников, анемия. D. repens паразитирует в подкожной клетчатке, что сопровождается гнойным воспалением и приводит к септикопиемии.

Ярошенко Н.В. [106] в своих работах указывает на аналогичные

патологии, обнаруженные при вскрытии собак: зернистую дистрофию печени и некрозы в печени, участки обызвествления в легком, катаральный дуоденит, инфаркты в селезенке, катаральная бронхопневмония и хронический гломерулонефрит, асцит.

Терапия, направленная на уничтожение половозрелых паразитов имеет ряд серьезных недостатков (высокая токсичность препаратов, аллергическая реакции, эмболия сосудов мертвыми паразитами, необходимость длительной и тщательной подготовки собаки к лечению и контроль состояния после проведенного лечения (смерть животного в случае начала лечения может наступить быстрее, чем без лечения).

Архипова Д.Н. [14] указывает на то, что оптимальным средством против взрослых дирофилярий является производное мышьяка - дигидрохлорид меларсомина, но важным недостатком применения данного метода терапии при поражении взрослыми дирофиляриями является опасность с тромбоэмболии крупных сосудов. Тиацетарсамид уничтожает только взрослые дирофилярии, начиная с 7 месяцев. Ястреб В.Б. [111] рекомендует для макрофилярицидной терапии дирофиляриоза абиктин 1 раз в месяц в дозе 0,05 мг/кг с кратностью применения в течение года. Применение меларсомина, по его мнению, вызывает сильную интоксикацию, что требует неотложной и реанимационной помощи и интенсивной терапии в стационарных условиях клиники.

Ярошенко Н.В. [106] предлагает для лечения дирофиляриоза сочетание левамизола с иммунопаразитаном. Серябрякова Н.В. [81] использовала ивермектин 0,2 мкг/кг веса животного 1 раз в неделю, фраксипарин 500 ЕД/кг веса животного один раз в день для лечения дирофиляриоза и каптоприл в дозе 25—2 мг/кг массы тела 3 раза в день.

По результатам изучения нами отечественных и зарубежных публикаций единственным доказано эффективным макрофилярицидным препаратом является меласормин, препарат «иммитицид» содержащий меласормин производитель Мериал, Франция на данный момент не зарегистрирован для применения в Российской Федерации, в связи с чем отсутствует возможность его применения. Учитывая все выше указанное нами не проводилась макрофилярицидная терапия.

Ястреб В.Б. [111] предлагает применение абиктина в дозе 0,05 мг/кг с 1 раз в 2 месяца в сезон активности. Архипов И.А. и Архипова Д.Р. [12], а также много других ученых указывают на высокую эффективность ивермектина. R.G. Clemence, P. Sarasola, C. Genchi [125] применяли селамектин и ивермектин на различных группах собак в дозах соответственно 6 мг/кг накожно и 6 мкг/кг перорально с месячным интервалом в период с мая по ноябрь. Применение мильбемицина оксима в дозе 0,5 мг/кг с интервалом в 1 месяц, начиная с 60 дня после экспериментального заражения D.immitis, в течении

продолжительног периода, полностью предотвращало развитие дирофилярий в организме собак [138].

Микрофилярицидное действие препаратов мы изучали на собаках, спонтанно зараженных дирофиляриозом условно распределенных на 3 группы животных.

В первой группе применяли препараты ивермектина (отодектин, ивермек) подкожно в дозе 0,2 мг действующего вещества на 1 кг массы животного. Ивермектин применяли в форме 1%-го раствора для собак крупных пород («Ивермек») и в форме 0,1%-го раствора («Отодектин») для собак мелких и средних пород, подкожно область холки с соблюдением правил асептики и антисептики.

Второй группе применяли препараты мильбемицина (Мильбемакс) в дозе 2,0 мг/кг орально. Мильбемицин применяли орально в виде таблеток мильбемакса содержащих 16 мг мильбемицина оксима и 40 мг празиквантела.

Третьей группе применяли препараты селамектина (Стронгхолд) дозе

6,0 мг/кг наружно в виде капель на холку. Селамектин применяли в виде раствора для наружного применения с содержанием 6% или 12 % селамектина (капли на холку).

Предварительных мероприятий перед проведением микрофилярицидной терапии (антигистаминные препараты, антикоагулянты и др.), рекомендуемые многими ветеринарными специалистами, не проводилось. В день проведения терапии собаки освобождались от физических нагрузок и находились под наблюдением ветеринарного врача на протяжении 5-8 часов. Все собаки после проведенного лечения чувствовали себя хорошо, никаких отклонений не выявлено.

По результатам наших исследований установлено, что ивермектин и мильбемицин обладает пролонгированным действием на микрофилярии. Длительное применение данных препаратов с интервалом 30-35 дней губительно действует на микрофилярии, таким образом, не допускает заражение других собак и предотвращает распространению дирофиляриоза. Используя приведенные выше данные нами разработаны и апробированы в подразделениях МВД РБ и РФ, ФТС РБ методы профилактики дирофиляриоза, позволяющие не допустить дальнейшее распространение инвазии.

ВЫВОДЫ

Полученные данные свидетельствуют о распространении дирофиляриоза практически во всех регионах Российской Федерации. В Республике Башкортостан зараженность среди служебных собак достигает 25-30%, а среди собак, содержащихся в вольерах, без проведения профилактических мероприятий достигает 90%.
Методы диагностики дирофиляриоза, основанные на обнаружении микрофилярий, достаточно эффективны и просты в выполнении, но не позволяют провести дифференциацию вида паразита. Для этого необходимо применять более сложные методики, основанные на полимеразно-цепной реакции,

иммуноферментном анализе, или использовать выпускаемые для этого экспресстесты.

Клинические признаки дирофиляриоза выявляются у собак старше пятилетнего возраста. Лечение таких животных осложнено, зависит от степени развития патологических процессов в сердце и других органах, и часто не эффективно.
Результаты патологоанатомического исследования собак свидетельствуют о том, что кардиопатология и изменения в других органах и тканях тесно коррелирует с количеством дирофилярий, обнаруженных в правом желудочке сердца. Установили, что при наличии единичных паразитов макроскопически выраженных изменений париетального и клапанного эндокарда правого желудочка, миокарда и висцеральной патологии не обнаруживали. Это состояние можно рассматривать не как заболевание, а как носительство паразитов. Такие животные, не имеют клинических признаков заболевания и могут представлять опасность, как источник инвазии для других собак. Это подтверждает наше предложение о необходимости лабораторного исследования всех собак, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков.
Наличие в сердце умеренного количества дирофилярий (до десяти экземпляров) приводит к хронической патологии эндокарда и миокарда в виде вальвулярного бородавчатого эндокардита асептического характера, очаговых склеротических изменений пристеночного эндокарда. Это ведет к первичной гипертрофии правого желудочка, с последующим эксцентричным расширением его полости, атрофии миокарда и развитием недостаточности кровообращения в малом круге, а также застойного полнокровия в паренхиматозных органах, а в дальнейшем может привести к привести к стенозу атриовентрикулярного и пульмонального отверстий. У 30% животных этой группы диагностировали пневмонии, развитие которых связано с наличием дирофилярий в правом желудочке сердца.
Локализация большого количества дирофилярий в правом желудочке сердца (до тридцати девяти) приводила к тому, что часть из них локализовалась в правом предсердии и легочной артерии и, как следствие, к развитию бородавчатого эндокардита трехстворчатого, реже полулунного клапанов. Пребывание паразитов, часто в виде сплетенных пучков, в легочной артерии сочеталось с застойным полнокровием или отеком легких. Сердечная и висцеральная патология при этом характеризовалась острой формой.
Сопутствующими заболеваниями при дирофиляриозе собак были: гломерулонефрит, катаральный гастрит, энтерит и колит, панкреатит, острое расширение желудка. При этом, у некоторых собак наблюдалась кахексия, акцидентальная инволюция тимуса, метаплазия красного костного мозга, атрофия мозгового вещества надпочечников, анемия. D. repens паразитирует в подкожной клетчатке, что сопровождается гнойным воспалением и приводит к септикопиемии.
«Ивермектин» и «Мильбемицин» обладают пролонгированным действием. Применение данных препаратов с интервалом 30-35 дней губительно действует на микрофилярии, что позволяет не допускать заражение других собак и предотвращает распространению дирофиляриоза. Разработаны и апробированы нами в подразделениях МВД РБ, ФТС методы профилактики дирофиляриоза, позволяющие профилактировать дальнейшее распространение инвазии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Сведения о распространении дирофиляриоза собак в Республике Башкортостан, клинико-морфологических проявлениях этого заболевания могут быть использованы при диагностике и разработке лечебнопрофилактических мероприятий в центрах кинологической службы. В связи с широким распространением дирофиляриоза рекомендуем проводить регулярный мониторинг инвазированности собак. При лабораторной диагностики этого заболевания у служебных собак рекомендуем применять метод обогащения по Кнотту в следующей модификации. Смешать в пробирке 1-2 мл венозной крови с 10 мл 2% раствора формалина. Центрифугировать смесь 5 минут при 1 тысяч оборотов в минуту. Надосадочную жидкость слить, небольшую каплю осадка поместить на предметное стекло, накрыть покровным стеклом и микроскопировать при малом увеличении микроскопа.

При подозрении на наличие дирофилярий у собак мы рекомендуем при вскрытии изменить обычный порядок осмотра внутренних органов. При вскрытии грудной полости провести внешний осмотр перикарда до извлечения внутренних органов. Затем, после извлечения всех органов единым комплексом, с тщательным сохранением межорганных связей и структуры аорты, осмотр внутренних органов начинать с сердца, не отделяя его от легких. После осмотра перикардкард и его вскрытия, исследовать состояние эпикарда. За внешним осмотром и измерением сердца следует провести вскрытие его полостей, начиная с легочной артерии, как можно ближе к легким, что позволяет установить степень проникновения гельминтов по сосуду в легкие и, наоборот, в правое предсердие и правый желудочек. В дальнейшем необходимо извлечь сердце для более тщательного исследования структур эндокарда.

Препараты «Ивермектин» и «Мильбемицин» обладают пролонгированным действием. Применение данных препаратов с интервалом 30-35 дней губительно действует на микрофилярии, что позволяет не допускать заражение других собак и предотвращает распространению дирофиляриоза.

Рекомендуем использовать материал диссертации при чтении лекций, проведении лабораторно-практических занятий со студентами специальности Ветеринария и в научно-исследовательской и инновационной деятельности лабораторий морфологического профиля, а также при написании соответствующих разделов справочных руководств по патоморфологии и инвазионным болезням плотоядных.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

Авдюхина, Т.И. Дирофиляриоз органа зрения: реестр и анализ 50 случаев в Российской Федерации и странах СНГ / Т.И. Авдюхина, А.Я.

Лысенко [и др.] // Вестник офтальмологии. - 1996. - Т.112, №3 - С. 35-

39.

Авдюхина, Т.И. Дирофиляриоз в странах СНГ: анализ случаев за 1915-

1996 годы / Т.И. Авдюхина, В.Г. Супряга, В. Ф. Постнова [и др.] // Мед.

паразитол. - 1997. - № 4. - С. 3-7.

Акбаев, М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных / М.Ш.

Акбаев. Москва: Колос, 1998. - 659 с.

Александрович, Е.В. Актуальность дирофиляриоза в Амурской области / Е.В. Александрович, А.А. Вахненко, А.С. Зайцев, О.А. Серга, Е.Ю. Недо-ступова // Вестник современной клинической медицины. - 2012. - №3. - С. 74-76.
Андреева, М. В. Дирофиляриоз в окресностях Якутска / М. В. Андреева// Вестник ветеринарии. - 2013. - вып. 65. №2(65). С. 16-18.
Андреянов, О. Н. Дирофиляриоз в Рязанской области/ О.Н. Андреянов // Российский ветеринарный журнал. - 2012. - №6. - С. 16-18.
Аракелян, Р.С. Эпидемиологические особенности дирофиляриоза на территории Астраханской области: дис. ... канд. мед. наук: 03.00.19 / Аракелян Рудольф Сергеевич. - М., 2008. - 140 с.
Артамонова, A.A. Локализация дирофилярий у человека в Ростовской области / A.A. Артамонова, В.Г. Бережная // Актуальные проблемы медицинской и ветеринарной паразитологии: Тез. докл. межд. науч. конф. - Витебск, 1993. - С.48.
Артамонова, А.А. Проблема дирофиляриоза на Северном Кавказе /

А.А. Артамонова, С.А. Нагорный, Н.А. Строкатова [и др.] // Тез. докл.

Всерос. симп. «Роль Российской гельминтологической школы в развитии паразитологии», 8-10 дек. - М., 1997. - С. 4-5.

Архипов, И.А. Дирофиляриоз собак в Сурхандарьинской области / И.А. Архипов, С.В. Березкина, Н.В. Демидов // Матер. науч. конф.

Всес. об-ва гельминтол. 1983. - С. 104-106.

Архипов, И.А. Использование собак, инвазированных Dirofilaria immitis, в качестве модели для поиска филярицидных препаратов / И.А.

Архипов // Бюл. Всес. института гельминтол. 1986. - Вып. 42. - С. 5-8.

Архипов, И.А. Стратегия лечебно-профилактических мероприятий при дирофиляриозе собак / И.А. Архипов, Д.Р. Архипова // Матер. докл. научн. конф. "Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями (зоонозы)". - М., 2002. - С. 24-26.
Архипов, И.А. Дирофиляриоз. / И.А. Архипов, Д.Р. Архипова. - Москва:

Россельхозакадемия, 2004. - 194 с.

Архипова, Д.Р. Биология дирофилярий и эпизоотология дирофиляриоза собак в степной зоне юга России: автореф. дис. … канд. биол. наук: 03.00.19, 16.00.03 / Архипова Дина Рамильевна. Н. Новгород, 2003. - 26с.
Баранова, A.M. Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке

/ A.M. Баранова, М.Н. Лебедева, В.П. Сергиев // Медицина. - 2003. - С. 412-432.

Березанцев, Ю.А. Случай дирофиляриоза человека / Ю.А. Березанцев // Мед. паразитол.и паразитарн. бол. - 1961. - Т. XXX. № 4. - С. 471.
Бескровная, Ю.Г. Дирофиляриоз на юге России: распространение и диагностика: дис. ...канд. биол. наук: 03.00.19 / Бескровная Юлия Григорьевна. - Ростов-на-Дону, 2009. - 140 с.
Бескровная, Ю.Г., Нагорный С.А. Идентификация микрофилярий Dirofilaria spp. с помощью методов ПЦР / Ю.Г. Бескровная, С.А. Нагорный // Матер, докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 2008. - С. 73-75.
Беспалова, Н.С. Изучение гельминтофауны собак в г. Воронеже и области / Н.С. Беспалова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: Матриалы докл.науч.конф. - М., 1999. - С.35.
Блажин, А.Н. Гельминтофауна собак в Абхазии и ее роль в развитии продуктивного собаководства / А.Н. Блажин // Тр. Тропич. ин-т НКЗ Абхазской АССР. - 1937. - Вып.З. - С. 135-143.
Богданова, Т. В. Биологические аспекты паразитирования Dirofilaria immitis у собак в Астраханской области: автореферат дис. ... канд. биол. наук: 03.02.01 / Богданова Татьяна Викторовна. - Москва, 2010. - 18 с.
Бойко, В.П. Состояние ренальной гемодинамики и ее коррекция при дирофиляриозе собак: автореферат дис. … канд. вет. наук: 06.02.01 / Бойко Василий Павлович. - п. Персиановский, 2012. - 17 с.
Болгаренко, A.B. Дирофиляриозы человека в Николаевской области /

A.B. Болгаренко // Мед.паразитология и паразитарные болезни. - 2001. - № 3. - С.57-58.

Борисова, М.А. Дирофиляриоз у человека / М.А. Борисова, Н.П. Сирота Н.П. // Проблемы и перспективы паразитологии. Харьков-Луганск, 1997. - С.28-29.
Бурджанадзе, П. Л. К вопросу о важнейших гельминтозах сельскохозяйственных животных Грузии / П. Л. Бурджанадзе // Тр. Грузин. НИВОС. - 1943. - Т. 8. С. - 36-62.
Василик, Н.С. Деяки аспекти епизоотологии та клиничного прояву инвазии Dirofilaria repens у собак Киивського региону / Н.С. Василик // Вет. мед. Укр. - Киев, 2001. - С. 25-27.
Веденеев, С.А. Биохимические и гематологические показатели при дирофиляриозе собак и на фоне лечения / С.А. Веденеев // Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - 2004. - Вып. 5. - С. 101.
Величко, C.B. К диагностике дирофиляриоза собак в Украине / C.B.

Величко, Н.С. Василик [и др.] // Матер. VI Мижн. наук.-практ. конф.. - Киев, 2001. - С.15-18.

Вибе, П.П. К гельминтофауне собак Семипалатинской области / П.П.

Вибе // Природная очаговость болезней и вопросы паразитологии. - Алма-Ата, 1961. - С. 302-303.

Винокурова, Д.П. Распространение и патоморфология дирофиляриоза у собак и кошек в краснодарском крае и морфология дирофилярий: автореф. дис. … кан. вет. наук: 06.02.01, 03.02.11/ Винокурова Диана Петровна - Ставрополь. - 2011. -19 с.
Гаркави, Б.Л. Распространение дирофиляриоза домашних собак в Краснодаре / Б.Л. Гаркави, Михно Ф.С // Мат. докл. научн. конф. "Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями". 22-23 мая

2002. - М., 2002. - С. 91.

Горохов, В.В. Проблемы паразитарных болезней в современных условиях / В.В. Горохов // Ветеринария. - 1996 - №7 - С.8-17.
Горохов, В.В. Дирофиляриозы плотоядных / В.В. Горохов, Москвин А.С // Ветеринария. - 2001. - № 8. - С. 6-8.
Гуськов, В.В. Дирофиляриоз в Астраханской области / В.В. Гуськов,

Е.В. Горшкова [и др.] // Лечащий врач. - 2001. - №1. - С. 51-56.

Дарченкова, Н.Н. Распространение дирофиляриоза человека в России / Н.Н. Дарченкова, В.Г. Супряга, М.В. Гузеева [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 2009. - №2. - С.3-7.
Дахно, И.С. Дирофиляриоз собак у Пивнично-Схидний части Украини / И.С. Дахно, Ю.П. Немешкало, Г.П. Дахно [и др.] // Матер. III Мижнар. наук.- практ. конф. - Киев, 1998. - С. 97-99.
Демидова, А.Я. Гельминтофауна собак Азербайджана / А.Я. Демидова // Сб. работ по гельминтологии. М.: 1937. - С. 123-125.
Дорофеев, Ю.А. О случаях дирофиляриоза у жителей Крыма / Ю.А. Дорофеев, В.В. Дашевский, М.Н. Колтанюк [и др.] // Мед. паразитол. - 1997. - №4. - С.7-8.
Жданова, М.Г. К вопросу о гельминтофауне собак города Самарканда /

М.Г. Жданова // Тр. Узб. гос. с.-х. ин-та. - 1949. - Т. 7. - С. 127-133.

Жуков, В.М. Патоморфология дирофиляриозной инвазии / В.М. Жуков // Ветеринария - 2011. - №7. - С.31-32.
Каденации, А.Н. Гельминтофауна млекопитающих Крыма и опыт оздоровления домашних животных от основных гельминтозов: дис. ... докт. биол. наук: 03.00.19 / Каденации Антон Николаевич. - М., 1956. - 458с.
Кадыров, У.Г. Патологические изменения при дирофиляриозе у собак и его осложнениях / У.Г. Кадыров, Е.Н. Сковородин // Ветеринарная медицина. Современные проблемы и перспективы развития: Материалы Международной научно-практической конференции / Под ред. А.А.

Волкова. - ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 2010. - С. 190 -191.

Карвовський, О. Дирофиляриоз собак у Криму / О. Карвовський, О. Макаревич, Ю. Простянецока // Вет. Медицина Украни. - 1997. - №5. - С.25-27.
Козлов, Д.П. К распространению Dirofilaria immitis в Хабаровском крае /

Д.П. Козлов, Н.А. Скворцова // Тез. докл. научн. конф. Всес. об-ва гельминтол. - 1962. - Ч. 1. - С. 84-86.

Колесников, П.В. Диагностика и терапия кардиопульмональной недостаточности при дирофиляриозе у собак: дис. ... канд. вет. наук: 03.00.19, 16.00.01 / Колесников Павел Викторович - Волгоград, 2009. - 145 с.
Колодий, И.В. Особенности ремоделирования правого желудочка собак при дирофиляриозе, вызванном D. immitis: дис. ... канд. биол. наук: 03.00.19, 16.00.02 / Колодий Ирина Владимировна - Новочеркаск, 2009.

- 106 с.

Колодий, И.В. Распространение трансмиссивных заболеваний собак в аспекте глобального потепления / И.В. Колодий, А.М. Ермаков, В.В. Карташев, С.Н. Карташев // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2012. - №1. - С.74-76.
Кононов, Е.Ф. Подсчет микрофилярий в крови собак / Е.Ф. Кононов //

Сб. науч.- практ. раб. вет. состава погран. войск. - 1958. - В. 1. - С. 62-

64.

Кочеткова, М.В. Редкий случай дирофиляриоза человека / М.В.

Кочеткова // Нижегородский мед. журнал. 1998. - № 4. 0 С. 87-88.

Кудинов, А.В. Дирофиляриоз теперь и в Саратове / А.В. Кудинов, Л.В.

Анникова // Вет. Поволжья. - 2002. - № 3. - С 19-21.

Кудряшов, А.А. Патогенез и патологическая анатомия инфекционных болезней собак и кошек / А.А. Кудряшов. - СПб., 1997. - 122 с.
Лельчук, С.А. Дирофиляриоз половых органов у подростка / С.А. Лельчук, О.О. Белякова, Б.И. Гельцер // Андрология и генитальная хирургия. - 2011.

- № 1. - С. 73-75.

Лысенкова, А. С. Функционально-морфологическая характеристика гистогематического барьера легких у собак при дирофиляриозе: автореферат дис. ... канд. Биол. наук: 06.02.01 / Лысенкова Антонина Сергеевна. - Ставрополь, 2013. - 18 с.
Мазуркевич, А.И. Деяки лаборатории показники крови у собак при инвазии D. repens / А.И. Мазуркевич, И.И. Абраменко, С.В. Величко [и др.] // Наук. висник НАУ. - 2000. - С. 137-142.
Мазуркевич, А.И. Дирофиляриоз собак у Киевському региони / А.И.

Мазуркевич, С.В. Величко, Н.С. Василик [и др.] // Ветеринарна мед. Укр. - Киев, 2001. - С. 18-19.

Медведев, А.Ю. Распространение дирофиляриоза собак в Краснодарском крае, и разработка его диагностики иммуноферментной реакцией: дис. ... канд. вет. наук: 03.00.19 / Медведев Андрей Юрьевич. - М., 2007. - 137 с.
Мезенцев, С.В. Эпизоотология дирофиляриоза собак в Алтайском крае / С.В. Мезенцев // Вестник Алтайского гос. аграрн. ун-та, 2013. - №5(103) - С. 110-113.
Метелкин, А.И. О микрофиляриозе собак / А.И. Метелкин // Русск. журн. троп. мед. - 1927. - № 5. - С. 310-329.
Нагорный, С.А. Очаги дирофиляриоза в г. Ростове-на-Дону / С.А. Нагорный, А.А. Артамонова // Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 1999. - С. 177179.
Нагорный, С.А. Эпизоотология и эпидемиология дирофиляриоза в Ростовской области/ С.А. Нагорный, Л.А. Ермакова, Е.Ю. Криворотова

// Матер. Х съезда ВНПОЭМП. «Новые паразитозы возвращаются». -

М., 2012. - С. 373.

Насилова, В.В. К изучению клинической картины дирофиляриоза собак / В.В. Насилова // Тр. Ереван. зовет. ин-та. - 1952. - В. 14. - С. 171-180.
Парамонов, В. В. Диагностика, клинические проявления и распространенность дирофиляриоза собак / В. В. Парамонов // Вестник

Башкирского государственного аграрного университета, 2012. т. № 4

(24). - С.29-31.

Парамонов, В.В. Патоморфология, патогенез и диагностика дирофиляриоза у собак / В.В. Парамонов // Состояние, проблемы и перспективы развития АПК. Мат. Международной науч.-практ. конференции, посвященной 80-летию ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ.

Часть 1. Уфа: ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2010. - С.106-109.

Парамонов, В. В. Диагностика, клинические проявления, расспространенность дирофиляриоза собак / В. В. Парамонов // Научное обеспечение устойчивого развития АПК. Материалы Всерос. научно-практ. конф. Уфа: Башкирский ГАУ, 2011. - С .161-164.
Парамонов, В. В. Патоморфологические изменения при

дирофиляриозе у собак и его осложнениях / В. В. Парамонов, Е. Н. Сковородин // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных: сб. научн. тр. по матер. 17-й Всерос. науч.-метод. конф. по патологической анатомии. - Москва:

Московская ГАВМБ, 2011. - С.97-99.

Парамонов, В. В. Диагностика, лечение и профилактика дирофиляриоза собак / В. В. Парамонов, Е. Н. Сковородин // Современные достижения ветеринарной медицины в сельскохозяйственном производстве. Африканская чума свиней - прогноз, проблемы и пути их решения. Материалы всерос. науч.- практ. конф. в рамках ХХII междунар. спец. выставки "АгроКомплекс-2012". - Уфа. - 2012. - С.48-51.
Петренко О.Ф. Диагностика и лечение дирофиляриоза собак /О.Ф.

Петренко // Независимая газета. – 2003. - №26(2859). - С.3.

Петров, A.M. Глистные инвазии собак и их санитарное и экономическое значение / A.M. Петров. - М.: Сельхозгиз, 1931. - 191 с.
Петропавловский, Н.И. К вопросу о Filaria immitis в крови у собак / Н.И. Петропавловский. Архив вет. науки. - 1904. - кн. 6. - С. 484-492.
Пленкина Л.В. Дирофиляриоз в Нижегородской области / Л.В. Пленкина, Е.А. Смирнова // Матер. докл. научн. конф. "Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями" - М., 2002. - С. 244-245.
Подъяпольская, В.П. Глистные болезни человека / В.П. Подъяпольская, В.Ф. Капустин. М.: Медгиз, 1958. - 664 с.
Поживил, А.И. Диагностика и лечение дирофиляриоза собак / А.И. Поживил, О.Ф. Петренко, В.Н. Чомко [и др.] // Матер. IV Мижн. наук.практ. конф. Проблеми ветеринарного обслуговування дрiбних домашнiх тварин. Киев, 1999. - C. 114-116.
Поживил, А.И. Дирофиляриоз собак / А.И. Поживил, В.М. Горжеев // Вет. медицина Украни. - 1999. - №3. - С. 38-40.
Поживил, А.И. Випадки захворювання собак дирофиляриоз в Украини / А.И. Поживил, В.Т. Мищишин, В.Ф. Галат // Матер. III Мижн. наук.практ. конф. - Киев, 1998. - С. 114-116.
Пономарев, А.А. Кровососущие насекомые как фактор передачи инфекционных и инвазионных болезней животных / А.А. Пономарев, Ф.И. Василевич // Актуальные вопросы ветеринарной медицины /

Новосиб. гос. аграр. ун -т . - 2005. - С. 184.

Пульняшенко, П.Р. Некоторые аспекты диагностики и лечения дирофиляриоза / П.Р. Пульняшенко, В.А. Чаркин // Матер. 1-й Международн. науч.-практ. вет. конф. по проблемам мелких животных, Одесса, Украина. - 2002. - С. 101-105.
Роберман, С.Л. Материалы по гельминтофауне собак Киргизской ССР /

С.Л. Роберман // Ветеринария. - 1941. - № 4. - С. 18.

Романова, М.В. Дирофиляриоз - как природно-очаговая инвазия плотоядных в условиях Нижнего Поволжья (на примере Волгоградской области) / М.В. Романова, Е.С. Баранович, Т.Н. Демидова, Курганская

О.Ю. // Вопросы нормативно -правового регулирования в ветеринарии. - 2013. - N 1 . - С.79-81.

Салимов, В.А. Особенности патоморфологических изменений при диро-филяриозе собак / А.В. Салимов // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. - 2009. - №1. - С. 35 -38.
Салимов, В.А. Дирофиляриоз собак и кошек в северо-восточной части Самарской области / А.В. Салимов, А.В.Жаров // Материалы III съезда Российского общества патологоанатомов, Самара, 2009. - Т. 2. - С. 444.
Серебрякова, Н.В. Научное обоснование комплекса мероприятий при дирофиляриозе служебных собак: дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Серебрякова Наталья Валерьевна - Новочеркаск, 2009. - 146 с.
Сергеев, В.П. Дирофиляриоз человека в России / В.П. Сергеев, В.Г. Супряга, Н.Н. Дарченкова, Л.А. Жукова, Т.Н. Иванова // Российский паразитологический журнал. - 2012. - №4. - С. 60-64.
Сковородин, Е.Н. Клинико-морфологические показатели при осложнениях дирофиляриоза у собак / Е.Н. Сковородин, В.В. Парамонов // Безопасность жизнедеятельности: современные проблемы и пути их решения. Материалы II международной научно-практической конференции (Уфа, 29 апреля 2011 года). Уфа: Здравоохранение Башкортостана, 2011. - С. 235-237.
Сковородин, Е. Н. Прижизненная и патоморфологическая диагностика дирофиляриоза собак / Е. Н. Сковородин, В. В. Парамонов // Ученые записки учреждения образования "Витебская государственная академия ветеринарной медицины": научно-практический журнал. - 2011. - Т.

47, вып. 2, ч. 1. - С. 97-99.

Сковородин, Е. Н. Осложнения дирофиляриоза собак /Е. Н. Сковородин, В. В. Парамонов // Инновационному развитию АПК - научное обеспечение. Материалы междунар. науч.-практ. конф. в рамках ХХII междунар. спец. выставки "АгроКомплекс-2012". - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2012. - С.283-284.
Сковородин, Е.Н. Патологическая анатомия дирофиляриоза собак / Е.Н. Сковородин, В.В. Парамонов // Современные подходы к обеспечению здоровья животных. Инновации, опыт, проблемы и пути решения. Материалы всероссийской научно-практической конференции в рамках XXIII международной специализированной выставки «АгроКомплекс 2013». Уфа, 2013. - С. 106-110.
Скрябин, К.И. К характеристике гельминтофауны домашних животных Туркестана / К.И. Скрябин. Юрьев, 1916.
Скрябин, К. И. Филярии животных и человека/ К. И. Скрябин, Н. П.

Шихобалова. - М.: Изд. ОГИЗ - Сельхозгиз, 1948. С. 152-180.

Согоян, И.С. Патолого-морфологические изменения при дирофиляриозе собак / И.С. Согоян // Тр. Арм. НИИЖиВ. - 1962. - Т. 6.

- С. 117-121.

Сонин, М.Д. Филяриаты животных и человека и вызываемые ими заболевания / М.Д. Сонин // Москва, 1975. - Т. 25. - С. 270-274.
Степанян, С.Г. Гельминты собак Кзыл-Ординской области и их эпизоотолого-эпидемиологическое значение /С.Г. Степанян //

Природная очаговость болезней и вопросы паразитологии. - Алма-Ата, 1961. - С. 298-301.

Супряга, В.Г. Диагностика филяриатозов у лиц с низкой плотностью микрофилярий в крови / В.Г. Супряга, А.И. Андреенков // Мед. паразитол. и паразитар. болезни. - 1978. - № 6. - С. 100-102.
Сухова, М.В. Эпизоотологический надзор при дирофиляриозе плотоядных в условиях Среднего и Нижнего Поволжья: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03, 03.00.19. / Сухова Мария Владимировна. - Нижний Новгород. - 2002. - 22 с.
Тасбергенова, С.А. Случай филяриоза у ребенка / С.А. Тасбергенова, А.Ж. Аубаксирова // Мед. паразитол. - 1985. - Т. 104. - №6. - С. 65-66.
Трусов, М.С. Филяриидоз глаз в СССР / М.С.Трусов //

Офтальмологич. журнал. - 1966. - №6. - С. 440-442.

Феддер, М.Л. Случаи обнаружения в комарах личинок филярий / М.Л.

Феддер, Н.П. Резник, М.Л. Данилевский // Мед. паразитол. и паразитарн. бол. - 1976. - № 2. - С. 229-230.

Феттер, Н.Д. О случаях дирофиляриоза в Белгородской области/ Н.Д. Феттер, Н.Б. Беляев, Е.А. Фирсова // Материалы IX Съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. - М., 2007. - С. 310-311.
Филиппов, Н.В. Дирофиляриоз собак в условиях г. Волжский / Н.В. Филиппов, С.А. Веденеев, Л.С. Сметанюк // Матер. IV Межрег. конф. "Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных и лошадей на Северном Кавказе". - Ставрополь, 2001. - С. 176-178.
Фисько, A.M. Распространение дирофиляриоза собак в Ростовской области / A.M. Фисько // Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 2008. - С. 497-499.
Худавердиев, Т.П. К изучению распространения дирофиляриоза кровососущими насекомыми в условиях Нахичеванской АССР / Т.П. Худавердиев, Ш.М. Джафаров // Уч. зап. Азерб. гос. унив. - 1979. - Вып.

1. - С. 16-21.

Чун-Сюн, Ф. О распространении Dirofilaria repens в Казахстане / Ф. Чун- Сюн // Мед. паразитол. и паразитарн. бол. - 1959. - Ч.4. - С. 483.
Шинкаренко, А.И. Экология паразитов собак и меры борьбы с вызываемыми ими заболеваниями в Нижнем Поволжье: автореф. дис.

… докт. вет. наук: 03.00.19, 16.00.03 / Шинкаренко Александр Николаевич. - Иваново, 2005. - 53 с.

Шинкаренко, А.Н.Эпизоотология основных гельминтозов собак в Волгоградской области / А.Н. Шинкаренко, Ю.Ф. Петров // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. 2005. - Т. 41. - С. 434-438.
Шлейхер, Э.И. К вопросу о дирофиляриозе подкожной клетчатки собак / Э.И. Шлейхер // Сб. работ по гельминтол. - 1948. - С. 247-250.
Шульман, Е.С. / Е.С. Шульман, В.Г. Супряга // Научная конференция «Гельминтология сегодня: проблемы и перспективы», тезисы докладов, М., 1989. - Т. 2. - С. 188.
Ярошенко, Н.В. Морфофункциональные особенности ассоциативного течения пироплазмоза и дирофиляриоза у собак: дис. ... канд. вет. наук:

06.02.01, 03.02.11 /Ярошенко Наталья Валерьевна. - Новочеркаск, 2010.

- 160 с.

Ястреб, В.Б. Гельминтофауна хищников дикой природы Центрального района России / В.Б. Ястреб, Б.Г. Абалихин, Е.Н.

Крючкова // Сб. теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. М.: 2003. - Вып. 4. - С. 512-514.

Ястреб, В.Б. Некоторые аспекты эпизоотологии дирофиляриоза собак в Московском регионе / В.Б. Ястреб // Материалы докладов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», 2004. - вып. №5. - С. 440-442.
Ястреб, В.Б. Дирофиляриоз в Московском регионе / В.Б. Ястреб, A.M. Шестаков // Материалы XII Международного Московского конгресса по болезням мелких домашних животных, М., 2004. - С. 38-

40.

Ястреб, В.Б. Дирофиляриоз собак в Центральном регионе России / В.Б. Ястреб // Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - 2006. - Т. 42. - С. 457- 467.
Ястреб, В.Б. Гельминтозоонозы: эхинококкоз и дирофиляриоз: биоморфологические особенности возбудителей, совершенствование мер борьбы: дис. ...докт. вет. наук: 03.00.19 / Ястреб Валерий

Брониславович. - Москва, 2009. - 252 с.

Abraham, D. Dirofilaria immitis: Molting Process of Third-Stage Larvae / D. Abraham, R.B. Grieve, J.A. Oaks // Exp. Parasitol. - 1990. - V. 70, N 3. - P. 314-322.
Atwell, R.B. Clinical presentations of canine dirofilariasis with relation to their haemotological and microfilarial status / R.B. Atwell, I.B. Buoro // Res. Vet. Sci. - 1983. - V. 35, N3. - P. 364-366.
Aubrey, J.N. Diethylcarbamazine in the treatment of Dirofilaria immitis in the dog / J.N. Aubrey //Austral. Vet. J. -1969. - V. 45, N 4. - P. 206.
Bancroft, T.L. On some further observations on the life history of Filaria immitis Leidy / T.L. Bancroft //Brit. Vet. J. - 1904. - V. l. - P. 822-823.
Baneth, G. Dirifilaria repens infection in a dog: diagnosis and treatment with melarsomine and doramectin / G. Baneth, Z. Volansky, Y. Anug et al.

// Vet. Parasitol. - 2002. - V. 105, N 2. P. 173-178.

Blair, L.S. Dose-response study of ivermectin against Dirofilaria immitis microfilariae in dogs with naturally acquired infections / L.S. Blair, P.F.

Malatesta, D.V. Ewanciw //Amer. J. Vet. Res. - 1983. - V. 44, N 3. - P. 475-477.

Bredal, W.P. Adult Dirofilaria repens in a subcutaneous granuloma on the chest of a dog / W.P. Bredal, B. Gjerde, M.L. Eberhard, et al. // J. Small

Anim. Pract. - 1998. - № 39(12). - P. 595-597.

Burch, G. Dirofilariasis and its diagnosis / G. Burch, H.E. Blair // Vet. Med. - 1951. - V. 46. - P. 128.
Calvert, C.A. Heartworm disease. In: Manual of Canine and Feline Cardiology / C.A. Calvert // Philadelphia, W.B. Saunders. - 1995. - P. 225229.
Calvert, C.A. Therapy of canine heartworm disease / C.A. Calvert, C.A. Rawlings // Small Anim. Pract. - 1986. - P. 406-419.
Campbell, W.C. Efficacy of avermectins against Dirofilaria immitis in dogs / Campbell W.C., Blair L.S. // J. of Helminthol. - 1978. - V. 52. - P.

308-310.

Carlos, E.T. Comparative study between Knott’s and Ohishi test for the laboratory diagnosis of canine filariasis / E.T. Carlos, L.L. Magaway, F.T. Calalay // Phil. J.Vet. Anim. Sci. - 1979. - V. 5, N 3. - P. 194-198.
Chalifoux, L. Histochemical differentiation of Dirofilaria immitis and Dipetalonema reconditum / L.Chalifoux, R.D. Hunt // J. Amer. Vet. Med.

Assoc. - 1971. - V.158. - P. 601-605.

Clemence, R.G. Efficacy of selamectin in the prevention of adult heartworm (Dirofilaria immitis) infection in dogs in northern Italy / R.G. Clemence, P. Sarasola, C. Genchi et al. // Vet. Parasitol. - 2000. - V. 91, N 3/4. - P. 251-258.
Courtney, C.H. Sensitivity and specificity of the CIT heartworm antigen test and a comparison with the Dirochek heartworm antigen test / C.H. Courtney, Q.Y. Zeng, Q. Tonelli // J. Amer. Anim. Hosp. Assoc. - 1990. - V.

26. - P. 623-628.

Cringoli, G. A prevalence survey and risk analysis offilariosis in dogs from the Mt. Vesuvius area of southern Italy / G.Cringoli, L. Rinaldi, V.

Veneziano, G. Capelli // Vet. Parasitol. - 2001. - V. 102, №3. - P. 243-252.

Hawking, A.G. Pulmonary dirofilariasis diagnosed by fine needle aspiration biopsy: a case report / A.G. Hawking, J.G. Hsiu, R.M. Smith et al. // Acta Cytologica. - 1985. - V. 29. - P. 19-22.
Hinman, E.H. Filarial periodicity / E.H. Hinman // J. Trop. Med. Hyg. - 1937. - V. 40. P. 200-205.
Favia, G. Polymerase chain reaction-identification of Dirofilaria repens and Dirofilaria immitis / G. Favia, A. Lanfrancotti, A. Torre et al. // Parasitology. - 1996. - V. 113, N6. - P. 567-571.
Genchi, C. Cardiopulmonary dirofilariasis in dogs: epidemiology and prophilaxis / C. Genchi, A.Vezzoni, В. Sacco, G. Baroni // Vet. (Cremona).

- 1991. - V. 5, №2. P. 83-90.

Genchi, C. Efficacy of selamectin in the prevention of Dirofilaria repens in dogs / C. Genchi, G. Poglayen, L. Kramer et al. // Vet. (Cremona). - 2002 - V. 16, N 1. - P. 69-71.
Genchi, C. Efficacy of injectable, sustained-release formulation of moxidectin against patent heartworm (Dirofilaria immitis) infection in dogs / C. Genchi, L. Kramer, M.Mortarino et al. // Vet. (Cremona). - 2002. - V. 16, N 1. - P. 21-24.
Gillis, J.M. Diagnostic criteria for an enzyme-linked immunosorbent assay for occult heartworm disease: standardization of the test system in naturally exposed dogs / J.M. Gillis, R.D. Smith, K.S. Todd // Am. J. Vet. Res. - 1984. - V. 45, N 11. - P. 2288-2292.
Gordon, H.M. Modification of the helminth egg counting Chamber / H.M.

Gordon, H.V. Whitlock // J. Coun. Sci. ind. Res. Aust. - 1939. - V. 12. - P. 50.

Grandi, G., Pathogenesis of Dirofilaria spp. Infections / G. Grandi, Т.

Zivicnjak, R. Beck // Mappe Parasitologiche 8. - Italy, 2007. - P.59-67.

Grassi, В. Propagazione della filariae del sangue esclusivomehte per mezzo della puncture di pealiaria zanzare. Note preliminare / В. Grassi, G. Noe // R. C. Accad. Lincoi. - 1900. - V. 9. - P. 157- 162.
Grieve, R.B. Chemoprophylactic effects of milbemycin oxime against larvae of Dirofilaria immitis during prepatent development / R.B. Grieve, G.R. Frank, V.A. Stewart et al. // Am. J. Vet. Res. - 1991. - V. 52, N 12. - P.

2040-2042.

Desowitz, R.S. Studies on filariasis in th e Pacific. The persistence of microfilaraemia in diethylcarbamazine treated populations of Fiji and Western Samoa. Diagnostic application of the membrane filtration technique/ R.S. Desowitz, B.A. Southgate // S.E. Asian J. Trop. Med.

Health. - 1973. - N4. - P. 179-183.

Jacobs, D.E. Efficacy and safety of selamectin against fleas and heartworms in dogs and cats presented as veterinary patients in North

America / D.E. Jacobs // Vet. Parasitol. - 2000. - V. 91, N 3/4. - P. 233250.

Jubb, K. F. Bluetongue. In pathology of domestic animals / K.F. Jubb, P.C. Kennedy // New York Academic press. - 1970. - V. 2, - P. 10-14.
Kartman, L. Factors influencing infection of the mosquito with Dirofilaria immitis Leidy, 1856 / L. Kartman // Exp. Parasitol. - 1953. - N 2. - P. 27-

28.

Katamine, D. On the periodicity of microfilaria / D. Katamine // Proc. 15th Gen. Assembly of Jap. Med. Cong. -1959. - II. - P. 651-655.
Kato, K.H. U.S.A. Patent. Immunoassay. / K.H. Kato // 1982. - N 4, 322, 495.
Keith, J.C. Early arterial injury-induced myointimal proliferation in canine pulmonary arteries / J.C. Keith, R.G. Schaub, C.А. Rawlings // Amer. J. Vet. Res. - 1983. - V.44, N 2. - P. 181-186.
Kelly, J.D. Detection and differentiation of microfilariae in canine blood / J.D. Kelly // Austral. Vet. J. - 1973. - V. 49, N l. - P. 23-27.
Knott, J.I. Method for making microfilarial surveys on day blood / J.I. Knott //Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. - 1939. - V. 33. - P. 191-196.
Kume, S. On the life cycle of Dirofilaria immitis in the dog as the final host / S. Kume, S. Itagaki // Brit. Vet. J. - 1955. - V. 111. - P. 16-24.
Kume, S. Epizootology of canine heartworm disease in the Tokyo area:

diagnosis and treatment / S. Kume // Proc. 1-st Intern. Symp. оn Can. Heartworm Dis., 1970. - P. 18-33.

Kutz F. W. Effects of the temperature on the development of Dirofilaria immitis (Leidy) in Anopheles quadrimaculatus (Say) and on vector mortality. Resulting from this development / F.W. Kutz, R .C. Dobson // Ann. Entomol. Soc. Am. - 1974. - N 67. - P. 325-331.
Lahitte, J.D. Etude comparative de sinq methodes de detection des Microfilaires sanguicoles / J.D. Lahitte, B. Davoust, P. Dorchies // Rev. Med. Vet. - 1986. - V. 137, N 10. - P. 639-644.
Leidy, J. Worms in heart of dog / J. Leidy // Proc. Acad Nat Sci., Philadelphia. - 1856. - V. 10, N l. - P. 110-112.
Lent, H. Contribuicao ao estudo do genero Dirofilaria Railliet et Henry, 1911 / H. Lent, J.F.T. Freitas // Mems. Inst. Osw. Cruz. -1937. -V. 32. - P.

37-54, 443-448.

Lindsey, J.R. Identification of canine microfilariae / J.R. Lindsey //J.

Amer. Vet. Assoc. - 1965. -V. 146. - P. 1106-1114.

Liu, S.K. Adult Dirofilaria immitis in the arterial system of a dog / S.K. Liu, K.M. Das, R.J. Tashjian // J. Amer. Vet. Med. Assoc. - 1966. - V.

148. - P. 1501-1507.

Liu, S.K. Pulmonary collateral circulation in canine dirofilariasis / S.K.

Liu, D.A. Yarns, J.A. Carmichael et al. // Amer. J. Vet. Res. - 1969. - V.

30. - P. 1723-1735.

Lok, J.B. Dirofilaria sp.: Taxonomy and distribution. In: Dirofilariasis. Ed. Boreham P.F.L., Atwell R.B. - 1998. - P. 1-28.
Lok, J.B. Activity of an injectable, sustained-release formulation of moxidectin administered prophylactically to mixed-breed dogs to prevent infection with Dirofilaria immitis / J.B. Lok, D.H. Knight, G.T. Wang et al. // Am. J. of Vet. Res. - 2001. - V. 62, N 11. - P. 1721-1726.
Manda, J.A. Transplacental migration of Dirofilaria immitis microfilariae / J.A. Manda // Companion Animal Practice. - 1989. - V. 19, № 6-7. - P. 18-

20.

McCall, J.W. Clinical prophylactic ctivity of melarsomine dihydrochloride (RM 340) against Dirofilaria immitis in heartworm-naïve beagles exposed to natural infection in three southeastern states / J.W. McCall,

M.T. Dzimianski, T.L. McTier // Vet. Parasitol. - 1994. - V. 55, № 3. - P.

205-219.

McCall, J.W. Laboratory and in-clinic methods for the diagnosis of Dirofilaria immitis infections / J.W. McCall // Abstracts the 18 Intern. Conf. WAAVP, Stresa, Italy. - 2001. - P. 184.
McCall, J.W. Prophylactic activity of mebendazole against D.immitis in dogs / J.W. McCall, H.H. Crouthamel // J. of Parasitol. - 1976. - V. 62, N 5. - P. 844-845.
McTier, T.L. Prevention of experimentally induced heartworm (Dirofilaria immitis) infections in dogs and cats with a single topical application of selamectin / T.L. McTier, D.J. Shanks, P. Watson et al. //Vet. Parasitol. - 2000. - V. 91, N3/4. - P. 259-268.
Mines, J.J. Method of counting of canine microfilariae / J.J. Mines // Austral. Vet. J. - 1967. - V. 43. - P. 599.
Newton, W.L. Experimental transmission of the dog heartworm, Dirofilaria immitis, by Anopheles quadrimaculatus / W.L. Newton // J. of Parasitol. - 1957. - V. 43. - P. 589.
Newton, W.L. The occurrence of a dog filarid other than Dirofilaria immitis in the United States / W.L. Newton, W.H. Wright // J. of Parasitol. - 1956. - V. 42. - P. 246-258.
Ohishi, I. Semifield study on prophylacticefficacy of ivermectin by in termittent medication against Dirofilaria immitis infection in dogs / I.

Ohishi, H. Katae, K. Nakagaki et al. // Jap. J. Vet. Sci. - 1988. - V. 50, N 1. - P. 125-130.

Railliet, A. Sur une Filaire peritoneale des Porcins / A. Railliet, A. Henry // Bull. Soc. Path. exot. - 1911. - V. 4. - P. 386-389.
Paul, A.J. Efficacy of ivermectin against Dirofilaria immitis larvae in dogs 30 and 45 days after induced infection / A.J. Paul, K.S. Todd, J.P. Sundberg et al. // Amer. J. Vet. Res. - 1986. - V. 47, N 4. - P. 883-884.
Peribanez, M.A. Histochemical differentiation of Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens and Acanthocheilonema dracunculoides microfilariae by staining with a commercial kit, Leucognost-SP / M.A. Peribanez, J. Lucientes, S. Arce et al. // Vet. Parasitol - 2001. - V. 102, N 1-2. - P. 173175.
Raynaud, J.P. Thiacertarsamide (adulticide) versus melarsomine (RM 340) developed as macrofilaricide (adulticide and larvicide) to cure canine heartworm infection in dogs / J.P. Raynaud // Ann. Rech. Vet. - 1992. - V. 23, N 1. - P. 1-25.
Rawlings, C.A. Four types of occult Dirofilaria immitis infection in dogs / C.A. Rawlings, D.L. Dawe, J.W. McCall et al. //J. Amer. Vet. Med. Assoc. -

1982. - V. 180, №11. - P. 1323-1326.

Rawlings, C.A. Eosinophilia and basophilia in Dirofilaria immitis and Dipetalonema reconditum infections / C.A. Rawlings, A.K. Prestwood, B.B.

Beck // J. Amer. Anim. Hosp. Assoc. - 1980. - V. 16. - P. 699-704.

Richer, J.K. Dirofilaria immitis: proteases produced by third-and fourth stage larvae / J.K. Richer, J.A. Sakanari, G.R. Frank et al. //Exp. Parasitol. - 1992. - V. 75, N 2. - P. 213-222.
Sakamoto, Т. Microfilaricidal effect of' fention applied on the skin of the dog infected with Dirofilaria immitis / Т. Sakamoto, Т. Togoe, Y.

Yamamoto, Y. Kitano // Mem. Fac. Agr. Kagoshima Univ. - 1980. - V. 16. - P. 75-87.

Sakamoto, Т. Observations on the safety and anthelmintic effect of milbemycin D administered over a long period / Т. Sakamoto, I. Seki, K.

Kikuchi et al. //J. оf the Fac. of Agr. - 1984. - V. 17, N 2. - P. 197-209.

Savell, C.M. Heartworm canine diagnosis / Savell C.M. // Canine Practice.

- 1974. - V. 1, N 4. - P. 18-22.

Schaub, R.G. Pulmonary vascular response during phase of canine heartworm disease: scanning electron microscopy study / R.G. Schaub, C.A.

Rawlings // Amer. J. Vet. Res. - 1980. - V. 41. - P. 1082-1089.

Sharma M.S. Blood cellular and biochemical studie s I n canine dirofilariasis / M.S. Sharma, S.P. Paсhauri // Vet. Res. Comm. - 1982. - V.5, N 3. - P. 295-300.
Scholtens, R.G. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay for occult dirofilariasis in a population of naturally exposed dogs / R.G. Scholtens, S. Patton // Amer. J. Vet. Res. - 1983. - V. 44, N 5. - P. 861- 864.
Schrey, C.F. Heartworm disease in cats and dogs - diagnosis and therapy / C.F. Schrey, E. Trautvetter // Waltham Focus. - 1998. - V. 8, N 3. - P. 23-

30.

Schrey, C.F. Epidemiological analysis of cases and clinical features of cardiovascular dirofilariasis (heartworm disease) in dogs in Germany. / C.F. Schrey // Dis. Doc. Vet. Med. -1996. - Р. 125.
Schalm, O.W. Detection of microfilariae using the capillary hematocrit tube / O.W. Schalm, N.C. Jain // California Vet. - 1966. - V. 20. - P. 14-16.
Slonka, C.F. Adult heartworms in arteries and veins of a dog / C.F. Slonka, W. Castleman, S. Krum // J. Amer. Vet Med. Assoc. - 1977. - V. 170. - P. 717-719.
Tarello, W. Subcutaneous canine dirofilariasis due to Dirofilaria (Nochtiella) repens of american origin in Italy: case report / W. Tarello // Rev. de Med. Vet. - 2000. - V. 151, N11. - P. 1053-1058.
Taylor, A.E.R. Studies on the microfilariae of Zoa loa, Wulcherelria bancrofti, Brugia malayi, Dirofilaria immitis, D. repens and D. aethiops / A.E.R. Taylor // J. of Helminthol. - 1960. - N 34. - P. 13-26.
Uchide, Т. Elevated endothelin-1 expression in dogs with heartworm disease / Т. Uchide, K. Saida // J. Vet. Med. Sci. - 2005. - V. 67. P. 11551161.
Vakalis, N.C. Human and canine dirofilariasis in Greece / N.C. Vakalis, С. A. Himonas // Parasitollogia. - 1997. - V.39, N4. - P.389-391.
Venco, L. Heartworm (Dirofilaria immitis) diseas in dogs / L. Venco // Mappe Parasitologiche 8. -Italy, 2007. - Р.117-125.
Wang, J.S. Alteration of extracellular collagen matrix in the myocardium of canines infected with Dirofilaria immitis / J.S. Wang, K.C. Tung, C.C. Huang et al. // Vet. Parasitol. - 2005. - V. 131. - P. 261-265.
Watson, A. D. A comparison of microfilariae isolated from canine blood by the modified Knott test and a filter method / A. D. Watson, F. J. Testoni, W. L. Porges // Austral. Vet. J. - 1973. - V. 49, N l. - P. 28-30.
Webber, A.F. Experimental maintenance of Dirofilaria repens and D.immitis in dogs / A.F. Webber, F. Hawking // Exper. Parasitol. - 1955. - V.

4, N 2. - P. 143-164.

Weil, G.J. Detection of parasite antigens in canine dirofilariasis by counterimmunoelectrophoresis / G.J. Weil, M.S. Malane, K.G. Powers //

Am. J. Trop. Med. Hyg. - 1984. - V. 33. - P. 425-430.

Weil, G.J. U.S.A. Patent. Circulating antigens of Dirofilaria immitis, monoclonal antibodies specific therefore and methods of preparing such antibodies and detecting antigens. / G.J. Weil // 1985. - N4, 839,275.
Wockel, W. Autochthone europaische lungen-dirofflariose / W. Wockel, J. Eckert, T. Luscher et al. // Pneumologie. - 1993. - V 47. - P. 227-331.
Wylie, J.P. Detection of microfilariae by a filter technique / J.P. Wylie // J.

Amer. Vet. Med. Assoc. - 1970. - V. 156, N 10. - P. 1403-1405.

Wilkins, R.J. Dirofilariasis - survey of diagnostic test / R.J. Wilkins, D. Ciurea // Vet. Med. - 1985. - V. 80, N 6. - P. 42-45.
Zimmerman, G.I. Heartworm infections in dogs in the northwestern United States and Britisch Columbia, Canada / G.I. Zimmerman, S.E. Knapp, W.J. Foreyt et al. // Proceedings of the Heartworm Symposium. - Batavia, Illinois: American Heartworm Society. - 1992. - P. 15-20.

Отзывы клиентов